马贲，温莹莹，韩磊，杜晓岩

(1佳木斯大学附属第二医院口腔医院，黑龙江佳木斯154001；2齐齐哈尔市第一医院)

HPV感染对口腔鳞状细胞癌朗格汉斯细胞数量的影响

马贲1，温莹莹2，韩磊2，杜晓岩1

(1佳木斯大学附属第二医院口腔医院，黑龙江佳木斯154001；2齐齐哈尔市第一医院)

目的 探讨人类乳头瘤病毒(HPV)感染对口腔鳞状细胞癌(OSCC)朗格汉斯细胞(LC)数量的影响。方法 选取OSCC组织和癌旁正常组织各27份，检测HPV表达情况，比较HPV阳性和阴性OSCC组织中LC数量。结果 OSCC组织中的LC数量为(9.48±10.89)个，正常组织为(11.36±2.75)个，二者比较P<0.05。27例OSCC组织中，HPV阳性9例，HPV阴性18例，二者的LC数量分别为(38.24±6.23)、(2.58±9.23)个，二者比较P<0.05。HPV阳性的OSCC组织中，不同肿瘤分期、不同组织分化程度、有无淋巴结转移者的LC数量比较，P均<0.05。结论 LC与HPV感染的OSCC的发生、发展密切相关；HPV可以抑制OSCC患者的免疫系统，减少LC数量。

口腔鳞状细胞癌；人类乳头瘤病毒；朗格汉斯细胞

口腔鳞状细胞癌(OSCC)具有恶性度高、易发生淋巴结及远处转移、生存率低等特点[1]。人类乳头瘤病毒(HPV)感染是口咽癌的主要病因[2]，HPV感染导致的局部免疫缺陷以及缺乏有效的特异性抗HPV制剂，使HPV感染迁延不愈[3]。朗格汉斯细胞(LC)是表皮内的抗原提呈细胞，在摄取、处理和递呈抗原方面具有重要作用。本研究探讨了HPV感染对OSCC组织中LC数量的影响及其机制。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2012年1月～2014年1月佳木斯大学附属第二医院口腔医院收治的27例OSCC患者，男16例、女11例，年龄34～72(60.4±7.3)岁。均经病理学检查证实。患者均为首次确诊，术前未行化放疗和免疫治疗。肿瘤位于嘴唇12例，口底瘘5例，其他部位10例。病理分化程度为高分化9例，中低分化18例；根据UICC(2002)口腔癌TNM分期Ⅰ～Ⅱ期20例，Ⅲ～Ⅳ期7例。伴颈部淋巴结转移8例，无淋巴结转移19例。将患者手术切除标本作为观察组，取癌旁正常组织作为对照组。

1.2 方法

1.2.1 LC形态观察及计数 采用免疫组化SP法。将OSCC组织石蜡切片常规脱蜡至水，4 μm连续切片。将切片浸入pH6.0柠檬盐溶液加热至沸腾，继续加热3 min抗原修复，室温下自然冷却后PBS冲洗。3% H2O2孵育5～10 min，消除内源性过氧化物酶活性，PBS冲洗。以PBS代替一抗作为空白对照。将染色后的切片置于400倍光镜下，随机选取10个视野，以胞膜、胞质呈红色为阳性，计数阳性细胞的数目并观察其形态和分布。

2 结果

2.1 两组LC数量比较 观察组和对照组的LC数量分别为(9.48±10.89)、(11.36±2.75)个，两组比较P均<0.05。观察组中，HPV阳性9例，LC数量为(38.24±6.23)个；HPV阴性18例，LC数量为(42.58±9.23)个，二者比较P<0.05。

2.2 HPV阳性和阴性的OSCC组织中LC数量与临床病理特征的关系 见表1。

3 讨论

研究证实，在免疫功能抑制时，HPV的感染率和宫颈原位癌的发病率显著高于正常人，且HPV感染所致的癌前病变和宫颈癌均与宫颈LC明显减少、树突结构消失密切相关[4]。LC在肿瘤免疫学中扮演重要角色，其具有预防恶意转化的抗原的能力[5]。LC的正常功能为监测细胞表面的病原体，捕捉抗原并将其加工成免疫原性多肽，从组织迁移至淋巴结，再将多肽与主要组织相容性复合物结合而提呈给T细胞，诱导产生抗原特异性免疫反应[6]。淋巴细胞作为杀死癌细胞的主要细胞，其需要被激活而呈抗原的状态，这就需要LC通过刺激抗原提呈细胞来调节[7～9]。

表1 HPV阳性和阴性的OSCC组织中LC数量与临床病理特征的关系

本研究显示，27例OSCC中HPV阳性9例，HPV阴性18例，HPV阳性的OSCC组织中的LC数量少于HPV阴性组织，与文献[10]报道基本一致。说明HPV感染与LC数量有关，HPV阳性的OSCC组织中LC数量较少可能是HPV对LC的直接细胞毒作用，或经抗原致敏的LC离开原位进入区域淋巴组织，削弱了机体对外来抗原的特异性免疫应答能力，导致局部获得性免疫缺陷[11]。Bahnassy等[12]认为，LC数量与OSCC合并HPV感染密切相关。另有研究发现，阴性HPV和阳性HPV的子宫肌瘤组织中LC密度有统计学差异，HPV感染会驱使与LC抗原有关的免疫系统的变化。我们进一步对HPV阳性和阴性的OSCC组织中LC数量进行比较，结果显示，不同肿瘤分期、不同组织分化程度、有无淋巴结转移的HPV阳性OSCC组织中，LC数量均有统计学差异。考虑可能是LC在HPV参与OSCC的细胞浸润和转移过程中发挥了重要的免疫作用。

综上所述，LC与HPV感染的OSCC的发生、发展密切相关，HPV可以抑制OSCC患者的免疫系统，减少LC数量。

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杜晓岩

10.3969/j.issn.1002-266X.2015.01.023

R739.8

B

1002-266X(2015)01-0056-02

2014-11-01)