赵成国，秦书芝，2，张 瑶，夏 婷，肖洪彬

1吉林大学珠海学院，广东 珠海 519041；2黑龙江中医药大学

鬼箭羽抗心肌缺血作用的实验研究

赵成国1，秦书芝1，2，张 瑶1，夏 婷1，肖洪彬2△

1吉林大学珠海学院，广东 珠海 519041；2黑龙江中医药大学

目的：探讨鬼箭羽抗大鼠急性心肌缺血损伤的作用机制。方法：将健康Wistar大鼠经ECG筛选后随机分为鬼箭羽高、中、低剂量组，模型组，假手术组，阳性对照组，每组10只。采用冠状动脉结扎法建立大鼠急性心肌缺血模型，检测血清中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、一氧化氮(NO)等指标。结果：鬼箭羽高、中剂量组能降低模型大鼠血清CK、CK-MB、AST、LDH和MDA水平，提高模型大鼠血清SOD、NO含量，与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：鬼箭羽对急性心肌缺血大鼠的心肌细胞具有一定的保护作用，有一定防治心肌缺血的作用。

急性心肌缺血；冠状动脉结扎；鬼箭羽；心肌酶

鬼箭羽为卫矛科植物(Euonymusalatus B u c h.)，又名卫矛。味苦、辛，性寒，入肝脾经，具有活血化瘀、破血、通经之功，用于治疗癥瘕、闭经、产后瘀滞腹痛等症［1］。主要含有黄酮类、甾体类、多糖等多种化学成分［2］。具有抗心肌缺血、降血糖及延缓动脉粥样硬化等作用［3-4］。本实验探讨鬼箭羽抗急性心肌缺血的药理作用及作用机制，为新药开发及指导临床用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验用药 鬼箭羽水提物(简称鬼箭羽，16.13 g生药/g)由黑龙江中医药大学中药化学实验室提供；阳性对照药为心得安片(常州康普药业有限公司，批号：0509011)。

1.2 实验动物 选Wi star大鼠，体质量180～220 g，雌雄各半，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。实验动物合格证号：黑动字第P00101006号。

1.3 实验仪器 L i sa300全自动生化分析仪(法国)；M ed l ab多通道生物信号分析系统(南京美易科技有限公司)；H X-200动物呼吸机(成都泰盟科技有限公司)；755型分光光度计(山东高密分析仪器厂)；电子天平(梅特勒－托利多仪器有限公司)；K D C-40离心机(科大创新有限公司)。

1.4 主要试剂 肌酸激酶(C K)试剂盒(批号：090061)；肌酸激酶同工酶(C K-M B)试剂盒(批号：100031)；乳酸脱氢酶(L D H)试剂盒(批号：130021)；谷草转安酶(A S T)试剂盒(批号：120032)，以上试剂盒均购于中生北控生物科技有限公司。丙二醛(M D A)试剂盒(批号：20100621)；超氧化物岐化酶(S O D)试剂盒(批号：20101109)；一氧化氮(N O)试剂盒(批号：20101217)，均购于南京建成生物工程研究所。

1.5 方法

1.5.1 分组及给药 将健康Wi star大鼠进行E C G筛选，弃去S-T段、T波及心律异常者。将筛选合格大鼠随机分为鬼箭羽高、中、低组剂量组，模型组，假手术组，阳性对照组，每组10只。鬼箭羽高、中、低组给药剂量分别为12.0、6.0、3.0g/k g。模型组和假手术给予同体积蒸馏水，阳性对照组剂量为2.8m g/k g。均灌胃给药。1次/d，给药7天。

1.5.2 模型制备 大鼠末次给药2小时后，戊巴比妥麻醉(30m g/k g)，备毛，分离肌肉层，剪断第四、五肋骨，气管插管，连接呼吸机辅助呼吸(吸呼比为1∶2，频率为64次/m in，潮气量为12m L/k g)。钝性分离心包膜，暴露心脏，结扎冠状动脉左前降支，结扎后放回心脏，关闭胸腔，缝合肌肉及皮肤。模型制备过程中大鼠死亡8只，其中假手术组2只，模型组1只，鬼箭羽高组2只、中组2只，阳性对照组1只，均为手术过程中痰液清理不及时窒息死亡。

1.5.3 血样采集与处理 结扎5小时后，下腔静脉取血，离心(3 000转，l0分钟)取血清，测定C K-M B、C K、L D H、M D A等指标。

1.5.4 梗死面积计算 取血后迅速剪下心脏，生理盐水冲洗，清除血管及脂肪组织，吸去水分，全心称重。将心脏置于冰箱中速冻，取出后由心尖至心底切成等厚5片，放入新配制的1%氯化三苯基四氮唑(TT C)溶液中，37℃恒温水浴，染色15分钟。染色后流水冲洗去除多余染料，梗死区不染色，未梗死区呈红色。切取梗死区称重，计算梗死面积(%)。

1.6 统计学方法 数据采用S P SS 10.0统计学软件分析，计量资料以(±s)表示，采用方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对急性心肌缺血模型大鼠心肌梗死面积的影响 与模型组比较，各给药组心肌梗死面积均减少，其中以鬼箭羽高、中组作用显著，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 对急性心肌缺血模型大鼠心肌梗死面积的影响(±s)

表1 对急性心肌缺血模型大鼠心肌梗死面积的影响(±s)

