浦雄勇，姚永良，孙王伟，蒋一彪，吴建红

(江苏大学附属昆山医院检验科，江苏 昆山 215300)

BGC-823胃癌细胞凋亡相关蛋白受miR-421调控后的表达分析

浦雄勇，姚永良，孙王伟，蒋一彪，吴建红

(江苏大学附属昆山医院检验科，江苏 昆山 215300)

目的 研究miR-421在胃癌BGC-823细胞凋亡过程中的分子机制。方法通过siRNA转染技术将miR-421 mimics与miR-421 inhibitors转染BGC-823胃癌细胞；Western blotting方法分析细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bax、Bcl-2以及细胞凋亡受体蛋白TNFR-Ⅰ、TNFR-Ⅱ的表达水平。结果miR-421 mimics与miR-421 inhibitors成功转染BGC-823胃癌细胞；caspase-3、Bax蛋白在miR-421 inhibitors转染细胞中表达增强，而Bcl-2、TNFR-Ⅰ与TNFR-Ⅱ则表达降低。结论miR-421在BGC-823胃癌细胞中可能通过调控肿瘤细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bax、Bcl-2的表达及肿瘤细胞表面凋亡受体蛋白TNFR的表达从而影响BGC-823的凋亡。

胃癌；miR-421；转染

微小RNA(microRNA，miRNA)是一种非编码的小RNA，其碱基长度为20～22 bp，可通过碱基配对方式引导沉默复合体(RNA-induced silencing complex，RISC)降解mRNA或抑制mRNA的翻译，最终调控蛋白的表达[1]。MiRNA在多种癌组织中均有一定程度的异常表达，并且这些miRNA直接或间接的影响着肿瘤细胞的增殖与凋亡，以上提示miRNA可能发挥着类似原癌基因或抑癌基因的功能[2]。胃癌是人类常见的一种恶性肿瘤，目前众多研究在胃癌中发现了大量的异常表达的miRNA，表明miRNA在胃癌的发生、发展过程中可能发挥着重要作用。临床研究表明miR-421在不同种类及不同分化类型的胃癌细胞中表达水平均显著升高，并且在胃癌早期即异常表达，提示其可能有助于早期胃癌的诊断。本研究通过miR-421在胃癌细胞BGC-823中的表达，探讨其与细胞凋亡相关蛋白的作用及其对细胞凋亡的影响。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 BGC-823细胞系购自上海中科院细胞库；……