陈 锦，徐红炜，张 振，胡 波

(1.湖北省咸宁市通城县人民医院检验科 437400；2.湖北省武汉市妇女儿童医疗保健中心检验科 430016；3.广东省中山大学附属第三医院，广州 510275)



·临床研究·

3项联合检测对手足口病患儿脑神经损伤的诊断价值*

陈 锦1，徐红炜1，张 振2△，胡 波3

(1.湖北省咸宁市通城县人民医院检验科 437400；2.湖北省武汉市妇女儿童医疗保健中心检验科 430016；3.广东省中山大学附属第三医院，广州 510275)

目的 探讨联合检测血清S100β蛋白(S100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和髓鞘碱性蛋白(MBP)对手足口病(HFMD)患儿脑神经损伤的诊断价值。方法 将246例HFMD患儿按影像学检测结果分为重型(63例)和轻型(183例)两组，入院后第1～7天每天上午抽静脉血后，采用酶联免疫吸附试验检测246例HFMD患儿S100β、NSE和MBP。同时选择66例健康儿童作为健康对照组。结果 63例重型HFMD患儿S100β、NSE和MBP结果均显著升高，其检测值与183例轻型HFMD患儿及66例健康对照者比较差异有统计学意义；轻型患儿与健康对照组相比S100β差异有统计学意义，而NSE和MBP检测结果差异无统计学意义。结论 重型与轻型HFMD患儿S100β、NSE和MBP存在不同的变化趋势，联合检测S100β、NSE和MBP可提高HFMD患儿脑神经损伤的诊断率、明确疗效和监测预后。

S100β蛋白； 神经元特异性烯醇化酶； 髓鞘碱性蛋白； 手足口病

手足口病(HFMD)是由多种肠道病毒感染引起的儿科常见传染病，以5岁以下儿童多发，临床主要以口腔、手掌和足趾等部位出现斑丘疹、疱疹为特征。患者病情一般较轻，预后良好，但个别患者可发展为重症病例，出现脑神经、心肌损伤等并发症[1-2]。临床对HFMD患儿是否有脑神经损伤较难诊断，S100β蛋白(S100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和髓鞘碱性蛋白(MBP)水平的变化可反映神经元、胶质细胞、神经髓鞘膜结构损伤严重程度的情况[3]。本文通过检测246例HFMD患儿S100β、NSE和MBP，旨在探讨联合检测S100β、NSE和MBP对HFMD患儿脑神经损伤的诊断价值和临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年1月至2014年1月通城县人民医院收治的HFMD患儿246例，这些患儿均符合1995年第四届全国手足口病修订方案脑血管诊断标准，其中男126例，女120例，年龄0.3～6.0岁。246例HFMD患儿按CT或MRI影像学检测结果是否有病理性变化分为重型(63例)和轻型(183例)两组,所有HFMD患儿入院后马上进行对症治疗。另选择体检健康的66例健康儿童作为健康对照组，其中男39例，女27例，年龄0.5～6.0岁，志愿儿童均无心、肝、肾及免疫系统疾病。两组性别、年龄、体质量等一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 标本采集方法 HFMD患儿入院后第1～7天共采集7次患儿标本，每天上午清晨空腹采集患儿外周静脉血3～5 mL，经1 000 g离心15 min，分离血清(溶血标本丢弃，重新取样)装于密封无污染的EP试管中，分离血清后2 h内送检。健康对照组标本采集和检测方式与患儿一致。

1.3 NSE、MBP和S100β的检测 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行NSE、MBP和S100β测定。NSE和MBP试剂盒购自上海蓝基(BlueGene)生物科技有限公司，S100β试剂盒购自美国Uscnlife Science&Technology公司USCNUFETM试剂。酶标仪为美国产Multiskan Fc型酶标仪。实验操作步骤严格按照试剂盒使用说明书进行，试剂在有效期内使用，所有检测项目保证室内与室间质控均在控。

2 结 果

2.1 重型HFMD患儿S100β、NSE和MBP检测结果 见表1。HFMD患儿入院第1～7天共检测7次重型HFMD患儿S100β、NSE和MBP，与健康对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。

表1 重型HFMD患儿S100β、NSE和MBP检测结果

注：与健康对照组比较，#P<0.01。

2.2 轻型HFMD患儿S100β、NSE和MBP检测结果 见表2。HFMD患儿入院第1～7天，共检测7次轻型HFMD患儿S100β，与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)，NSE和MBP检测结果与健康对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。

表2 轻型HFMD患儿S100β、NSE和MBP检测结果

注：与健康对照组比较，#P<0.01。

2.3 重型与轻型HFMD患儿S100β、NSE和MBP检测结果 见表3。HFMD患儿入院第1～7天，共检测7次重型HFMD患儿S100β、NSE和MBP，与轻型HFMD患儿相比差异均有统计学意义(P<0.01)。

表3 重型与轻型HFMD患儿S100β、NSE和MBP检测结果

注：与轻型HFMD患儿比较，#P<0.01。

3 讨 论

HFMD根据发病经过、病情特点和病变部位，分为重型和轻型HFMD，二者临床表现差异不大。对于HFMD等影像学检测可见的脑部损伤较好判断，而对于影像学检测不出的HFMD神经损伤临床较难判断，HFMD神经受损后的预后较差，因此监测HFMD患儿的神经受损情况非常重要[4-5]。

