徐明明等

摘要：目的： 探讨抑制性神经元的表达改变在FMR1基因敲除鼠癫痫发病机制的作用。方法：应用免疫组织化学染色检测2 周龄FMR1基因敲除型（KO）和同龄野生型（WT）小鼠海马抑制性神经元数目（Glutamic acid decarboxylase （GAD） and parvalbumin（PV）阳性神经元）；应用Western blot法检测上述小鼠海马组织GAD和PV的含量。结果：FMR1 KO鼠和WT鼠海马GAD神经元数目的比较：FMR1 KO鼠海马GAD神经元81±20.134，WT鼠96.11±15.186，差异具有统计学意义（P=0.006）；CA1区FMR1 KO鼠33.24±7.710，WT鼠40.59±5.738，差異具有统计学意义（P=0.001）；CA3区FMR1 KO鼠30.94±11.028，WT鼠36.06±6.432差异具有统计学意义（P=0.041）；DG区FMR1 KO鼠17.82±5.703， WT鼠21.44±3.245，差异不具有统计学意义（P=0.0669）； FMR1 KO鼠和WT鼠的GAD65.67的蛋白水平的比较，GAD65： t=5.152，P=0.000；GAD67： t=4.723，P=0.000， FMR1 KO鼠的GAD65.67的蛋白水平均高于WT鼠。FMR1 KO鼠和WT鼠海马PV阳性神经元数目的比较：FMR1 KO鼠和WT鼠海马GAD神经元数目的比较：FMR1 KO鼠海马PV阳性神经元77±16.321，WT鼠90.13±13.126，差异具有统计学意义（P=0.005）；CA1区FMR1 KO鼠24.13±6.635，WT鼠35.63±6.635，差异具有统计学意义（P=0.002）；CA3区FMR1 KO鼠25.94±9.123，WT鼠30.12±5.357差异具有统计学意义（P=0.038）；DG区FMR1 KO鼠14.73±4.473， WT鼠16.12±3.149，差异不具有统计学意义（P=0.068）； KO小鼠海马中PV表达量分别较WT小鼠减少，KO鼠0.132±0.011，WT鼠0.155±0.013，差异有统计学意义（P=0.0386）。结论：FMR-1KO小鼠海马抑制性神经元数目的减少以及PV蛋白表达减低，可能是诱发该种小鼠癫痫发病率高重要原因。KO鼠GAD表达增高，考虑和KO鼠代偿性增高有关。

关键词 ：脆性X综合征；抑制性神经元；癫痫；谷氨酸脱羧酶； 小白蛋白

中图分类号：R54 文献标识码： A 文章编号：

深圳市科技计划项目 项目编号 201303187 FMR1基因敲除鼠PV阳性神经元变化及其癫痫发病机制的研究

Abstract ： Objective.This study focused on the expression differences of Glutamic acid decarboxylase （GAD） and parvalbumin（PV） expression between FMR1KO and wild-type （WT） mice in hippocampus. Methods. 2 weeks mice were randomly obtained for immunohistochemistry and Western blotting to detect the expression.Results Number of GAD interneurons in hippocampus ： FMR1 KO mice81±20.134，WT mice 96.11±15.186 （P=0.006）； CA1： FMR1 KO mice33.24±7.710， WT mice 40.59±5.738（P=0.001）； CA3： FMR1 KO mice 30.94±11.028，WT mice 36.06±6.432 （P=0.041）； DG： FMR1 KO mice 17.82±5.703， WT mice 21.44±3.245 （P=0.0669）； The expressions of GAD65 and GAD67 were significantly increased in the hippocampus tissues in FMR-1KO when compaired to that in WT mice （P=0.000）.Number of parvalbumin（PV）-expressing interneuron in hippocampus ： FMR1 KO mice 77±16.321，WT mice 90.13±13.126 （P=0.005）； CA1： FMR1 KO mice 24.13±6.635， WT mice 35.63±6.635（P=0.002）； CA3： FMR1 KO mice 25.94±9.123，WT mice 30.12±5.357 （P=0.038）； DG： FMR1 KO mice14.73±4.473， WT mice16.12±3.149 （P=0.068）； The expressions of PV were reduced in the hippocampus tissues in FMR-1KO when compaired to that in WT mice （P=0.0386）.Conclusion The decreased number of inhibitory interneurons in the hippocampus of FMR1 KO mice demonstrates that interneurons is possible to play an critical role in increased susceptibility to epileptic seizures of FXS.Increased expression of GAD of KO mice is compensatory.

Keywords：Fragile X syndrome； interneurons； Epilepsy； Glutamic acid decarboxylase

脆性X综合征FXS（Fragile X syndrome，FXS）是最常见的遗传性智力低下疾病之一，它是一种外显率不完全的X-连锁遗传病（1），最初由细胞遗传学检查发现X染色体上存在脆性位点而得名，男性发病率明……