王秀玲，叶升锋，桑华春（北京智云达科技有限公司，北京102200）

食品中山梨酸快速检测方法研究

王秀玲，叶升锋，桑华春*
（北京智云达科技有限公司，北京102200）

摘要：探讨分光光度法测定食品中山梨酸含量的准确性，为食品安全检测提供高效快速准确的方法。采用分光光度法测定了多种食品中山梨酸含量并进行加标回收率的验证，回收率可达90%～105%。结果证明该方法操作简单、准确性好、速度快、检测成本低。

关键词：分光光度法；山梨酸；食品

山梨酸及其钾盐是种良好的防腐剂，广泛用于食品、化妆品、农产品等行业。合理使用山梨酸及其钾盐能防止微生物的生长，有效延长保质期。山梨酸和山梨酸钾日允许量为25mg/kg[1]，食用过多会对人体造成伤害，破坏肠道正常菌群的平衡，影响体内的新陈代谢[2-3]。严重时会抑制骨骼生长，危害肾、肝脏的健康[4-5]。因此，国家对食品中山梨酸的限量有严格的标准要求。食品中山梨酸的检测方法主要有液相色谱法、气相色谱法和薄层色谱法[6-10]，虽这些方法精确度高，重复性好，但是由于其操作复杂，专业要求严格，检测成本高等缺点[11-12]，不宜广泛推广。根据山梨酸在一定条件下经过化学反应生成红色衍生物这一原理，试验探讨了分光光度法测定食品中的山梨酸。

1　原理及方法

1.1检测原理

根据山梨酸及其盐类在硫酸和重铬酸钾的氧化作用下产生丙二醛，丙二醛又和硫代巴比妥酸产生红色衍生物。在一定范围内，其红色的深度与丙二醛浓度呈正比，用PCS食品安全快速检测仪测定其吸光值。

1.2仪器与试剂

1.2.1主要仪器

PCS多功能食品安全快速检测仪：北京智云达科技有限公司；水浴锅：金坛市光华仪器厂。

1.2.2试剂

重铬酸钾溶液、硫代巴比妥酸溶液、浓硫酸、山梨酸钾：均为分析纯；检测样品均为市购。

1.3操作步骤

1.3.1样品前处理

固体样品：固体样品取可食部分将样品粉碎后，取样5 g加蒸馏水45mL，于组织捣碎机中捣成匀浆，称取匀浆2 g于50mL试管中用蒸馏水定容至50mL，摇匀，过滤备用。

液体样品：液体称取5 g样品（浓缩果汁取2.5 g加蒸馏水至5mL），加蒸馏水45mL直接混匀成混合液。称取混合液2 g于50m L试管中用蒸馏水定容至50mL，摇匀，备用。

1.3.2显色操作

吸取2 m L样品处理液于10m L比色管中，加入2mL重铬酸钾溶液，盖塞摇匀，沸水浴加热7min，取出立即加入2mL硫代巴比妥酸法溶液，摇匀后继续沸水浴10min，取出冷却3min。

空白对照：空白管内用2mL浓硫酸代替2mL重铬酸钾溶液，其余步骤与样品处理相同。

1.3.3样品测定

以空白管为对照，532 nm处测定各样品的吸光值。

1.4标准曲线的制备

配制1 g/L的山梨酸标准储备液（以山梨酸计），混匀溶解后配制成 0.00、0.40、0.80、2.00、4.00、6.00、8.00mg/L的山梨酸标液，取不同浓度标液各2mL于10mL比色管中，然后加入2mL重铬酸钾溶液，盖塞摇匀，沸水浴加热7min，取出后立即加入2m L硫代巴比妥酸法溶液，摇匀后，继续沸水浴加热10min，取出冷却3min，在532 nm处测定其吸光值。以山梨酸浓度为横坐标，吸光值为纵坐标。绘制标准曲线如图1。

图1　标准曲线-山梨酸含量与吸光值关系Fig.1　Standard curveof the relationship of sorbic acid and its absorbance

2　测定条件的确定

2.1波长的选择

用0.5mg/L的山梨酸标准溶液，加入山梨酸检测试剂后，显色处理。用PCS多功能食品安全检测仪进行光谱扫描，如图2所示，生成的红色衍生物在波长532 nm处具有巨大吸收峰。

图2　溶液吸收光谱Fig.2　Absorption spectrum of solution

2.2显色条件及稳定性

经大量试验测定，水浴温度越高，反应越充分，因此选取沸水浴；水浴时间在0～10min内吸光值逐渐变大，10min后吸光值略有降低。且反应后生成的红色衍生物在室温条件下可存放5 h。

2.3干扰因素排除

针对食品中主要共存物质的影响作出试验，以±5%相对标准偏差作为判定标准，试验证明试样中糖类、醇类、酸类、天然色素、糖精、苯甲酸、淀粉等存在时，其测定结果误差均可控制在±5%，因此不会影响测定结果。可知该方法的选择性很好。

2.4检出限的确定

检出限用不含山梨酸的食品按照样品处理方法提取20次，然后计算标准偏差（SD），求得检出限（3· SD）：浓缩果蔬汁的检出限为8mg/kg，其他食品的检出限为4mg/kg。

3　样品测定及加标回收率的验证

试验选取了10种不同食品测定其山梨酸及其钾盐的含量，每种样品称取4份，每份为5 g，其中1份样品不加标液，另外3份分别按照0.50、1.00、1.50 g/kg水平[13-14]进行加标，然后按照样品检测方法进行操作，根据吸光值计算其山梨酸含量，每种样品3个平行，试验重复3次，测量值为平均值。然后计算精密度及回收率，结果见表1。

表1　精密度及加标回收率验证试验（n=9）Table1　Resultsof precision and recoveries test（n=9）

由表1可知试验平均相对偏差为1.01%～2.99%，回收率可达90%～105%，由此可知该方法测定山梨酸精密度高，重现性好，回收率理想。这说明该方法测定山梨酸含量，结果准确可靠。

4　结论与讨论

使用PCS食品安全快速检测仪测定食品中山梨酸含量是一种高效快速便捷的检测方法。试验采用标准加入法，对10种食品中的山梨酸含量及加标样品进行了测定，结果表明该方法测定结果精密度高，重现性好，回收率可达90%～105%，与传统的气相色谱和液相色谱相比，不仅简化了操作过程，缩短了检测时间，而且降低了检测成本，实现了食品中山梨酸含量的准确、便捷、快速检测。同时该方法能够适用于各种食品中山梨酸的检测，满足了食品安全快速检测的需求。

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DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.22.039

收稿日期：2014-04-23

作者简介：王秀玲（1986—），女（汉），硕士，主要从事食品安全快速检测方法研究。

*通信作者：桑华春（1964—），女（汉），博士，研究员。

Study on the Rapid Detection of Sorbic Acid in Food

WANGXiu-ling，YESheng-feng，SANGHua-chun*
（Beijing Zhiyunda Science and Technology Co.，Ltd.，Beijing102200，China）

Abstract：Investigated theaccuracyofspectrophotometry to detectsorbic acid content in food，and provided an efficientand accuratemethod for the rapid detection of food safety.Tested sorbic acid contentofvariousof foods by the spectrophotometriy and investigated the recovery which was 90%-105%.The results showed that the method wassimple，high accurate，fastand low cost.

Keywords：spectrophotometry；sorbic acid；food