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热诱导表达的水稻OsBBX30基因克隆和表达分析

2015-07-20饶力群等

湖南大学学报·自然科学版 2015年6期

饶力群等

摘要:生物信息学分析表明:OsBBX30基因启动子含有与逆境相关的作用元件HSE.为进一步了解OsBBX30基因在生物体内受热诱导,通过OsBBX30基因克隆构建原核表达和实时定量PCR分析,证实OsBBX30基因表达受热胁迫诱导,能增强大肠杆菌的耐热能力,为深入了解该家族基因和挖掘水稻耐热基因奠定基础.

关键词:克隆;水稻BBX基因;热胁迫;实时定量PCR

中图分类号:S511 文献标识码:A

Abstract:Bioinformatics analysis indicates that the promoter of OsBBX30 contains function element HSE, which is related with adversity. In this study, it is found that OsBBX30 gene expression is induced by heat stress, which enhances the E. coli heat resistant ability through bioinformatics,Gene clone prokaryotic expression and realtime quantitative PCR analysis. The results are helpful in understanding the family genes and rice heat resistant genes.

Key words:clone; OsBBX; heat stress; QPCR

水稻是我国重要粮食作物,高温是制约水稻生产和产量的重要因素,培育耐热水稻品种是保证水稻稳产的重要手段[1],而利用基因工程技术是获得水稻耐热新品种的重要途径[1],因此筛选和克隆水稻耐热相关的基因受到人们关注.

锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子,在基因表达、细胞分化、胚胎发育、增强抗逆性等方面具有重要的调控作用[2],对植物的生物发育和胁迫的响应是至关重要的[3],在光调节植物生长发育中也是不可替代的[4-5].BBX是一类含有Bbox结构域的锌指蛋白,通过生物信息学分析发现,在水稻中有30个BBX基因,拟南芥中有32个BBX基因[6-8].其中Bbox家族中有一类只在N端具有多个Bbox结构域,在C端不具有CCT结构的锌指蛋白,称为DBB (Double Bbox)蛋白亚族基因.拟南芥DBB亚家族中有8个编码基因,通过比对发现水稻中有10个OsDBB同源基因[6].拟南芥中该亚家族基因参与调控拟南芥光形态建成、光周期调控开花时间,花的发育、耐热,而在水稻中关于该亚家族基因的功能还未有报道[7].

本研究对OsDBB亚家族中的OsBBX30进行耐热……

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