陈民香张培晏

(1.四川省广元市动物疫病预防控制中心,四川广元 625017; 2.四川省广元市昭化区动物疫病预防控制中心,四川广元 625021)

鸭传染性浆膜炎的研究进展

陈民香1张培晏2

(1.四川省广元市动物疫病预防控制中心,四川广元 625017; 2.四川省广元市昭化区动物疫病预防控制中心,四川广元 625021)

鸭传染性浆膜炎是危害养鸭业的主要传染病之一,本病可给肉鸭养殖户造成严重的经济损失。本文对该病研究成果,包括流行情况、病原菌血清型、鸭疫里默氏杆菌生物学特性、疫苗及免疫方面作一综述。

鸭疫里默氏杆菌;血清型;诊断;防治

鸭传染性浆膜炎是由鸭疫里默氏杆菌引起的鸭、鹅、火鸡等多种禽类的一种急性或慢性传染病。本病呈急性或慢性败血症过程，主要症状有以纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、干酪性输卵管炎。1～8周龄鸭敏感，恶劣的环境是促发感染的直接因素。发病率为5～90%，病死率高达80%，慢性耐过鸭主要表现神经性症状，导致残鸭和僵鸭。本病对鹅、火鸡等也造成很大的危害[1-2]。

1 流行情况

邝荣禄等在1975年首次提出我国发生此病，并在1981年确诊了本病在广东地区盛行。郭玉璞等1982年首次报道了在北京郊区鸭场于198O～1981年间曾发生本病，并分离出病原菌。随后在北京、上海、四川、内蒙古、辽宁等 29个省市自治区有此病发生[3]，可见RA已在我国养鸭地区广泛流行。本病主要感染鸭，但也可感染鸡、火鸡、鹅、雉鸡、鹌鹑，主要通过污染的饲料、饮水、飞沫、尘土等经呼吸道、消化道和刺破的足部皮肤及蚊虫叮咬等途径感染而发病。其主要发病日龄为1～8周龄，最多见发病是2～3周龄，但据汪铭书所述RA对鸭的致病日龄范围有扩大的趋势，发病鸭群最小的只有5日龄，大的可达90日龄[4]。患病鸭常合并感染禽霍乱、大肠杆菌病、禽副伤寒和鸭病毒性肝炎等。本病无明显的季节性，但较多见于春夏季。

2 病原菌血清型

迄今，国际上已确认RA共有21种血清型[5]。在不同的国家和地区，引起鸭疫里氏杆菌病流行的RA血清型不尽相同。我国自l982年郭玉璞等在北京确定血清1型RA的存在后，全国各地相继有本病的报道，直到1987年仍然认为我国仅有血清1型鸭疫里氏杆菌存在，但近年来从北京、上海、四川等省，由张大柄等，程安春等分离鉴定出的血清型有1、2、3、4、6、8、10、11、13、14、15、17、22、23、24、25[6]等16个血清型，汪铭书等先后在全国28和25个省（市、自治区）分离到血清3型和血清5型RA。因此我国至少有17个血清型，并且还有许多未知血清型的存在，目前主要以1、2、6、10型多见。

3 诊断

3.1 临床特征及病理变化

自然感染发病的鸭临诊表现为倦怠、缩颈、不食或少食，眼鼻有分泌物，淡绿色腹泻，不愿走动或掉群，运动失调，频死前出现神经症状；头颈震颤，角弓反张，不久抽搐而死，病程一般为1～3d，幸存者生长缓慢。日龄较大的鸭多呈亚急性或慢性经过，病程达1周或1周以上，病鸭表现除上述症状外，时有出现头颈外斜，遇有惊扰时不断鸣叫，颈部弯转90°左右，转圈或倒退运动。最明显的眼观病变是纤维素性渗出物，可波及全身浆膜面，及心包膜，肝脏表面以及气囊，即构成典型的纤维素性心包炎、肝周炎及气囊炎。

