刘广寅 刘 琳 张志勇 王 平 吴晨鹏 (唐山工人医院，河北 唐山 063000)

乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤〔1〕，欧美国家中的老年患者(60岁以上)约占49%〔2〕。细胞在基因水平上失去对本身生长的正常调控，生长周期失调紊乱，可发生肿瘤，p27 kip1作为抑癌基因，负性调控细胞周期，表达水平与细胞增殖程度紧密关联。CKS1正性调节细胞周期，是一种癌基因，能够促进肿瘤发生，在肝癌、乳腺癌、胃癌等癌组织中表达增高〔3，4〕。本研究采用免疫组织化学方法对老年浸润性导管癌患者癌组织中p27 kip1和细胞周期蛋白依赖性激酶调节亚基(CKS)1的蛋白表达进行检测，并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2011年1月至2013年12月外科手术切除的老年女性(≥60岁)乳腺浸润性导管癌的标本120例，对照组为乳腺良性病变标本120例。两组年龄差异无统计学意义(P＞0.05)。

1.2 方法 组织标本均经10%甲醛溶液固定后经石蜡包埋处理。采用免疫组织化学法检测p27 kip1和CKS1水平。

1.3 结果分析 所有切片均由病理科大夫阅片，每张片子高倍镜下计数5个视野的细胞，根据阳性细胞所占的百分比分为4级:阳性细胞＜5%为阴性(－)，5%～30%为阳性(+)，30%～75%为，＞75%为。将－与+合并为阴性组(－)、与合并为阳性组(+)。

1.4 统计学方法 应用SAS6.12统计软件进行χ2检验。

2 结果

2.1 p27 kip1蛋白的阳性表达 p27 kip1在乳腺浸润性导管癌中表达的阳性率〔30%(36/120)〕显著低于良性病变〔92.50%(111/120)〕(χ2=98.75，P ＜0.01)。

2.2 CKS1阳性表达 CKS1在乳腺浸润性导管癌中表达阳性率〔66.67%(80/120)〕显著高于良性病变〔18.33%(22/120)〕(χ2=57.36，P ＜0.01)。

2.3 p27 kip1与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系 p27 kip1蛋白在肿瘤直径＞2 cm组表达阳性率显著低于≤2 cm组(χ2=23.99，P＜0.01);p27 kip1蛋白在有淋巴结转移组表达阳性率显著低于无淋巴结转移组(χ2=17.62，P＜0.01);p27 kip1蛋白在淋巴结转移个数＞3个组表达阳性率显著低于淋巴结转移数量≤3组(χ2=12.75，P ＜0.01)。见表1。

2.4 CKS1与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系 CKS1蛋白在肿瘤直径＞2 cm组表达阳性率明显高于≤2 cm组(χ2=19.62，P＜0.01);CKS1蛋白在有淋巴结转移组表达阳性率明显高于无淋巴结转移组(χ2=16.13，P＜0.01);CKS1蛋白在淋巴结转移个数＞3个组表达阳性率明显高于淋巴结转移数量≤3个组(χ2=14.21，P＜0.01)。见表1。

表1 p27 kip1和CKS1与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系〔n(%)〕

3 讨论

细胞生命活动的基本过程就是细胞周期，而当细胞增殖失控，分化异常，周期发生紊乱时，有导致细胞过度增殖的可能性，并会因此诱发癌变。机体内调控细胞周期的因子有细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)、细胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI)。CKS1在一些肿瘤组织中高表达，如乳腺癌、肝癌、胃癌等，并与肿瘤分化程度有相关性〔5，6〕。p27 kip1是一种抑癌基因，可抑制细胞分裂。通过泛素依赖性蛋白水解途径，CKS1与Cullin-1的结合可以促进p27 kip1的泛素化降解，削弱p27 kip1对细胞周期的抑制作用，助长肿瘤的发生发展〔4〕。Uehara等〔7〕报道 CKS1与泛素蛋白酶 S细胞周期激酶蛋白(SKP)2结合之后，识别p27进而泛素化降解p27蛋白。

有报道p27蛋白阳性表达率在前列腺癌组织〔38.2%(26/68)〕低于前列腺增生组织〔80.9%(38/47)〕(P ＜0.01)〔8〕。另有文献报道，检测p27在浸润性乳腺癌和正常乳腺组织中分别为30.6%和88.9%阳性率〔9〕，其结果与本文结果p27 kip1在乳腺浸润性导管癌中的表达阳性率比良性病变阳性率降低的结论一致，p27 kip1在乳腺癌组织中表达下调，而在非癌性组织中水平较高，负性调控细胞周期，是抑癌基因。

本文结果说明CKS1表达增多，可能通过泛素依赖性蛋白水解途径，进而促进了p27kip1的泛素化降解，p27kip1对细胞周期的抑制作用被减弱，从而导致了乳腺癌细胞正常生长周期调控失效，为乳腺癌细胞呈无节制生长提供环境，为预后不良的参考指标。TNM分期对p27 kip1和CKS1阳性表达有明显影响，这与相关文献报道结果相符〔10〕。所以，通过检测CKS1和p27 kip1的阳性表达也可推断乳腺浸润性导管癌的恶性程度。本研究提示，CKS1和p27kip1与老年女性乳腺浸润性导管癌有密切关系。如果将二者的表达与乳腺浸润性导管癌患者的TNM分期及其他临床病理指标结合，可以作为临床治疗的指导和评价预后的相关参数。

1 Jemal A，Siegel R.Cancer statistics〔J〕.CA Cancer J Clin，2006;56:106-17.

2 张 斌.老年人乳腺癌〔J〕.中国癌症杂志，2005;15(5):422-5.

3 Kratzat S，Nikolova V，Miething C，et al.Cksl is required for tumor cell proliferation but not sufficient to induce hematopoietic malignancies〔J〕.PLoS One，2012;7(5):37433-42.

4 Sheaff RJ，Groudine M，Gordon M，et al.Cyclin E-CDK2 is a regulator of p27Kip1〔J〕.Genes Dev，1997;11(11):1464-78.

5 Lee EK，Kim DG，Kim JS，et al.Cell-cycle regulator Cks1 promotes hepatocellular carcinoma by supporting NF-κB-dependent expression of interleukin-8〔J〕.Cancer Res，2011;7l(21):6827-35.

6 陈绍发.CKS1和Cyclin D1在老年肝细胞癌中的表达〔J〕.中国老年学，2013;33(18):4556-7.

7 Uehara N，Yoshizawa K，Tsubura A.Vorinostat enllances protein stability of p27 and p2l through negative regulation of Skp2 and Cksl in human breast cancer cells〔J〕.Oncol Rep，2012;28(1):105-10.

8 王超奇，余大海，王金花，等.前列腺癌组织p27及Survivin表达的临床意义〔J〕.现代肿瘤医学，2014;22(1):123-5.

9 郭 静，唐仁泉，张 宇，等.CyclinE和p27在乳腺癌中的表达及临床意义〔J〕.当代医学，2009;15(7):130-1.

10 Ishimura R，Osako T，Okumura Y，et al.Clinical significance of Ki-67 in neoadjuvant chemotherapy for primary breast cancer as a predictor for chemosensitivity and for prognosis〔J〕.Breast Cancer，2010;17(4):269-75.