韩万伟,唐翔,刘连仲,叶春伶,王晓梅,闫建亮

(北京市回民医院 骨伤科，北京 100054)



成骨生长肽对MC3T3-E1成骨细胞增殖的影响及其可能机制

韩万伟,唐翔,刘连仲,叶春伶,王晓梅,闫建亮

(北京市回民医院 骨伤科，北京 100054)

目的 探讨成骨生长肽(osteogenic growth peptide，OGP)对MC3T3-E1成骨细胞的增殖的影响及其机制。方法 常规培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1，分为OGP高、中、低剂量组(1×10-8、1×10-10、1×10-12mol/L)以及对照组，利用MTT法检测OGP作用24 h、48 h以及72 h对MC3T3-E1成骨细胞增殖作用，利用免疫化学染色法检测成骨细胞I型胶原蛋白水平，ELISA法检测骨桥蛋白(osteopontin，OPN)含量。结果 在24 h时，各剂量OGP对MC3T3-E1的增殖无影响；作用48、72 h，OGP 10-10mol/L以及 OGP 1×10-8mol/L显著促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.05)，其中OGP 1×10-8mol/L 48 h促进MC3T3-E1细胞增殖作用最强。作用24 h，各组成骨细胞I型胶原蛋白IOD值差异均无统计学意义；作用48 h，OGP 1×10-8mol/L组细胞I型胶原蛋白IOD值显著高于对照组(P<0.05)；作用72 h，OGP 1×10-10mol/L组以及OGP 1×10-8mol/L组细胞I型胶原蛋白IOD值均显著高于对照组(P<0.05)。作用24 h，各组成骨细胞OPN OD值差异均无统计学意义；作用48 h、72 h，OGP 1×10-10mol/L组以及OGP1×10-8mol/L组细胞OPN OD值显著高于对照组(P<0.05)。结论 OGP能够明显促进MC3T3-E1成骨细胞的增殖，其可能的作用机制是增加成骨细胞I型胶原蛋白的表达以及OPN的表达，且其作用与浓度密切相关，在1×10-8mol/L时，其促成骨细胞增殖作用最强。

成骨生长肽；成骨细胞；增殖；机制

1992年Bab等人在研究骨髓再生的过程当中从愈合的骨髓细胞中分离出来一种多肽物质，该物质在体内能够激活造血系统、促进机体骨的合成代谢，而在体外则具有刺激骨髓基质细胞以及成骨细胞增殖、分化的作用，故而将其命名为成骨生长肽(osteogenic growth peptide，OGP)[1-2]。目前研究证实，成骨生长肽能够有效预防骨质疏松，促进机体骨折愈合，并对化疗、放疗后的骨髓抑制有一定的缓解作用，其临床应用前景十分可观[3-4]。研究报道显示[5]，OGP在体外具有促进成骨细胞增殖的作用，但其作用机制至今尚未阐明，本研究旨在探讨分析OGP对小鼠成骨细胞MC3T3-E1的增殖作用，并探讨其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 细胞株 小鼠成骨细胞MC3T3-E1由本实验室保存，培养液为含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基，培养环境为37 ℃、5%CO2。培养中观察细胞的形态以及培养基颜色的变化情况，当显微镜下细胞视野在80%～90%融合时，给予传代处理。……