缪向来　(武汉市普仁医院胃肠外科，湖北 武汉 430000)

舒丽启能加四磨汤促进小鼠结肠术后胃肠功能恢复

缪向来(武汉市普仁医院胃肠外科，湖北 武汉 430000)

[摘要]目的探讨四磨汤辅助舒丽启能治疗结肠术后胃肠功能障碍的临床疗效和药理机制。方法选取昆明种小鼠(雌雄各半)200只，随机分为4组(空白组、模型组、舒丽启能组和联合组)，各组50只；空白组正常饲养，其他3组制备结肠术后胃肠功能障碍模型，模型制备成功后，舒丽启能组灌胃给予舒丽启能，联合组灌胃给予舒丽启能加四磨汤，模型组和空白组灌以等剂量的蒸馏水。1周后，抽取腹腔静脉血，采用ELISA试剂盒检测血清乙酰胆碱(ACH)和去甲肾上腺素(NE)浓度，并进行胃排空和肠推进实验。结果造模后，与空白组相比，其余3组的MUPA均有明显降低(P<0.05)，且3组之间无统计学差异(P>0.05)；药物干预后，舒丽启能组MUPA显著高于模型组，联合组MUPA显著高于舒丽启能组(P<0.05)。此外，与空白组相比，其余3组的胃排空率、小肠推进率、血清ACH及NE浓度均有显著降低(P<0.05)；与模型组相比，舒丽启能组和联合组的各项指标有所升高，且联合组高于舒丽启能组，其组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论四磨汤辅助舒丽启能治疗结肠术后胃肠功能障碍利于提高ACH及NE水平，促进胃肠蠕动功能，其药理机制可能与胆碱能系统和肾上腺能系统有关。

[关键词]舒丽启能；四磨汤；结肠切除；胃肠功能障碍

受麻醉、创伤、镇痛等因素的影响，腹部手术后胃肠功能障碍是临床常见术后并发症之一[1]。结肠是人体消化系统的重要组成部分，有吸收、分泌、细菌消化及协助排便等多重功能，故而因结肠手术而导致的胃肠功能障碍更为常见。四磨汤是由木香、槟榔、乌药、积壳等组成的纯中药制剂，起源于宋代《济生方》，主司破滞降逆、补气扶正，秉承了传统中医“以通为要”的用药法则[2]。有研究[3]发现四磨汤对胃肠功能的恢复有良好的促进作用，可辅助西药治疗各种原因导致的消化不良，然而其药理机制尚未完全明确。本研究以结肠术后胃肠功能障碍小鼠为载体，探讨四磨汤辅助舒丽启能治疗结肠术后胃肠功能障碍的临床疗效和可能的药理机制，现报告如下。

1材料与方法

1.1实验材料

1.1.1动物和分组选取SPF级昆明种小鼠200只，体质量18.7～24.5 g，平均(22.3±0.42)g，均由湖南斯莱克景达实验动物公司提供。采用双盲法随机分为4组(各组50只)：空白组、模型组、舒丽启能组和联合组。

1.1.2仪器和试剂低温高速离心机(64R，Beckman)；分光光度计(UV-1900PC，Macylab Instruments Inc.)；电子分析天平(FA2004，上海雷韵试验仪器制造有限公司)；全自动放射免疫分析仪(ACS180，德国拜耳)；肌电图/诱发电位仪(NDI-092，海神)；甲基纤维素北京化学试剂有限公司)；酚酞(北京化学试剂有限公司)；小鼠ACH及NEELISA试剂盒(上海恒远生物科技有限公司)。

1.2实验方法

1.2.1模型制备和评价适应性喂养 3 d 后，空白组不做处理，取下腹部切口切除部分结肠，制备结肠术后胃肠功能障碍模型，缝合伤口后24 h行肌电图检查，评价模型制备结果。小鼠仰卧位，将记录电极插入腓肠肌，地极置于背部皮下，牵拉一侧后肢，记录运动单位电位的波幅(motor unit potential amplitude，MUPA)，将MUPA较空白组有显著变化者纳入本次试验。

1.2.2给药方法舒丽启能组：以马来酸曲美布汀片研磨成粉状物，溶解于蒸馏水灌胃。本实验所用舒丽启能由天津田边制药有限公司提供，人体给药量为0.01 g·d-1·kg-1，小鼠按人体给药量的8倍剂量，即0.08 g·d-1·kg-1。联合组：将马来酸曲美布汀粉末和四磨汤口服液同时溶解于蒸馏水灌胃。本实验所用四磨汤由湖南汉森药业有限公司提供，人体给药量为1 mL·d-1·kg-1，小鼠按人体给药量的8倍剂量，即8 mL·d-1·kg-1。空白组和模型组均灌以等体积的无菌蒸馏水，7 d后再次检测MUPA，并进行其他指标测定。

