陶 虹，耿文宁，陈雯雯，高晓黎

（1．新疆维吾尔自治区食品药品检验所，新疆 乌鲁木齐 830004； 2．新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830002）

黄体酮热熔胶透皮贴剂皮肤用药安全性研究

陶 虹1，2，耿文宁1，陈雯雯2，高晓黎2

（1．新疆维吾尔自治区食品药品检验所，新疆 乌鲁木齐 830004； 2．新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830002）

目的考察黄体酮热熔压敏胶透皮贴剂皮肤用药的安全性。方法通过对豚鼠的皮肤急性毒性试验、皮肤过敏性试验及家兔的皮肤刺激性试验，观察黄体酮热熔胶透皮贴剂对动物经皮肤用药的急性毒性、刺激性和敏感性。结果黄体酮热熔胶透皮贴剂对豚鼠的完整皮肤和破损皮肤均未引起急性毒性反应，对家兔皮肤未产生刺激作用，对豚鼠皮肤未产生致敏作用。结论黄体酮热熔胶透皮贴剂皮肤用药安全、无毒。

黄体酮；热熔胶透皮贴剂；急性毒性；皮肤刺激性；皮肤过敏性

黄体酮又名孕酮，为天然甾体激素，临床常用于口服避孕和各种妇科疾病，如调整子宫内膜增生[1]、功能性子宫出血、闭经、绝经期综合征、黄体功能不全和经前综合征等，还可用于激素替代疗法。其临床常用的剂型为注射液和口服制剂，注射剂为油溶剂，常造成注射部位的结节和疼痛，口服制剂则会发生肝首过效应和胃肠吸收。目前，已对黄体酮的缓释栓[2]、膜剂、凝胶剂[3]、阴道环[4]和经皮给药系统[5-6]等剂型进行了研究。贴剂作为经皮给药制剂，具有使用方便、避免肝首过效应、减少胃肠道不良反应等特点。热熔压敏胶是一种近年来发展迅速的压敏胶材料，用于制备多种药物贴剂[7-8]，与脂溶性药物相容性好。因此，笔者制备了黄体酮热熔压敏胶透皮贴剂（简称黄体酮热熔胶贴剂），并考察其动物皮肤用药的安全性，现报道如下。

1 材料与方法

1．1 药品、试剂与动物

黄体酮热熔胶贴剂（自制，批号为20140910）；空白热熔胶贴剂（自制，批号为K20140910）；2-巯基苯并噻唑（上海将来实业有限公司，批号为JL140419016）。健康家兔12只，雌雄各半，体重（2．5±0．5）kg；健康豚鼠66只，雌雄各半，体重（250±50）g。均购自新疆医科大学实验动物部，许可证号SCXK(新)2011-0004。

1．2 方法

1．2．1 贴剂制备

精密称取适量SIS热塑性弹性体、增塑剂、增粘剂、抗氧剂，置三颈瓶中，氮气保护下加热至160～165℃，以300 r／min的转速搅拌30 min，观察体系各成分完全熔融并混合均匀、无块状物质后停止搅拌，调整温度为 110～120℃，保温 30 min后趁热出料，冷却后即得热熔胶基质。制备贴剂时，将上述基质保温30 min后趁热出料，在离型纸上涂布成均匀薄层，冷却后覆盖无纺布，剪裁成固定尺寸，即为黄体酮热熔胶贴剂。

1．2．2 安全性试验

皮肤急性毒性试验：取健康豚鼠36只，雌雄各半，分为9组，各4只。给药前24 h，用剃毛器将豚鼠背部脊柱两侧毛除净，面积约5 cm×5 cm，给药前检查剃毛部位皮肤，受伤的皮肤不能做完整皮肤的毒性试验。破损皮肤的制作是用砂纸在剃毛皮肤处来回擦拭，以皮肤轻微渗血为度[9]。给药时将贴剂贴敷于剃毛部位，用无菌纱布缠绕后用胶布固定，每只豚鼠分笼饲养。给药24 h后，揭去贴剂，并于揭除后1，24，48，72 h至第7天，每天观察并记录动物的体重、皮毛、眼睛、黏膜、呼吸、饮食、大小便、自主活动和行为改变等指标，如出现毒性反应，需观察其出现和消失的情况。若有动物死亡，及时行尸检和肉眼观察，当有肉眼可见病变时，行病理组织学检查。