S100β是一类钙离子结合蛋白，相对分子质量较小，但具有广泛生物学活性，主要存在于中枢神经系统的少突神经胶质细胞和星形细胞中[6]。中枢神经系统细胞损伤后，S100β蛋白首先从胞液进入脑脊液，再经被破坏的血-脑脊液屏障进入血液[7-8]。S100β在正常情况下发挥重要的生理作用，但分泌过高具有神经毒性。因此，S100β蛋白被认为是中枢神经系统损伤较特异和灵敏的标志物，其含量的高低可反映患儿神经元和胶质细胞损害的严重程度。研究发现，细胞外高浓度S100β可刺激炎症因子表达，导致细胞凋亡。在影像学检查未发现异常前，脑损伤患儿血清S100β已有明显升高，S100β是早期评价亚临床脑损伤的有效标志物[9]。本研究结果显示，重型和轻型HFMD患儿血清S100β含量均明显高于健康对照者，差异有统计学意义(P<0.05)，重型与轻型HFMD血清S100β含量差异也有统计学意义(P<0.01)。其结果说明S100β可以较敏感地反映HFMD患者神经损伤的程度，可以检测出无影像学变化的脑神经损伤情况。S100β是HFMD患者脑神经损伤的极敏感指标，对脑出血患儿神经损伤转归的判断具有重要意义。

NSE是主要存在于神经元细胞中的一种可溶性胞浆蛋白，主要参与糖酵解、催化磷酸烯醇化丙酮酸的生成。在颅脑外伤时由于神经元细胞完整性破坏，使大量NSE从细胞内释放出来，透过破坏的血脑屏障进入血液[10]。正常体液中NSE 含量甚微，但当脑受到损伤时，神经细胞因受损而变性、坏死崩解，该酶可大量进入脑脊液和血液中。因此，血液中NSE含量的高低可反映中枢神经系统受损的程度，是反映神经元细胞受损程度较好的生化指标[10-11]。本研究结果显示，重型HFMD患儿血清NSE含量明显高于轻型HFMD患儿和健康对照者，差异有统计学意义(P<0.01)，轻型HFMD患儿血清NSE只稍高于健康对照者，二者差异无统计学意义(P>0.05)，由此说明血清NSE的检测结果与影像学结果基本一致，可以比较准确地反映HFMD患儿中枢神经系统受损的情况。

文献[12]显示NSE可能会发生局限性升高，升高24 h后即会下降。NSE没有年龄的区别，但需要注意在溶血的情况下，NSE可以发生假阳性反应[13]。有人用不同的S100β和NSE浓度为分界标准评估预后，将所得的真阳性率和假阳性率作图所得的曲线比较，发现在相同的敏感度下S100β对预后的评估较NSE更特异，在相同的特异度下S100β对预后的评估也较NSE更敏感，由此说明S100β对预后的评估较NSE更敏感、更特异，这与本研究检测结论一致。由于S100β具有热稳定性，不受溶血、低温、肝素等因素影响，并可在室温或4 ℃全血标本中保存48 h而被认为有较好的敏感性和特异性，故很多学者主张S100β和NSE二者结合更有利于脑损伤的临床判断。

MBP是中枢神经系统少突细胞和周围神经系统雪旺细胞合成的一种强碱性膜蛋白，分为中枢型(A1)和周围型(P2)两种类型，A1存在于中枢神经系统，由少突胶质细胞合成和分泌，脑白质含量最高，P2则由雪旺细胞合成和分泌，存在于周围神经髓鞘膜中[14]。MBP是神经组织所特有的膜蛋白成分，对维持髓鞘结构的完整和功能具有重要作用。当髓鞘破坏时，MBP可释放入脑脊液和血液，其含量变化是反映中枢神经有无实质性损害，尤其是髓鞘有无脱失的特异性标志物，对判断病情严重程度和预后有重要意义。与S100β比较，作为中枢神经系统生化标志物MBP特异性更强，但敏感性较低[15]。与S100β主要用于疾病诊断和病情评估不同，MBP还用于临床治疗，标志有MBP微基因的雪旺细胞不仅能在宿主脊髓内存活，而且还有非常活跃的功能，如分泌多种神经营养因子维持受损神经元的存活，为再生提供先决条件。本研究结果显示，重型HFMD患儿血清MBP水平明显高于轻型HFMD患儿和健康对照者，差异有统计学意义(P<0.01)，而轻型HFMD患儿血清MBP只稍高于健康对照者，二者差异无统计学意义(P>0.05)，由此说明血清MBP的检测结果与影像学结果也基本一致。

综上所述，重型与轻型HFMD患儿S100β、NSE和MBP存在不同的变化趋势，S100β可用于诊断HFMD患儿早期神经损伤，可以反映影像学无病例改变的脑神经损伤，而NSE和MBP则可用于HFMD患儿神经损伤的病情变化观察，联合检测S100β、NSE和MBP可提高HFMD患儿神经损伤的诊断率、明确疗效和监测预后。

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教育部第44批留学回国人员科研启动基金项目(2012-940)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.03.032

A

1672-9455(2015)03-0368-02

2014-07-19

2014-10-15)

△通讯作者，E-mail:1572690432@qq.com。