1.2.3胃排空率和小肠推进率的测定各组取32只小鼠，分半进行胃排空实验和小肠推进实验，剩余小鼠取腹腔静脉血，进行血清学测定。①胃排空率：禁食12 h，灌胃1 h后灌以0.2 mL甲基纤维素酚红溶液，15 min后处死取胃。胃组织称重、剪碎，按1 ∶9的比例浸泡于NaOH溶液(0.1 mol·L-1)，每隔20 min震荡摇匀1次。1 h 后取上清液500 μL转移于EP管，加入20%三氯醋酸50 μL，4 000 rpm，离心10 min，取上清液100 μL，加入NaOH溶液(0.5 mol·L-1)400 μL显色。采用分光光度计测定光密度(λ=560 nm)，计算吸收值A。胃排空率=(1-A实验/A对照)×100%。②小肠推进率：禁食24 h，灌胃30 min后按体质量0.03 mL·g-1灌以50%的墨汁，30 min 后处死开腹，分离肠系膜，结扎并剪取幽门及回盲部肠管，测量其总长度(L0)及墨汁推进长度(L)。墨汁推进率=L/L0×100%

1.2.4血清学指标的测定禁食12 h，自由饮水，0.5%的戊巴比妥钠，腹腔麻醉。麻醉完全后，取腹腔静脉血，常温静置40 min后4 000 rpm，离心10 min获得血清，以ELISA试剂盒和全自动放射免疫分析仪测定ACH和NE的浓度。

1.3统计学方法

2结果

2.1MUPA测定结果

模型、舒丽启能及联合组分别成功制备结肠术后胃肠功能障碍小鼠模型44只、46只、46只。给药前，较空白组相比，各组MUPA均有明显降低(P<0.05)，且3组之间无统计学差异(P>0.05)；给药后，舒丽启能组MUPA显著高于模型组，联合组MUPA显著高于舒丽启能组(P<0.05)，见表1。

表1　给药前后各组小鼠MUPA对比

*：与空白组比较，P<0.05；#：与模型组比较，P<0.05；Δ：与舒丽启能组比较，P<0.05.

2.2胃排空率和小肠推进率测定结果

与空白组相比，各组的胃排空率及小肠推进率均有显著降低(P<0.05)；与模型组相比，舒丽启能组和联合组胃排空率及小肠推进率有所升高，且联合组高于舒丽启能组，其组间差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2　各组小鼠胃排空率和小肠推进率对比

*：与空白组比较，P<0.05；#：与模型组比较，P<0.05；Δ：与舒丽启能组比较，P<0.05

2.3给药后血清ACH和NE测定结果

与空白组相比，各组小鼠的血清ACH和NE浓度均有显著降低(P<0.05)；与模型组相比，舒丽启能组和联合组的血清ACH和NE浓度有所升高，且联合组高于舒丽启能组，其组间差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3　各组小鼠血清ACH和NE浓度对比

*：与空白组比较，P<0.05；#：与模型组比较，P<0.05；Δ：与舒丽启能组比较，P<0.05

3讨论

中医学理论认为，六腑的主要生理功能是“泻而不藏”、“以通为用”。术后胃肠功能障碍的根本原因在于腑气不通，属于气滞证，接近“腹痛”、“痞满”等范畴[4]。四磨汤由沉香、槟榔、乌药、人参4味中药组成，其中沉香善行脾胃滞气、兼具止痛之效，槟榔可杀虫消积，乌药温中散寒、理气止痛，而人参补益中气，诸药合用，行气而不耗气，有邪正兼顾之妙。作为临床胃肠功能性疾病的常规用药之一，舒丽启能对胃肠蠕动功能的改善效能已得到医学界广泛认可。四磨汤在消化系统疾病的治疗中亦取得了一定成效，然而因其药理学机制尚未完全明确，临床应用范围受到一定的限制。

