帅小翠，邹 静，李晋奇(四川省医学科学院·四川省人民医院药学部，四川 成都 610072)

正交实验法优选理气复胃口服液的煎煮工艺

帅小翠，邹 静，李晋奇
(四川省医学科学院·四川省人民医院药学部，四川 成都 610072)

目的 探讨理气复胃口服液的最佳煎煮工艺。方法 以大黄总蒽醌含量和干膏率为指标，考察加水量、煎煮时间、煎煮次数对煎煮工艺的影响，应用正交实验设计优选出理气复胃口服液的最佳煎煮工艺条件。结果 煎煮次数对工艺的影响程度最大，加水量次之，煎煮时间最小。结论 优选出的最佳工艺为：加10倍水，煎煮2次，每次1小时。经验证该工艺稳定可行。

理气复胃口服液；正交；煎煮工艺

理气复胃口服液为我院自制制剂，由木香、熟大黄、枳实、陈皮等7味药组成，具有行气导滞，除湿消痞的功效，用于运动障碍型功能性消化不良，在我院临床应用多年，疗效显著。本研究以煎出液中大黄总蒽醌(以大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素计)含量以及干膏率为指标，采用正交实验法，探讨该口服液的最佳煎煮工艺。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药 电子天平(JJ500型，d=0.01 g)、高效液相色谱仪(waters 2690 seporation module)；检测器(waters 996 photodiode Array Detector)，电磁炉、BP211D电子天平(d=0.01 mg，德国Sartorius公司)、蒸发皿、水浴锅、电烘箱等。木香、熟大黄、枳实、陈皮等7味药，购于四川省中药饮片有限责任公司，经检验，符合《中国药典》2010版标准。对照品：大黄酸(中国药品生物制品检定所，批号：110757～200206)，大黄素(中国药品生物制品检定所，批号：110756～200210)，大黄酚(中国药品生物制品检定所，批号：110796～200208)，大黄素甲醚(中国药品生物制品检定所，批号：110758～200611)，芦荟大黄素(中国药品生物制品检定所，批号：110795～200806)。

1.2 方法

以煎出液中大黄总蒽醌含量、干膏率两个指标综合考虑，优选理气复胃口服液煎煮工艺。经预实验，药材浸泡30 min合适。影响煎煮工艺的因素主要为：加水量、煎煮时间、煎煮次数[1]，每因素设三个水平(见表1)，以L9(34)正交表安排实验。

表1 煎煮因素水平表

1.2.1 样品制备 按1/5处方比例称取药材，按照正交设计的安排表(表2)煎煮组方药材，药液过滤，浓缩，定容250 ml，作为干膏率测定和含量测定的供试药液。

1.2.2 干膏率测定 精密量取20 ml药液，置干燥恒重的蒸发皿中，于105 ℃电热恒温干燥箱中干燥3 h，取出放入干燥器中冷却至室温，迅速称重，计算干膏率(干膏率=20 ml提取液的干膏质量×12.5/7味药材质量×100%)。

1.2.3 含量测定 采用高效液相色谱法(HPLC)测定药液中大黄总蒽醌含量，①色谱条件：分析柱Phenomenex Gemini C18 (250 mm× 4.6 mm，5 μm，110A)，保护柱SecurityGuard Cartridges Gemini C18 (4 mm×3.0 mm)，柱温35 ℃；流动相为甲醇-乙腈-0.01 mol/L NaH2PO4(pH1.5)(2∶5∶3.5)，流速1 ml/min，紫外检测波长435 nm。②对照品溶液配制：精密称取各对照品，配制成每1 ml约含大黄素、大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素各4 μg，大黄素甲醚2 μg的对照品溶液，置4 ℃冰箱避光储存备用。③供试品溶液制备：精密量取混匀的供试药液5 ml，置25 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。精密量取稀释液5 ml，置圆底烧瓶中，加入8%盐酸10 ml，混匀，再加入三氯甲烷10 ml，混匀。置沸水浴上回流1 h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤烧瓶，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷液液提取3次，每次10 ml，合并三氯甲烷提取液，置37 ℃水浴上氮气挥干，残渣加甲醇使溶解，转移至10 ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，混匀，备用。

1.2.4 测定方法 精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μl进样测定，以外标峰面积法计算含量，得大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素含量，计算总蒽醌含量。

1.3 统计学方法 数据经SPSS 13.0软件分析处理。采用方差分析。P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各因素对煎煮的影响 煎煮工艺正交实验安排及结果见表2、表3。以干膏率为指标，各因素对煎煮的影响程度C>A>B，最佳组合为A3B3C3；以大黄总蒽醌含量为指标，各因素对煎煮的影响程度C>A>B，最佳组合为A3B2C3。因素A、因素B、因素C对干膏率有显著影响，见表4。因素A、因素C对大黄总蒽醌含量有显著影响，见表5。考虑到方中木香、枳实等需经挥发油提取后再煎煮，整个提取工艺时间较长，结合生产实际，拟定煎煮工艺为A3B2C2：即加10倍水，煎煮2次，每次1小时。

表2 煎煮工艺正交实验安排表和结果

2.2 煎煮工艺验证 按1/5处方比例称取药材，共3个批次，加10倍水，煎煮2次，每次1小时，药液过滤，浓缩，定容250 ml，测定干膏率和大黄总蒽醌含量(方法同1.2.3)，结果见表6，计算得大黄总蒽醌含量均值为103.24 mg(RSD为2.41%)；干膏率均值为15.58%(RSD为1.47%)。

表3 不同因素下正交实验结果分析

表4 煎煮工艺干膏率方差分析

表5 煎煮工艺大黄总蒽醌含量方差分析

表6 煎煮工艺验证实验

3 讨论

根据正交结果，煎煮次数为3次时，大黄总蒽醌含量和干膏率均高于2次。考虑到理气复胃口服液工艺的第一部分是收集挥发性成分，药渣再与余药共煎煮，整个工艺的耗时较长，且煎煮次数增多，无效成分的煎出量也会增多，给口服液除杂工序增加难度；从验证实验可知，煎煮2次时，大黄总蒽醌含量和干膏率接近正交结果最高值，结合生产实际，将理气复胃口服液煎煮次数定为2次。

[1] 刘光斌，谢六生，隆旭红，等.大黄通气口服液的提取纯化工艺优选[J].中国实验方剂学杂志，2012，18(12)：67-70.

Selection of optimal decoction process of Liqifuwei oral liquid by orthogonal test

SHUAIXiao-cui，ZOUJing，LIJin-qi
(DepartmentofPharmacy，SichuanAcademyofMedicalSciences&SichuanProvincialPeople’sHospital，Chengdu610072，China)

Objective To investigate the optimal decoction process of Liqifuwei oral liquid.Methods By using orthogonal test with indexes of content of rhubarb total anthraquinone and dry paste rate，the effect of adding water，decocting time and decocting times on the decoction were observed.Results The optimal process was 10 times water of medicinal material，decocting 2 times，and 1 hour each time.Conclusion The process is stable and feasible，and the operation is simple and suitable for production.

Liqifuwei oral liquid；Orthogonal experiment；Decoction process

R932

A

1672-6170(2015)06-0094-02

2015-07-01；

2015-08-29)