吕 莉，王继红，张 艳，孙晓红，肖 蓉，李庆伟* (.辽宁师范大学海洋生物功能基因与蛋白质组学研究所，辽宁 大连 6029;2.大连医科大学药学院药理教研室，辽宁 大连 6044;.中国人民解放军第20 医院，辽宁 大连 602)

重组日本七鳃鳗RGD 毒素蛋白rLj－RGD3是源自日本七鳃鳗口腔腺的可溶性RGD 毒素蛋白，分子量为13 600，由118 个氨基酸组成，其一级结构中含有3 个RGD 模体。前期研究表明，rLj－RGD3 符合RGD 毒素蛋白的特性，凭借其分子中含有的3 个RGD(Arg－Gly－Asp)模体而具有抗血小板聚集功能［1－2］。本研究旨在研究其保护凝血酶诱发的小鼠肺栓塞死亡作用并与肝素比较其出血倾向。

1 材料与方法

1.1 实验材料

重组日本七鳃鳗RGD 毒素蛋白rLj－RGD3，由辽宁师范大学海洋生物功能基因与蛋白质组学研究所实验室提供;肝素钠(Heparin)，北京奥博星生物技术有限责任公司产品;牛凝血酶，沈阳拜英生物技术有限公司产品。

昆明种小鼠，雄性，18 ～22 g，由大连医科大学动物中心提供，清洁级，许可证号SCXK(辽)2008－0002，饲养温度(20 ±1)℃，湿度30% ～50%。

1.2 rLj－RGD3 对凝血酶诱发小鼠肺栓塞死亡的保护作用

按文献［3］方法，稍作调整确定凝血酶攻击剂量为2 500 IU/kg。取小鼠70 只，随机分为7 组:NS 组，rLj－RGD3 0.13、0.25、0.5、1.0、2.0 mg/kg 组以及阳性对照药Heparin 200.0 IU/kg 组。给药组小鼠腹腔注射(i.p)不同受试药物，NS 组小鼠i.p 等容量NS(0.02 mL/g)，药后10 min 自尾静脉注射凝血酶2 500 IU/kg进行攻击，观察并记录15 min 内小鼠是否死亡，以15 min 内未死亡小鼠占本组受试鼠总数的百分数，作为rLj－RGD3 对抗凝血酶诱发小鼠肺栓塞死亡的保护百分率，并计算rLj－RGD3 对抗凝血酶诱发小鼠肺栓塞死亡的保护作用的ED50。

1.3 等效剂量肝素与rLj－RGD3 对小鼠出……

登录APP查看全文