林健球 谢仁岐

纤维支气管镜检查及支气管肺泡灌洗液噬菌体裂解法对痰菌阴性肺结核的诊断价值研究

林健球 谢仁岐

目的 探讨纤维支气管镜(简称纤支镜)联合刷检、活检及支气管肺泡灌洗液(BALF)噬菌体裂解法对痰菌阴性肺结核(SNPTB)的诊断价值。方法 纳入SNPTB患者100例, 随机分为实验组与对照组, 每组50例。实验组予纤支镜刷检联合刷检、活检及BALF噬菌体裂解法检查, 以任意一项阳性为检测阳性；对照组予传统痰抗酸染色、聚合酶链反应(PCR)、结核菌素试验(PPD)、血结核抗体检测, 以任意一项阳性为检测阳性。对比两组诊断效果, 并对比实验组三种检测方案独立阳性率。结果 实验组阳性检出率94.0%, 明显高于对照组68.0%, 差异具有统计学意义(P＜0.05)；实验组中刷检阳性率66.0%、活检阳性率61.9%, 均明显低于BALF噬菌体裂解法阳性检出率92.0%, 差异具有统计学意义(P＜0.0125)。结论 多种纤支镜检测方案联合, 对SNPTB的诊断效果极佳；这些检测方案中, 又以BALF噬菌体裂解法诊断价值最高。

肺结核；诊断；纤维支气管镜；肺泡灌洗；噬菌体裂解法

我国是结核病高负担国家之一, 肺结核患病率高而病理发现率低［1］。临床认为早期诊断、及时治疗可有效提升疗效、预防复发, 且可节省经济开支, 然而现阶段SNPTB已逐渐成为活动性肺结核的主要类型, 其痰检抗酸杆菌阳性率多＜40%, 且即便结果提示阳性, 依旧难以区分结核或非结核分枝杆菌［2］, 此类患者其他临床表现亦缺乏特异性, 漏诊率高。近期研究指出纤支镜刷检、活检、BALF对SNPTB可能具有较高的诊断价值, 然而刷检多为盲检、活检结果又受取材效果的影响, 均有一定局限性, 相较而言, BALF适用性更强［3］。以此为基础, 本研究重点探讨了BALF结合噬菌体裂解法对SNPTB的诊断价值, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年5月～2014年5月入院的100例患者, 均符合以下标准：参考临床症状、体征、实验室检查、影像学检查等, 拟诊断为肺结核, 且至少3次痰涂片、至少1次PCR诊断为阴性；入院前未行任何抗结核治疗；能够配合检查；知情同意；未合并凝血功能障碍。其中男57例,女43例, 年龄22～80岁, 平均年龄(45±9)岁, 随机将纳入对象分为实验组和对照组, 各50例, 两组患者一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 对照组均行传统痰抗酸染色、PCR、PPD试验、血结核抗体检测, 以任意一项阳性为阳性诊断, 统计阳性诊断率。实验组行纤支镜刷检、活检、BALF噬菌体裂解法检测,以任意一项阳性为阳性诊断, 统计阳性诊断率及各子项阳性诊断率。

1.2.2 实验组采用纤支镜检测, 方法如下：型号BF-P150纤支镜(奥林巴斯公司), 已按标准方案消毒, 通过镜检后是否对下次检测结果造成影响, 证实为消毒可靠。参考X线胸片探查并确定病变部位；发现病灶后, 如其表面存在坏死组织, 优先清除；随后行刷检及活检取材；然后行支气管肺泡灌洗, 灌洗液为无菌生理盐水, 预先控温至37℃, 共20 ml,分2～3次灌入相应位置, 负压回收, 送行噬菌体裂解法检测。如未能发现明显病灶, 则参考X线胸片所示病灶, 在相应区域行刷检, 随后参考前述方案, 灌洗后取灌洗液送检, 此时不予活检。如影像学检测亦未见明显病灶, 则镜下取疑似病灶区域, 取标本。行活检的组织均要求60 min内送行细菌学及组织学检查；刷检物制涂片, 行抗酸染色找结核分枝杆菌；灌洗液回收量一般为5～15 ml, 严格参考结核分枝杆菌噬菌体裂解试剂盒(Phage Tek MBTM, 荷兰)说明书检测, 每次检测均设空白对照、噬菌体对照、杀毒剂对照、指示细胞对照、阳性及阴性对照, 在对照样本结果正确的前提下, 观察实验样本的检测结果。噬菌体裂解法阳性指标为出现大小不等的噬菌斑, 相互融合后可呈现透明状；阴性指标为细胞均匀生长,未见噬菌斑。同时统计纤支镜所致不良反应及并发症发生率,以评价其安全性。