3.2 实验室诊断

3.2.1 分离与生物学特性鉴定

郭予强等（1983）报道，最易分离到RA的组织是病鸭的脑和心血，其次是气囊、骨髓、肺、肝、脾的渗出物等。从病料中初次分离RA需要用加鲜血的琼脂平板，厌氧培养。传代后的RA在TSA上培养24h形成圆形凸起、透明、呈露珠样，直径为0.5～1.5mm的小菌落，用斜射光观察发出绿色光，而鸭大肠杆菌菌落为2～5mm，RA菌落为2～3mm，培养物均为灰白色；进一步接种麦康凯平板，里默氏杆菌不生长，鸭大肠杆菌呈红色菌落，鸭沙门氏菌呈白色菌落。因此，综合IS的临床症状、病理变化、分离菌株培养特性、菌体形态及生化特性等可以鉴定出RA分离株。测定血清型常用平板凝集反应和琼脂扩散试验。

3.2.2 间接血凝试验

运用琼脂扩散制备抗原，通过与致敏式二醛化的绵羊红血球发生凝集反应的程度来检测血清中鸭疫里默氏杆菌抗体的水平。

3.2.3 间接免疫荧光抗体试验

朱琪等建立了间接免疫荧光抗体试验对RA进行特异性检测，从而与鸭大肠杆菌病、鸭霍乱等进行区分鉴别，该技术具有简便、快速、敏感和特异性强等特点，对发病小鸭的检测结果表明，鸭脑组织、鼻窦及肝脏等细菌检出率较高。

3.2.4 酶联免疫吸附试验（ELISA）

张鹤晓（1998）[7]、胡清海（2001）分别以1型鸭疫里氏杆菌全菌体、脂多糖（LPS）作为包被抗原，应用酶联免疫吸附试验（ELISA）建立了特异性检测鸭疫里氏杆菌I型抗体的方法。此法是目前检测鸭疫里氏杆菌抗体的一种敏感方法。

3.2.5 间接免疫酶组织化学法

刘维平等（2004）和孟琼华等（2004）分别以鸭、鹅源血清1型鸭疫里氏杆菌作为抗原免疫兔制备兔抗鸭疫里氏杆菌的IgG，建立检测雏鸭、雏鹅感染RA的间接免疫酶组织化学法，可用于雏鸭、雏鹅RA人工感染和临床感染的诊断、检测及RA抗原定位和致病机理的研究。

3.2.6 鸭疫里默氏杆菌的分子生物学诊断

PCR方法具有准确、快速、简便之优点。胡清海等（2002）以RA的OmpA基因序列设计了一对扩增产物长度为809bp的特异性引物，应用PCR技术可准确地鉴别RA。汪铭书等（2004）利用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术，在RA与大肠杆菌、沙门氏菌中筛选出可区别于RA的8条随机引物和可作为分子标记鉴别1、2、4和5型的RA的8条随机引物。可作为RA的分子诊断。

4 疫苗及免疫

4.1 灭活苗

包括无佐剂灭活苗和含佐剂灭活苗。高福等用RA I型北京株制备了鸭疫里默氏杆菌灭活苗经对7日龄雏鸭皮下注射1.0ml（含菌 3×109CFU/ml），保护率在86.67～100%[8]。高福等在研制RA福尔马林灭活苗的基础上，制得了矿物油佐剂灭活苗，最低保护率为75%，免疫后一周已表现出很强的免疫力，但注射部位有微弱的不吸收硬结。苏小运等研制的铝胶灭活苗一免后7～10d保护率为50%，二免20d后保护率为75%，不仅易于注射且注射部位无不良反应，对肉的品质没有多大影响，但保护力出现较慢。蔡家运等研制的RA蜂胶疫苗一免后15d保护率为80%，二免后10d保护率为100%，而且蜂胶的制备方法较铝胶苗简单，使用方便，易吸收，对肉鸭的肉质无不良影响。胡清海等，以1，2，1O型RA分离型为菌种，研制RA三价油乳剂灭活疫苗，对6日龄雏鸭皮下接种0.4ml/只，免疫后攻毒，第14d保护率为91.7%～100%，35d保护率为66.6%～83.5%，田间试验结果表明，雏鸭5～7日龄免疫后至上市保护率可达95%～100%。

