宋 佳，宋慧娟，李 丹，刘婷婷，叶丽平

辽宁医学院，辽宁锦州 1210011病理生理学教研室；2科学实验中心

葡萄糖调节蛋白78对人舌癌细胞侵袭的影响及其机制

宋 佳1，宋慧娟2，李 丹2，刘婷婷2，叶丽平1

辽宁医学院，辽宁锦州 1210011病理生理学教研室；2科学实验中心

目的探讨葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78，Grp78)对人舌癌细胞系Tca-8113侵袭的影响及其分子机制。方法应用pcDNA3.1(+)-Grp78重组质粒转染舌癌细胞系Tca-8113筛选得到稳定表达Grp78的克隆(78C6)，再应用siRNAGrp78转染78C6敲除Grp78表达，应用Transwell实验分析其侵袭能力，免疫荧光和细胞伸展实验检测细胞骨架排列和细胞伸展情况，GST-pulldown技术对Rac1和RhoA活性进行分析，Western blot检测Rac1、RhoA、MMP-9和MMP-2的表达。结果Transwell实验结果显示，特异性上调Grp78表达明显促进舌癌细胞的侵袭，并且这种促进作用可以被siRNA-Grp78转染抑制，差异有统计学意义(P＜0.05)。进一步的研究发现，与对照组相比，Grp78高表达可以促进舌癌细胞Tca-8113的伸展和极性形成，差异有统计学意义(P＜0.05)。细胞骨架染色结果表明特异性上调Grp78后，细胞骨架微丝主要分布于细胞边缘，而这种作用可以被siRNA-Grp78转染抑制，导致细胞皮质部位出现明显的应力纤维。GST-pulldown结果表明，与对照组相比，Grp78高表达使Rac1的活性水平增高，RhoA活性降低，而siRNA-Grp78转染的细胞中Rac1活性降低，RhoA活性升高。Western blot研究显示，与对照组相比，Tca-8113/Grp78细胞中MMP-2和MMP-9表达增高(P＜0.05)，siRNA-Grp78转染的细胞中MMP-2和MMP-9表达降低(P＜0.05)，而RhoA和Rac1的表达前后无变化。结论Grp78通过激活Rac1抑制RhoA活性及上调MMP-2和MMP-9表达来促进舌癌Tca-8113细胞的侵袭。

葡糖糖调节蛋白78；Tca-8113；侵袭

舌癌是口腔颌面部肿瘤中最常见的恶性肿瘤，具有较高的侵袭和转移能力，其死亡率和复发率极高，在临床中舌癌常发生早期转移，这是影响舌癌治疗效果的重要原因[1]，因此，抑制舌癌的侵袭和转移成为治疗舌癌的关键所在。……