孙 岩，孙长杰，刘 冰

（吉林大学第一医院，吉林长春130021）

人类胃液中EB病毒的检测

孙 岩，孙长杰，刘 冰＊

（吉林大学第一医院，吉林长春130021）

EB病毒（Epstein－barr vinus）与许多人类恶性肿瘤的发生有密切相关，这些肿瘤包括Burkitt淋巴瘤，霍奇金恶性淋巴瘤，非霍奇金恶性淋巴瘤、胃癌、鼻咽癌及一些部位的淋巴上皮瘤样癌［1－3］。自Burke于1990年首次报告EB病毒与胃癌相关以来，部分学者相继在淋巴上皮瘤样胃癌及其他类型的胃癌细胞中检测出EB病毒。本文对经临床病理确诊的胃癌、胃溃疡及非胃溃疡疾病的胃液标本进行了检测，现报告如下。

1 材料和方法

1.1 一般材料

经临床病理确诊的胃癌、胃溃疡及非胃溃疡疾病的胃液共124例，其中胃癌40例，胃溃疡45例，非溃疡疾病39例患者，年龄在19－70岁之间（平均56岁）。男67例，女57例。

1.2 提取DNA的方法

吸取胃液0.5ml于1.5ml的Eppendort中离心（7500转／20min），将上清弃取。加入ATL1800 μl及20μl proteinaseK，稍离心，置55℃水浴1小时30分钟后直至透明。再加入AL1及AL2共200μl（AL1 160μl＋AL2 240μl），经离心后置水浴10 min，待冷却后加入（CH3）2OH210ml，轻轻混合3 min，再重复以上步骤。离心所得的液体即是提取的DNA。

1.3 聚合酶链反应（PCR）

PCR试剂盒购自生物试剂有限公司，操作按说明书进行。

2 结果

2.1 PCR扩增产物分析

扩增产物是121bp，EB病毒DNA阳性对照出现预期结果，见图1。

2.2 EB病毒DNA检出情况

胃癌、胃溃疡、非胃溃疡疾病的胃液EB病毒DNA检出情况见表1。

图1 PCR扩增产物

124例胃液标本中EB病毒DNA阳性9例（6%）；其中胃癌有5例检测出EB病毒阳性（12.5%），HP（Helicobacter pylori）阳性（93%）。溃疡病胃液标本EB病毒DNA阳性4例（7%），HP阳性（66%），非溃疡疾病胃液标本EB病毒均为阴性，HP阳性（30%）。

表1 检验结果

3 讨论

EB病毒是与人类密切相关的病毒之一，世界上几乎所有的成人都被其感染过。EB病毒与人类的许多恶性肿瘤有关。文献报道EB病毒主要存在于具有广泛淋巴细胞侵犯的特殊类型胃癌组织中，其阳性率可高达80%以上［4］，文献报道在普通型的胃癌组织中也有EB病毒存在，其阳性率在不同地区差别很大［5，6］。但是，目前为止对于胃溃疡及非胃溃疡疾病报道极少。

本组病例用聚合酶链反应（PCR）方法检测本地区经临床病理确诊的胃癌、胃溃疡及非胃溃疡疾病的共124例胃液标本中EB病毒DNA阳性9例（6%）；其中胃癌有5例EB病毒阳性（12.5%），HP阳性（93%）。

本组45例溃疡病胃液标本EB病毒DNA阳性4例（7%），HP阳性（66%）。提示EB病毒阳性的溃疡病有可能是发展为胃癌的潜在高危人群。Fukayanma［7］等认为EB病毒可通过被激活的携带EB病毒的淋巴细胞，感染胃的表面上皮。EB病毒可能是有些病毒相关型胃癌发生的一个因素，而用原位杂交的方法检测EB病毒抗体或可用作筛检EB病毒相关胃癌的高危人群。非胃溃疡疾病的胃液标本中EB病毒均为阴性，HP阳性（30%）。但Shousha［8］等报道19例各种类型的胃癌组织中，仅在其中1例淋巴上皮瘤样组织中检出病毒，而在11例癌旁正常胃黏膜或十二指肠中有7例被检出有散在的含有EB病毒。

［1］Griffin BE，Xue S.Epstein－Barr virus infections and therir association with human an malignancies：Some key nquestions［J］.Ann Med，1998，30：4：2.

［2］Niedobitek G.Epstein－Barr virus infection in the pathogenesis of naspharlygeal carcinoma［J］.Molpathol，2000，53：248.

［3］KawaK.Epstein－Barr virus－associated diseases in humans［J］.Int Hematol，2000，71（2）：108.

［4］Shotaro N，Takashi U，Takashi Y，et al.Epstein－Barr virus infection in gastric carcinoma with lymphoid stroma［J］.Cante，1994，73：22.

［5］Nagasta H，Tokungaga M，Oyamada S，et al.Detection of Epstein－Barr virus in gastric carcinoma and adjacent normal gastric and duodenal mucosa［J］.J Clin Pathol，1994，47：695.

［6］张凤民，郭淑元，谷鸿喜，等.用法探讨Epstein－Barr virus与胃癌有关系［J］.哈尔滨医科大学学报，1998，4：238.

［7］Fukayama M，Hayashi Y，Iwasaki Y，et al.Epstein－Barr virus－associated gastric Carcinoma and Epstein－Barr virus infiltration of the stomach［J］.Lab Invest，1994，71：73.

［8］Shousha S，Luqmani YA.Epstein－Barr virus in gastric Carcinoma and adjacent normal gastric and duodenal mucosa［J］.J Clin pathol，1994，47：695.

2014－04－29）

1007－4287（2015）09－1530－02

＊通讯作者