张建波

(平山县人民医院外2科，河北 平山 050400)



nup88、Ataxin-3和PTEN在结直肠癌中表达关系的研究

张建波

(平山县人民医院外2科，河北 平山 050400)

摘要：目的检测核孔蛋白复合体蛋白88(nup88)、脊髓小脑共济失调症相关蛋白3(Ataxin-3)和第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因(PTEN)在结直肠癌中的表达特点，探讨三者的表达关系。方法选择2011年1~12月平山县人民医院外2科103例结直肠癌术后患者作为观察组，选择68例正常结肠黏膜作为对照组，采用免疫组织化学检测两组nup88、Ataxin-3和PTEN的表达，分析其相关性。结果观察组中nup88表达的阳性率显著高于对照组[71.8%(74/103)比20.6%(14/68)]，观察组中Ataxin-3和PTEN表达的阳性率显著低于对照组[35.0%(36/103)比82.4%(56/68)，19.4%(20/103)比73.5%(50/68)]，差异有统计学意义(P<0.05)。观察组中nup88、Ataxin-3和PTEN的表达在不同Dukes分期、有无淋巴结转移、是否有癌结节及脉管浸润间阳性率差异有统计学意义(P<0.05)；线性相关分析显示，观察组中nup88、Ataxin-3与PTEN的表达无相关性(P>0.05)。结论结直肠癌中nup88、Ataxin-3和PTEN异常表达，但是三者不具有协同作用，3种蛋白可能是通过各自的通路发挥促肿瘤进展的作用。

关键词：结直肠癌；核孔蛋白复合体蛋白88；脊髓小脑共济失调症相关蛋白3；第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因

结直肠癌临床常见，病变进展中多种蛋白出现变化。核孔蛋白复合体蛋白88(nuclear pore complex protein 88，nup88)作为核孔蛋白的重要成员，可加速肿瘤细胞增殖，并参与物质的转运，其对多种肿瘤有明显的促进作用，也对调节肿瘤的转移有重要影响[1]。脊髓小脑共济失调症相关蛋白3(spinal cord cerebellar ataxia syndrome related proteins-3,Ataxin-3)是一种多聚谷氨酰胺蛋白，是泛素-蛋白酶体途径中重要的去泛素化酶，在全身多种组织中表达。Ataxin-3的功能主要与细胞骨架形成、调控转录和细胞生长周期的调节有关[2]。第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphatase and tension homologue deletedon chromosome tem,PTEN)是抑癌基因，通过抑制细胞增殖和抑制肿瘤血管生成而发挥作用[3]。本实验应用免疫组织化学技术，检测结直肠癌中nup88、Ataxin-3和PTEN的表达，探讨三者的表达特点及表达关系。

1资料与方法

1.1一般资料收集2011年1~12月平山县人民医院外2科行结直肠癌根治手术的患者作为观察组，均经病理学确诊。共103例，其中男53例，女 50例，年龄54～78岁，平均(65±4)岁。其中结肠癌70例，直肠癌33例，高分化癌45例，中分化癌30例，低分化癌28例; Dukes分期A+B期63例，C+D期40例。另外选择68例结直肠癌根治手术患者作为对照组，距离肿瘤边缘>10 cm切端经病理证实为正常结肠黏膜组织，其中男34例，女34例，年龄55～75岁，平均(66±4)岁。两组性别、年龄等一般临床资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2nup88、Ataxin-3和PTEN蛋白检测将切除的组织制成厚度为4 μm的石蜡包埋切片，切片于50～60 ℃烘箱内烤片30～40 min 后待测，nup88(检测试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司，批号：101017)、Ataxin-3(检测试剂盒购自上海金标生物科技有限公司，批号：1011562)和PTEN(检测试剂盒购自上海美轩生物科技有限公司，批号：100772)均购自北京中杉金桥公司，蛋白的检测采用免疫组织化学法，应用二步法进行检测，均在病理科完成，由经验丰富的病理主管技师完成，严格质量控制。

1.3结果的判定标准nup88、Ataxin-3和PTEN以在细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性反应细胞，选择有代表性的染色集中的肿瘤细胞密集区进行判断(400倍)，计数10个视野，计算阳性细胞百分率，以阳性细胞≥25%为阳性，<25%为阴性[2-3]。