注：同模型组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01。

组别 例数 剂量/(g·kg-1) 梗死面积/%假手术组 8 - 0模型组 9 - 11.76±2.49鬼箭羽高组 8 12.0 8.39±1.95**鬼箭羽中组 8 6.0 9.46±2.21*鬼箭羽低组 10 3.0 9.97±1.78阳性对照组 9 0.0028 8.26±2.50**

2.2 对急性心肌缺血模型大鼠血清心肌酶CK、CK-MB、LDH及AST的影响 与模型组比较，假手术组血清C K、C K-M B、L D H、A S T含量均降低(P＜0.01)；鬼箭羽高、中组血清C K、C K-M B、L D H、A S T含量降低(P＜0.05)，见表2。

表2 对急性心肌缺血模型大鼠血清CK、CK-MB、LDH及AST的影响(±s)

表2 对急性心肌缺血模型大鼠血清CK、CK-MB、LDH及AST的影响(±s)

注：与模型组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01。

组别 例数 剂量/(g·kg-1) 肌酸激酶/(U·L-1)肌酸激酶同工酶/(U·L-1)乳酸脱氢酶/(U·L-1)谷草转氨酶/(U·L-1)假手术组 8 - 43.30±9.48**28.3±5.09**89.9±12.4**212.2±21.3**模型组 9 - 75.10±18.00 44.0±9.83 158.7±22.8 333.3±43.5鬼箭羽高组 8 12.0 52.80±11.90**30.5±7.31**123.3±17.3**270.6±34.2**鬼箭羽中组 8 6.0 58.10±13.80*34.1±9.44 133.8±17.4*282.7±36.0*鬼箭羽低组10 3.0 65.60±16.60 37.8±7.45 142.3±20.2 298.7±38.7阳性对照组 9 0.0028 51.30±11.60**35.1±8.14**109.0±17.3**285.4±39.5**

2.3 对急性心肌缺血模型大鼠血清MDA、SOD、NO的影响 同模型组比较，假手术组M D A升高(P＜0.01)，S O D、N O均下降(P＜0.01)；鬼箭羽高、中组血清M D A含量降低(P＜0.05)，S O D、N O升高(P＜0.05)，其差异有统计学意义，见表3。

表3 对急性心肌缺血大鼠血清MDA、SOD及NO的影响(±s)

表3 对急性心肌缺血大鼠血清MDA、SOD及NO的影响(±s)

注：与模型组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01。

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3 讨论

冠心病是一种由冠状动脉粥样硬化或痉挛导致其狭窄或堵塞引发的心肌缺血缺氧性病变［5-9］。近年来，随着人民生活水平的提高，冠心病的发病率逐年上升，作为高发病率、高危险性、高死亡率的重大疾病严重威胁着人类的健康［10-12］。心肌缺血缺氧使心肌细胞受损，导致多种酶体大量释放进入血液。因此，检测血中相关酶的活性变化可反映心肌坏死的演变过程，这些酶学指标有L D H、A S T、C K等［13］。M D A是脂质过氧化产物，可作为脂质过氧化反应强弱的指标，所以检测M D A的含量可间接反映细胞损伤的程度［14-15］；超氧化物歧化酶(S O D)的活力可反映机体清除氧自由基的能力，可对缺血的心肌起保护作用［16-17］；N O具有减弱心肌收缩力的作用，使心肌耗氧量减少［18］。

本研究表明，鬼箭羽能够缩小冠状动脉结扎引起的模型大鼠心肌梗死面积，能降低模型大鼠血清C K、C K-M B、A S T、L D H、M D A的含量，提高模型大鼠血清N O、S O D含量，说明鬼箭羽可通过不同途径对心肌细胞起保护作用，具有一定的抗心肌缺血作用。

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Experim entalStudieson the Anti-ischem ic Function of GuiJianYu

ZHAO Chengguo1,QIN Shuzhi1，2,ZHANG Yao1,XIA Ting1,XIAO Hongbin2△
1 ZhuhaiCollege of Jilin University,Zhuhai519041,China; 2 Heilongjiang University of Chinese Medicine

Objective:To evaluate themechanism of GuiJianYu fighting against the impairment induced by acutemyocardial ischem ia(AM I)in rats.Methods:A fter performed ECG screening,the healthyW istar ratswere random ly divided into the high,middle and low dose groups of GuiJianYu,themodelgroup,the sham group aswellas the positive control group w ith 10 cases in each.The AM Imodelswere established by coronary artery ligation and the levelsof serum creatine kinase(CK),creatine kinase MBmass(CK-MB),aspartate am inotransferase(AST),lactate dehydrogenase(LDH),serum malondialdehyde(MDA),superoxide dismutase(SOD)and nitric oxide(NO) were detected in differentgroups.Results:The levelsof ratsserum CK,CK-MB,AST,LDH and MDAmarkedly decreased in the high and m iddle dose groups of GuiJianYu and the serum SOD and NO significantly increased,and the differences in comparing these groupsw ith themodelgroup had statisticalmeaning(P＜0.05).Conclusion:Gui－JianYu has certain protective function for the themyocardial cells of the AM Irats and can prevent AM Ioccurrence in a certain degree.

acutemyocardial ischem ia AM I;coronary artery ligation;GuiJianYu(euonymusalatus); myocardium enzyme

R285.5

A

1004-6852(2015)03-0019-03

2014-02-10

赵成国(1978—)，男，硕士学位，讲师。研究方向：中药分析及药理学。

△通讯作者：肖洪彬(1957—)，男，博士后合作导师，博士研究生导师，教授。研究方向：方剂配伍规律及方剂疗效客观化的研究。