陈燕燕等

摘要 应用质子核磁共振技术（1HNMR）结合解卷积的峰提取方法，建立了中药黄芪注射液中氨基酸、有机酸类和糖类等8种初生代谢成分的含量检测方法。注射液样品经冷冻干燥后精密称取10 mg，加入0.6 mL D2O（含内标TSP 0.02 g/mL）用于NMR测试。根据1HNMR指纹谱，从黄芪注射液中鉴定出20种初生和4种次生代谢成分。应用解卷积法提取乙酸、脯氨酸、焦谷氨酸、丙二酸、甘氨酸、葡萄糖、蔗糖、甲酸8种初生代谢成分的定量峰，然后进行峰面积积分，并采用内标法计算各个成分的含量。在给定浓度范围内，8种成分呈现良好的线性相关（R2>0.9990），精密度 RSD<3.8%，重现性RSD<2.7%，稳定性RSD<4.5%，回收率为91.4%～102.7%。结果表明，与常规处理方法相比，解卷积检峰再积分的方法可降低复杂体系中质子信号峰的重叠度，获得更加精确的定量峰积分面积，从而进一步提高1HNMR含量分析的准确度。采用本方法对5个厂家共20批黄芪注射液样品中的8种初生代谢成分进行了含量测定，并运用主成分分析法对不同厂家的样品进行了聚类和区分。

关键词；定量核磁共振法； 解卷积； 黄芪注射液； 初生代谢成分

1引言

随着仪器的发展，质子核磁共振（Nuclear magnetic resonance，1HNMR）技术目前已逐渐应用于药物分析领域，其特点在于可同时提供化合物结构确证的定性信息和含量测定的定量信息，因此分析过程无需待测物对照品，且样品预处理步骤简单、专属性强、不破坏样品 [1～5]。1HNMR常用定量方法为绝对内标定量法，即以含量已知的内标物与待测物制成混合溶液同时测定图谱，通过二者峰面积的比值确定待测物的含量[6]。在对混合物中的各个成分进行定量分析时，其关键在于每个成分定量峰的选择，通常选择完全独立、无干扰的特征质子信号峰进行含量测定。将1HNMR指纹图谱技术引入中药注射液的化学成分表征中所面临的难题是： 1HNMR谱的化学位移值范围通常比较窄（δ 0～12），在该区间内质子信号峰相互重叠严重，不易寻找到完全独立的信号峰用于多成分的含量测定。