2结果

2.1两组 nup88、Ataxin-3和PTEN表达阳性率的比较观察组中nup88表达的阳性率显著高于对照组，Ataxin-3和PTEN表达的阳性率显著低于对照组(P<0.01)，见表1。

2.2观察组中nup88、Ataxin-3和PTEN阳性表达的病理特征观察组中nup88、Ataxin-3和PTEN的表达阳性率在不同肿瘤Dukes分期、有无淋巴结转移、是否有癌结节及脉管浸润间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)，见表2。

表1　nup88、Ataxin-3和PTEN在观察组与对照组中表达阳性率的比较　[例(%)]

nup88：复合体蛋白88；Ataxin-3:脊髓小脑共济失调症相关蛋白3；PTEN：张力蛋白同源等位基因；观察组：取癌组织组；对照组：取正常结肠黏膜组织组

表2　观察组中nup88、Ataxin-3和PTEN表达的阳性率在不同临床特征中的比较　[例(%)]

nup88:复合体蛋白88；Ataxin-3:脊髓小脑共济失调症相关蛋白3；PTEN：张力蛋白同源等位基因；观察组：取癌组织组

2.3观察组中nup88、Ataxin-3与PTEN表达的相关性经线性相关性分析显示，观察组中nup88、Ataxin-3与PTEN的表达无明显相关(r=-0.231，P=0.372；r=0.043，P=0.417)。

3讨论

泛素-蛋白酶体途径是细胞内重要的蛋白质调控方式，其主要构成成分包括泛素及启动酶和蛋白酶体系统，其在发挥作用时最重要的功能是降解需要精确调控的短半衰期蛋白和发生折叠异常的内质网，并通过启动酶系统活化泛素，进行有效的调控。Ataxin-3作为体内重要的去泛素化酶，其异常表达时使对泛素-蛋白酶体途径的平衡调节失调。Ataxin-3在体内高表达，其低表达对恶性肿瘤的发生和进展也有一定作用[4]。PTEN是第一个具有磷酸酯酶活性的肿瘤抑制基因[5]，其编码产物具有磷酸酶活性，能使细胞内第二信使磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸去磷酸化，负性调节磷脂肌醇3-激酶途径，使细胞凋亡和(或)抑制细胞周期进程，并诱导其停止在G1期，从而抑制细胞增殖[6]。Nup88是核孔复合物的一种，通过细胞核双膜形成水溶性通道，连接细胞核和细胞质并进行有效的物质交换，以保证细胞周期和细胞生长的进行[7-8]。相关研究显示，nup88在多种恶性肿瘤中高表达，并对肿瘤进展起重要作用[9-10]。

本研究采用免疫组织化学技术检测结直肠癌中nup88、Ataxin-3和PTEN的表达，结果显示，观察组中nup88表达的阳性率显著高于对照组，观察组中Ataxin-3和PTEN表达的阳性率显著低于对照组，提示3种蛋白异常表达是肿瘤发生的重要因素。观察组中nup88、Ataxin-3和PTEN的表达阳性率在不同Dukes分期、有关淋巴结转移、是否有癌结节及脉管浸润间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)，提示3种蛋白参与肿瘤的进展。nup88、Ataxin-3和PTEN异常表达时通过调解细胞因子、生长因子和连接蛋白，进而对生长因子的生物利用度进行有效调控，诱导细胞迁移，使肿瘤细胞具有侵袭性。由于Dukes分期、淋巴结转移、是否有癌结节及脉管浸润均为结直肠癌患者判断预后和生物学行为的重要指标，因此联合检测nup88、Ataxin-3和PTEN的表达可能与预后相关。是否有癌结节及脉管浸润均反映肿瘤的侵袭性生长能力，因此3种蛋白异常表达是肿瘤浸润性生长及播散的可能性标志物。线性相关分析显示，观察组中nup88、Ataxin-3和PTEN的表达无相关性，提示三者不具有相关性。因此3种蛋白对结直肠癌发生、发展过程中的作用，可能是通过各自的通路发挥作用的。

综上所述，结直肠癌中nup88、Ataxin-3和PTEN异常表达，但是三者不具有协同作用，3种蛋白可能是通过各自的通路发挥促肿瘤进展的作用。

参考文献

[1]田延锋,赵增仁,李芳,等.NUP88蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义[J].中国普通外科杂志,2012,21(11):1446-1448.