本研究采用结肠部分切除法制备胃肠功能障碍小鼠模型，并以肌电图做模型评价指标。与常规指标相比，肌电图具有更高的精确性和客观性，有效防止了主观性判断带来的误差。切除部分结肠后，各组小鼠的MUPA均显著降低，肠运动功能发生障碍，说明该模型制备成功。为初步衡量四磨汤联合舒丽启能的干预效果，本研究对各组小鼠的胃排空功能和小肠推进功能做对比分析，结果发现模型组的胃排空率和小肠推进率明显小于空白组，经药物干预，两项指标有所回升，且联合干预组的回升程度明显优于舒丽启能单一干预组。该结果说明四磨汤亦能够促进胃肠蠕动功能，且与舒丽启能联用时，可发挥协同作用，加强疗效。以往亦有研究指出四磨汤对各种原因所致的胃肠功能障碍有良好的促进作用，并对其药理机制做了初步探讨。蔺晓源和刘杰民等[5-6]认为四磨汤能够调整肿瘤患者术后血清胆囊收缩素、胃动素及瘦素水平，从而促进术后胃肠功能恢复。蔡光先等[7]发现四磨汤对慢性应激小鼠脑内神经降压素和降钙素基因相关肽表达有调节作用，可能通过中枢调节胃肠运动功能。邓娜等[8]研究证实慢性应激所致功能性消化不良小鼠的血清促生长素较正常鼠偏低，一氧化氮与瘦素较正常鼠偏高，四磨汤单药及组方对该病理特征均有逆转效果。陈其城等[9]指出，四磨汤能够通过能兴奋胆碱 M3受体而起到兴奋胃肠道平滑肌的作用。可见，四磨汤对胃肠功能的恢复确实有促进作用，且其药理机制复杂，涉及到多个生理系统。

胃肠道调控系统包括中枢、周围和肠神经系统(enteric nervous system，ENS)[10-11]。结肠术后胃肠功能障碍是多因素综合作用的结果，任一系统发生障碍均可影响胃肠功能。为进一步研究四磨汤治疗结肠术后胃肠功能障碍的药理机制，本研究对各组小鼠外周血ACH和NE做了定量研究，结果发现切除部分结肠后，小鼠的血清ACH和NE含量均有明显降低，药物干预可使其改善，且联合组的改善效果明显优于舒丽启能组，说明四磨汤能够提高小鼠外周血ACH和NE含量。ACH是ENS中最为主要的兴奋性递质，由肠平滑肌的运动神经元和分泌神经元分泌，在一定程度上可主导胃肠道功能[12-13]。孔文成等[14]认为，ENS胶质细胞是肠黏膜系统的重要屏障，对胃肠有重要保护作用。邱洪等[15]发现，通过对ACH调控可达到改善ENS功能的作用，从而缓解药物所致胃肠异常。NE属于人体兴奋性神经递质之一，由交感神经节后神经元和肾上腺能神经末梢共同分泌，具有正性肌力作用，可作用于肠系膜。本研究结果说明四磨汤对胃肠功能障碍小鼠的胆碱能系统和肾上腺能系统均有影响，可能为其发挥药理作用的重要机制之一。

综上所述，四磨汤对结肠切除小鼠的胃肠功能障碍有明显缓解作用，且其药理机制可能与胆碱能系统和肾上腺能系统有关，应作为本课题的后续工作，进行系统化研究。

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(编辑：左艳芳)

Effect compare of trimebutine maleate with and without Simo decoction to improve gastrointestinal function in the treatment of mice removed part of colon

MIU Xiang-lai(Department of Gastiontestinal Surgery,Puren Hospital of Wuhan City,Wuhan Hubei 430000,China)

Abstract:ObjectiveTo discuss the efficacy and pharmacological mechanism of Simo decoction to assist the treatment of postoperative gastrointestinal dysfunction.Methods200 mice (100 male and 100 female) were randomly divided into four groups (n=50).The mice of blank group were feed as normal,and the mice in the other three groups were prepared for colon postoperative gastrointestinal dysfunction model.Then,trimebutine maleate group were given trimebutine maleate while the combined group were given trimebutine maleate and simo decoction through gavage,and model group and blank group were given the same doses of distilled water.One week later,the abdominal venous blood of mice was extracted and serum levels of acetylcholine (ACH) and norepinephrine (NE) were detected using ELISA kit.At the samd time,the gastric emptying and intestinal propulsion experiment was carried on.ResultsAfter modeling,compared with blank group,MUPA of the rest three groups were significantly decreased (P<0.05),and there was no statistical difference between the rest three groups (P>0.05).After drug intervention,MUPA of trimebutine maleate group was significantly higher than that of model group,and MUPA of combined group was significantly higher than that of trimebutine maleate group (P<0.05).In addition,compared with blank group,the gastric emptying rate,intestinal propulsion rate,serum ACH concentration and NE concentration of the rest three groups were significantly lower (P<0.05).Compared with model group,each index of both trimebutine maleate group and combined group was increased,and combined group increased higher (P<0.05).ConclusionSimo decoction combined trimebutine maleate has high effect to improve the level of ACH and NE of postoperative gastrointestinal dysfunction mice,which benefit to promote gastrointestinal peristalsis and may be one of its pharmacological mechanisms.

Keywords:trimebutine maleate;simo decoction;colectomy;gastrointestinal dysfunction

[收稿日期]2014-12-03[修回日期] 2014-12-17

[基金项目]湖北科技攻关项目(20120034)

doi:10.11659/jjssx.10E014055

[中图分类号]R472.9+1

[文献标识码]A

[文章编号]1672-5042(2015)04-0400-04