于 军，鲁毅巍，李 旭，王 丽

（1.吉林大学基础医学院 医学生物学实验中心，吉林 长春130021；2.吉林大学中日联谊医院，吉林 长春130033；3.吉林大学基础医学院 病原生物学系，吉林 长春130021）

在当今现代医学水平高速发展的时代，在医学科学基础研究迅猛发展的今天，为了发挥老东北中草药的特色，还有当今临床上广谱抗生素、抗癌药物和放疗化疗药物的广泛应用，所以中草药材抗深部真菌感染，经济实惠有效。为此我们进行了本实验研究。

1 材料与方法

1.1 实验菌种 ①新型隐球菌（Cryptococcus neoformans），②镰刀（Fusarium），③尖孢镰刀（F.Oxysporum），④白色念珠菌（Candidiasis albicans），⑤标准22019近平滑念珠菌（Candidiasis Parapsilosis），⑥热带念珠菌（Candidiasis tropicalis），⑦克柔念珠菌（Candidiasis krusei），⑧疣状瓶霉 （P.uerrucosa），⑨曲霉（Aspergillus）.

1.2 实验药材 黄芪（Radix Astragali）；五倍子（Galla Chinensis）；白头翁（Radix Pulsatillae）；射干（Belamcanda chinensis，DC）；金银花（Lonicera japonia Thumb）；土槿皮（Psudolarix kaempferi）；蛇 床 子 （cnidium monnieri）；苦 参 （sophora flavesens）；虎杖（Polugonum Cuspidatum siebzucc）；黄连（coptis chinensis）；黄岑（scutellaria baicalensis Georgi）；葛根（Radix Puerariae）。

1.3 中药药液制备

取每种已粉碎中药100g，用TP150超声波提取器超声1h。循环水式多用真空泵，抽滤过滤。回流浓缩成50ml的药液（旋转蒸发器RE－52A，上海亚荣生化仪器厂）。浓缩成50ml药液，浓度为2 g/ml，作为药液备用。

1.4 制备 药物培养基

本实验采用药基试管法进行MIC测定。将药液2ml加入18ml改良沙氏琼脂培养基中混匀，成为终浓度为200mg/ml的药物培养基，分装，并作等倍稀释，即第一管至第八管的浓度依次为：200 mg/ml，100mg/ml，50mg/ml，25mg/ml，12.5 mg/ml，6.25mg/ml，3.125mg/ml，1.56mg/ml的浓度。

1.5 对照培养基

沙氏琼脂培养基；克霉唑培养基（浓度为0.25 μg－16μg/ml）

1.6 实验方法与观察方法

将临床采集的致病性细菌进行分离，纯培养，将真菌种接种至沙氏琼脂斜面增菌培养，沙氏肉汤培养基将其制成菌液，接种于药基及对照培养基中。置28度温箱中培养15天，肉眼未见菌落生长的最低浓度为该药的MIC。

2 结果

在实验的12种中药中均表现出一定的抗真菌作用。其中：射干、黄岑、土槿皮、黄连、抗真菌能力强。受试的中药抗真菌MIC结果如表1，图1。

3 讨论

通过本实验研究，更加体现了老东北中药基地的天然独特作用。为了能更好的发挥中药材的药理作用，减少西药的毒副作用，有效抑制真菌的感染及并发，寻找到了好的方法。

我们知道，天然中草药的有效成份含蛋白质、萜类、生物碱类、脂肪类等，这些有效成分会作用于真菌细胞，杀伤真菌细胞活性，从而达到抗真菌作用。还有目前临床上将抗真菌中药或复方中药与唑类药物联合作用于抗真菌感染，从而提高抗真菌活性。本实验研究也是在50多种中草药中挑选出抗真菌活性强的十二种中草药，通过对十二种中草药的活性实验来达到对致病性真菌的杀菌作用，黄连、白头翁活性弱于其他十种中草药的活性，由此为下一步挑选上述活性强的中草药抗真菌的体内实验研究奠定了基础。

综所上述，中药抗真菌材料范围很广。开采老东北中草药资源丰富、且毒性小。我们下一步将建立动物模型进行动物体内抗真菌的基础实验研究，为中草药治疗临床真菌感染提供实验依据。

表1 中药抗真菌MIC试验结果（±s）

表1 中药抗真菌MIC试验结果（±s）

P＜0.01compared with control group

霉 曲霉黄芪 1.56±0.11 1.56±0.11 1.56±0.11 — — 100±0.5 3.125±0.31 3.125±0.31新型隐球菌 茄病镰刀菌 尖孢镰刀菌 白色念珠菌 近平滑念珠菌 热带念珠菌 克柔念珠菌 疣状平—五倍子 12.5±0.31 — 50±0.21 50±0.21 12.5±0.31 3.125±0.31 6.25±0.32 —白头翁 — — 1.56±0.11 — — 25±0.41 —射干 1.56±0.11 1.56±0.11 1.56±0.11 — — — — 100±0.51 —金银花 1.56±0.11 1.56±0.11 3.125±0.32 — 6.25±0.32 — — 50±0.31 —土槿皮 1.56±0.11 1.56±0.11 1.56±0.11 — 100±0.51 — — 1.56±0.11 —蛇床子 1.56±0.11 1.56±0.11 100±0.51 — — — — 1.56±0.11 —苦参 25±0.41 25±0.41 25±0.41 — 100±0.51 100±0.51 — 25±0.42 3.125±0.32虎杖 100±0.51 25±0.41 6.25±0.32 100±0.51 — 100±0.5 50±0.21 1.56±0.11 —黄连 12.5±0.3 100±0.51 100±0.51 — 25±0.4 50±0.2 50±0.21 3.125±0.32 —黄岑 50±0.3 1.56±0.11 1.56±0.11 100±0.5 1.56±0.11 — 6.25±0.32 1.56±0.11 —葛根 1.56±0.11 1.56±0.11 1.56±0.11 50±0.21 100±0.5 3.125±0.31 1.56±0.11 —克霉唑 16±0.22 2.0±0.22 2.0±0.22 8±0.22 8±0.22 8±0.22 8±0.22 2.0±0.22—

图1 12种中药对主要的六种致病真菌的MIC

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