[2]曾丽霞,马韵,王超,等.胃癌中Ataxin-3表达及与临床病理学的意义[J].临床与实验病理学杂志,2013,29(7):726-728.

[3]李春雷,陈钟.NF-κB和PTEN蛋白在肝细胞肝癌中的表达及其意义[J].南通大学学报：医学版,2013,33(4):291-293.

[4]汤建光,沈璐,唐北沙,等.SUMO-1共价修饰ataxin-3[J].生物化学与生物物理进展,2006,33(11):1037-1043.

[5]李爱萍,夏晓伟,陈颜夙,等.PTEN基因在胃癌组织中的表达及其对患者预后的影响[J].中国肿瘤临床与康复,2013,20(6):562-564.

[6]赵林,修银铃,陈说,等.PTEN和AKT在乳腺癌中的表达及临床意义[J].中国肿瘤,2013,22(6):502-505.

[7]舒文秀,陈燕,何静,等.藤黄酸对急性白血病细胞U937增殖和凋亡的影响及对核孔蛋白Nup88的调控作用[J].中草药,2008,39(1):74-78.

[8]Knoess M,Kurz AK,Goreva O,etal.Nucleoporin 88 expression in hepatitis B and C virus-related liver diseases[J].World J Gastroenterol,2006,12(36):5870-5874.

[9]Brustmann H,Hager M.Nucleoporin 88 expression in normal and neoplastic squamous epithelia of the uterine cervix[J].Ann Diagn Pathol,2009,13(5):303-307.

[10]Schneider J,Martínez-Arribas F,Torrejón R.Nup88 expression is associated with myometrial invasion in endometrial carcinoma[J].Int J Gynecol Cancer,2010,20(5):804-808.

The Research of Nup88,Ataxin-3 and PTEN Expression Relations in Colorectal CancerZHANGJian-bo.(SurgeryDepartmentTwo,PingshanCountyPeople′sHospital,Pingshan050400,China)

Abstract：ObjectiveTo detect the expression characteristics of nuclear pore complex protein 88 (nup88), spinal cord ceredellar ataxia syndrome related proteins 3 (Ataxin-3) and phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN) in colorectal cancer,focusing on the expression relationships between them.MethodsA total of 103 postoperative patients with colorectal cancer were chosen in Pingshan county in Surgery Department Two of Pingshan County People′s Hospital from Jan.to Dec.2011 as observation group,and another 68 cases of normal colonic mucosa were included as control group，and nup88,Ataxin-3 and PTEN expression of the two groups were detected using immunohistochemical method,and the correlation was analyzed.Resultsnup88 expression in observation group was significantly higher than that in control group[71.8%(74/103) vs 20.6%(14/68)],Ataxin-3 and PTEN expression rate in observation group were significantly lower than those in the control group[35.0%(36/103) vs 82.4%(56/68)，19.4%(20/103) vs 73.5%(50/68)],the difference were statistically significant(P<0.05).The expression of nup88,Ataxin-3 and PTEN in observation group and Dukes staging,lymph node metastasis,whether to have carcinoma nodules and vascular invasion were closely related;linear correlation analysis showed nup88,Ataxin-3 in the observation group and the expression of PTEN had no relevance(P>0.05).ConclusionThe expression of nup88,Ataxin-3 and PTEN in colorectal cancer is abnormal,but no synergy of them is observed,so the three kinds of proteins may play the role of promoting tumor progression through their respective pathways.

Key words:Colorectal cancer; Nuclear pore complex protein 88; Spinal cord cerebellar ataxia syndrome related proteins-3; Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten

收稿日期：2014-10-08修回日期：2014-11-30编辑：相丹峰

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.14.070

中图分类号：R735

文献标识码：A

文章编号：1006-2084(2015)14-2674-03