樊燕，王永忠，郑国军，朱珍，蒋莉

(常州市第三人民医院，江苏常州213001)

乙型肝炎病毒E抗原、大蛋白与乙肝病毒DNA的关系

樊燕，王永忠，郑国军，朱珍，蒋莉

(常州市第三人民医院，江苏常州213001)

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)表面E抗原(HBeAg)、大蛋白(LHBs)与乙肝病毒DNA(HBV DNA)的关系。方法 分别检测109例HBeAg阳性和116例HBeAg阴性的乙型肝炎患者的LHBs、HBV DNA表达情况，并进行对比分析。结果 HBeAg阳性组中，LHBs、HBV DNA的检测率分别为89.9%和84.4%，二者比较无统计学差异(P>0.05)；HBV DNA定量与HBeAg定量和LHBs均呈正相关(r分别为0.81、0.94，P均<0.05)，不同HBV DNA载量组间HBeAg定量和LHBs含量均有统计学差异(P均<0.01)。结论 对HBeAg阴性患者而言，LHBs能在一定程度上反映体内HBV的复制情况，可作为HBV DNA的补充，指导临床诊治和用药。

乙型肝炎病毒大蛋白；乙型肝炎病毒E抗原；乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸

乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白由HBV DNA的S区编码，包括大蛋白(LHBs)、中蛋白和主蛋白三种成分。LHBs存在于感染性Dane颗粒和亚病毒颗粒中，它独特的双重跨膜拓扑结构使其在病毒生活周期中执行了两个重要功能，一是作为配体和病毒受体结合，二是在病毒体形成过程中负责与核壳体相接触，包装外膜，同时介导HBeAg亚病毒颗粒在细胞中的滞留[1，2]。本研究对HBV感染患者进行LHBs、HBV DNA、HBeAg检测，分析三者间的关系。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择我院2013年6月～2014年6月收治的225例乙型肝炎患者，均符合2000年全国病毒性肝炎学术会议修订的诊断标准[3]。根据HBeAg检测结果将患者分为阳性组109例和阴性组116例，阳性组男51例、女58例，年龄(50.6±14.8)岁；阴性组男64例、女52例，年龄(49.0±15.6)岁。两组性别、年龄具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 采集受试者清晨空腹静脉血5 mL，分离血清，-80 ℃保存待检。HBV DNA检测采用美国ABI 7500型荧光定量PCR仪，试剂由上海复星医学科技有限公司提供；HBeAg检测采用Wallac公司生产的DELFIA1235全自动时间分辨免疫荧光分析仪，试剂由广州市达瑞抗体工程技术有限公司提供；LHBs检测采用ELSIA方法，试剂由北京热景生物技术有限公司提供。所有检测均按照SOP规程操作。

1.2.2 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件，率的比较用配对资料χ2检验。计量资料组间差异采用方差分析，相关性分析采用线性相关分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 LHBs、HBV-DNA检测结果比较 根据HBeAg抗原检测结果分为阴性和阳性两组，LHBs、HBV DNA阳性率比较均无统计学差异(P均>0.05)，见表1。

表1 两组LHBs、HBV DNA检测结果比较[例(%)]

2.2 HBV DNA与HBeAg及HBLs的相关性 根据HBV DNA拷贝数不同数量级分为四个组，HBV DNA拷贝数与HBeAg定量具有相关性(r=0.81，P<0.05)，HBV DNA拷贝数与HBLs 具有相关性(r=0.94，P<0.05)，不同HBV DNA拷贝数组间HBeAg含量差异具有统计学意义(F=93.0，P<0.01)，不同HBV DNA拷贝数组间LHBs含量差异具有统计学意义(F=118.0，P<0.01)。见表2。

3 讨论

HBeAg是临床判定HBV复制程度及判断慢性乙型肝炎患者预后的一个重要指标，是抗病毒治疗终点的重要依据之一。HBV DNA是HBV存在和复制的重要指标，临床常应用于判断HBV感染者病毒复制的情况及临床有无传染性。Bruns等[4]对鸭肝模型的研究发现，含有嗜肝病毒血清的感染性不仅依赖于具有感染性的Dane颗粒的多少，而且还依赖缺乏核酸、富含LHBs的亚病毒颗粒的数量，后者主要包括管状颗粒和小球型颗粒，这些颗粒具有反式激活作用，能够显著增强细胞内的病毒复制和基因表达。LHBs包括HBsAg、PreS1、PreS2蛋白，是HBV Dane颗粒和亚病毒颗粒的主要包膜成份，与HBV复制密切相关，LHBs检测反映的是患者血清中是否存在Dane颗粒和亚病毒颗粒，因而对判定体内HBV复制或有无传染性可能具有更重要的意义[5～7]。

表2 HBV DNA定量和HBeAg定量检测结果对比

本研究采用针对LHBs特殊构象制备的单克隆抗体对225例HBV感染者血清中HBV外膜LHBs进行检测，结果显示LHBs与HBV DNA的阳性率无统计学差异，可认为LHBs在一定程度上反映了HBV复制。但同时我们也发现部分样本LHBs阳性而HBV DNA阴性，其原因可能是LHBs的亚病毒颗粒的数量是完整病毒颗粒的10 000倍以上，血液中消退时间也晚于HBV DNA[8]。以往认为，HBeAg阴转是HBV复制减弱、传染性降低和预后良好的表现。本研究116例HBeAg阴性患者中，HBV与LHBs阳性率分布为52.6%和50.9%，说明这部分患者体内病毒复制相当活跃，其原因可能是免疫清除不完全或HBV前C区或BCP区发生变异，HBeAg合成障碍，但不影响病毒复制[8，9]。显然在判断病毒复制和传染性方面，LHBs比HBeAg具有明显优势，在不具备HBV DNA检测条件的基层医院，LHBs可作为判断病毒复制的血清学指标。

研究证实，LHBs与HBeAg和HBV DNA之间具有良好的相关性[10]。本研究显示，HBV DNA与HBeAg和LHBs呈正相关，不同数量级HBV DNA载量组间HBeAg和LHBs含量均存在显著统计学差异，显示三者一定程度上都能够反映HBV复制情况，但对于HBeAg阴性患者，LHBs和HBV DNA或更具有价值，检测LHBs能弥补HBeAg的缺陷，反映患者体内HBV复制的真正水平，LHBs和HBV DNA可能更适合抗病毒治疗效果的判断，对指导临床合理用药、避免过早停药导致病情反复具有一定意义[11]。

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常州市卫生局重大项目(201312)。

王永忠

10.3969/j.issn.1002-266X.2015.01.016

R512.6

B

1002-266X(2015)01-0041-02

2014-08-27)