基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪在快速鉴定临床酵母菌中的应用
2015-05-07奚海燕李玲慧邵海枫王卫萍李晓军
奚海燕,王 颖,黄 梅,李玲慧,范 明,邵海枫,王卫萍,李晓军
0 引 言
随着广谱抗生素、免疫抑制剂及抗肿瘤药物等的广泛应用,真菌感染在临床上越来越常见[1]。特别是在免疫抑制疾病、恶性血液系统疾病、干细胞移植和器官移植的患者中,真菌感染已成为影响预后的主要因素。念珠菌是引起院内血源性感染第4 位最常见的病原体[2]。其中白念珠菌占血源性真菌感染的半数以上,近年来,非白念珠菌如光滑念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌等的感染比例也在升高[3]。非白念珠菌血症的增多与预防性使用氟康唑有关[4]。这些非白念珠菌引起的系统感染预后较白念珠菌感染差[5]。尤其是对氟康唑不敏感的光滑和克柔念珠菌等引起的系统感染已成为临床治疗的难题。传统的实验室检测方法往往鉴定周期长、操作繁琐、阳性率低,不能满足临床快速诊断和及时治疗的需要。目前,随着分子生物学技术的不断发展,出现许多快速鉴定酵母菌的方法,如核酸杂交技术、随机扩增多态性DNA 分析和rDNA ITS 序列分析等[6],但这些技术复杂耗费高,不适用临床微生物实验室的常规检测工作。基于蛋白组学的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)是近年来发展起来的一种新型软电离质谱技术,在现今病原菌快速检测方面得到广泛关注[7-13]。本研究探讨MALDI-TOF-MS 用于快速鉴定临床酵母菌的可靠性和实用性。
1 材料与方法
1.1 菌株 收集南京军区南京总医院2013 年7-10 月自临床标本(血液、脑脊液、胸腹水、尿液、脓汁和伤口分泌物等)分离的非重复酵母菌共120 株。……