4.2 弱毒活苗

Sandhu等针对美国主要流行株中1，2，5型占95%的特点，研制了三价疫苗，经饮水或气雾免疫1日龄雏鸭，实验室和野外试验均表明效果良好[9]。对雏鸭安全，无副作用，且不受抗菌药物的影响。

4.3 亚单位菌苗

林世棠等利用鸭疫里氏杆菌亚单位成分每只0.5mL经皮下或腿肌接种7日龄雏鸭，一周后攻毒，有较好的保护力，保护指数为81.5～lO0%。吕敏娜等从RA细胞壁提取一种可溶性荚膜抗原，具有良好的免疫原性，制成的RA荚膜多糖苗免疫雏鸭，产生坚强的保护力[10]。

4.4 鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌二联苗

苏敬良等进行了鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌二联苗的研究：I型鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌O2二联铝胶苗，经皮下注射10日龄雏鸭，免疫10d后，用同源强毒攻击，均有很高的保护率[11]。刘永德等将大肠杆菌O78与鸭疫里氏杆菌灭活菌液混合，加入盐酸左旋咪唑制成疫苗I，培养感染鸭疫里氏杆菌鸭胚，取尿囊液和胚体，捣碎灭活后与大肠杆菌O78灭活液混合，加入盐酸左旋咪唑制成疫苗II。经实验室和野外免疫试验，证明具有很好的预防效果。

5 结语

目前，本病呈全球性流行，是造成养鸭业经济损失的最主要传染病之一，其血清型之多，各血清无交叉免疫原型，地域分布之广加之用药治疗易产生耐药性，使得对该病的防制工作相当繁重。当前各国兽医工作者均在加紧对RA分子生物学、免疫原性等方面的研究，试图研发出有效的防制疫苗，建立有效、快速的血清学监测体系，以保障养鸭业的持续健康发展。

[1] Heifer.D.L. et a1.Pasteurella anatipestifer infection in gesse[J]. Avian.Dis，1973，（17）：868-870.

[2] Sandhu.D.H. Pasteurella anatipestifer infection in turkeys[J].Avian Dis，1977，（21）：712-715.

[3] 谢永平.我国鸭疫里默氏菌病研究进展[J].贵州畜牧兽医，2001，（3）：10-11.

[4] 汪铭书.血清8型鸭疫里氏杆菌在我国的发现及其病原特性研究[J].中国预防兽医学报，2003，（1）：47-52.

[5] 郭玉璞.我国对鸭传染性浆膜炎研究概况[J].中国兽医杂志，1997，（12）：37-38.

[6] 张大柄，郭玉璞.鸭里氏杆菌的血清型[J].中国兽医杂志，1998，24（6）：44-46.

[7] 张鹤晓，郭玉璞.鸭疫里氏杆菌研究进展[J].中国兽医杂志，1998，（3）：183-186.

[8] 高福.小鸭传染性浆膜炎疫苗的研究[J].中国兽医杂志，1993，（8）：46-48.

[9] SANDHUTS，LEISTERML.Serotypes of Pasteurella anatipestifer isolates from poultry in different countri[J].Avi.Pathol，1991，（20）：233-239.

[10] 吕敏娜.鸭传染性浆膜炎荚膜多糖苗研究初报[J].广东畜牧兽医科技，1999，（3）：16-18.

[11] 郭玉蹼.我国对鸭传染性浆膜炎研究概况[J].中国兽医杂志，1997，（12）：37-38.