1.3 统计学方法 所有数据均采用SPSS19.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数± 标准差( x-±s)表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。 P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 纤支镜检测与常规检测方案对比 对照组性常规检测方案, 得出阳性诊断34例, 占68.0%, 其中痰抗酸染色阳性11例、PCR阳性21例、PPD实验阳性14例、血抗结核抗体检测阳性18例, 部分患者多项检测均阳性。实验组阳性诊断47例, 占94.0%, 组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

2.2 纤支镜刷检、活检、BALF噬菌体裂解法检测结果对比 三组间三种检测方案的阳性检测率比较差异具有统计学意义(P＜0.05), 续行χ2分割检验, 指出纤支镜刷检、活检阳性检出率均明显低于BALF噬菌体裂解法, 差异具有统计学意义(P＜0.0125)。见表2。

表1 纤支镜检测与常规检测方案对比［n(%)］

表2 纤支镜刷检、活检、BALF噬菌体裂解法检测结果对比［n(%)］

2.3 纤支镜所致不良反应与并发症分析 实验组50例患者术后均出现咳嗽反应, 未予医疗干预, 自然消失；21例术后2 d内出现痰中带血, 予止血及对症干预后, 迅速缓解并消失；1例术后150 min时出现发热, 物理降温、应用抗生素120 min后体温恢复正常。未见其他不良反应, 未见肝肾功能损伤及其他严重并发症。

3 讨论

本研究证实, 对灌洗液行噬菌体裂解法检测, 能够取得较佳的诊断效果。该检测方案的原理为噬菌体对结合分子杆菌有选择性裂解作用, 当样本中含有活性结核分支杆菌时,噬菌体将侵入其中、大量繁殖, 从裂解细菌中释放出后, 又会感染指示细胞, 最终形成噬菌斑。反之, 当样本中不存在结核分枝杆菌时, 将不会形成噬菌斑［4］。其优势在于相较培养法, 检测周期明显更短, 可于当日得出诊断结果, 能够充分满足肺结核早期诊断、治疗的要求。

本研究同时分析了纤支镜检测的安全性, 结果指出患者术后仅表现出可控的轻度不良反应, 说明纤支镜检测不会对患者身体产生额外损伤, 安全性较高。

综上所述, 本研究证实纤维支气管镜检查及支气管肺泡灌洗液噬菌体裂解法检测, 对痰菌阴性肺结核均有较好的诊断价值, 合理结合两者, 能够进一步提升检出效果。

［1］ 李振生, 李德新, 陈素丽, 等.结核菌噬菌体生物扩增法与结核菌DNA联合检测对痰菌阴性肺结核诊断的价值.河北医科大学学报, 2012, 33(8):881-883.

［2］ 李站领, 李艳静, 彭勋, 等.多种手段联合应用对菌阴不典型肺结核的诊断价值.河北医科大学学报, 2013, 34(6):639-642.

［3］ 郭新枝, 陈裕, 于永敏, 等.支气管肺泡灌洗液BACTEC-MGIT 960结核菌快速培养的临床研究.北京医学, 2013, 35(3):221-222.

［4］ 林惠玲, 崔健伟, 王怡心, 等.噬菌体裂解法在肺结核分枝杆菌耐药性检测中的应用.中国热带医学, 2012, 12(2):215-216.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.22.046

2015-03-31］

佛山市科技攻关项目(项目编号：201308339)

528100 佛山市三水区人民医院急诊科