单次给药皮肤刺激性试验:取健康家兔8只，随机分为完整皮肤组和破损皮肤组，各4只。采用同体左右自身对比法。试验前24 h将家兔背部脊柱两侧剃毛，面积约100 cm2。破损皮肤组在左侧剃毛皮肤处用砂纸来回擦拭，以皮肤轻微渗血为度。给药时，将3 cm×4 cm药物贴剂贴敷在两组左侧剃毛部位，将基质贴剂贴敷在右侧作为阴性对照区，在保定架保定，保持6 h后揭去贴片，并于揭除后 1，24，48，72 h时肉眼观察给药部位有无红斑、水肿等情况。给药前检查去毛皮肤是否有机械损伤，有损伤者不宜行完整皮肤的刺激试验。结果按表1和表2评价。

多次给药皮肤刺激性试验：取健康家兔4只，试验前24 h将家兔背部脊柱两侧剃毛，面积约100 cm2。给药时，将药物贴剂贴敷在左侧剃毛部位，将基质贴剂贴敷在右侧作为阴性对照区。在保定架保定，保持6 h后揭除贴剂，并于每次揭除后1 h和再次贴敷前肉眼观察并记录贴敷部位有无红斑和水肿，贴敷部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况及发生时间和消退时间，并对红斑和水肿进行评分。连续贴敷1周，于末次贴敷后，在揭除贴片后1，24，48，72 h肉眼观察并记录贴敷部位有无红斑和水肿等情况。贴敷前检查剃毛部位的皮肤是否有机械损伤，有损伤者不用于试验。结果按表1和表2评价。

表1 皮肤刺激反应评分标准

表2 皮肤刺激强度评价标准

皮肤过敏性试验：采用豚鼠 Buehler试验(BT)。取健康豚鼠30只，随机分为 3组，各 10只。试药组给予黄体酮热熔胶贴剂；基质组给予基质贴剂；阳性对照组给予2-巯基苯并噻唑溶液。于给药前24 h将豚鼠背部两侧毛剃除，去毛区范围每侧约5 cm×5 cm。致敏接触时，取2 cm×2 cm药物贴剂贴敷于动物左侧脱毛区，用无菌纱布覆盖并用胶布固定，每只动物分笼饲养，持续6 h，揭除贴片；空白对照组贴敷2 cm×2 cm基质贴剂，阳性对照组在左侧剃毛部位约2 cm×2 cm面积涂抹0．3 mL 1%2-巯基苯并噻唑溶液，6 h后用温水擦去残留药物。第7天和第14天，以同样方法各重复1次。激发接触时，于末次给药致敏后14 d，将2 cm×2 cm药物贴剂和基质贴剂分别贴敷于试药组和基质组的豚鼠背部右侧剃毛区，6 h后揭除贴剂，即刻观察，于1，24，48，72 h再次观察豚鼠皮肤过敏反应情况；阳性药对照组在剃毛部位约2 cm×2 cm面积涂抹0．3 mL 0．1%2-巯基苯并噻唑溶液，6 h后用温水擦去残留药物。结果按表3和表4进行评分并作致敏强度评价。同时，注意观察豚鼠是否有哮喘、站立不稳等全身性过敏反应。反应平均分值=（红斑形成总分+水肿形成总分）／动物数，致敏反应发生率=有过敏反应动物数／动物总数×100%。

表3 皮肤致敏反应评分标准

表4 皮肤致敏强度评分标准

1．3 统计学处理

2 结果

2．1 皮肤急性毒性试验

结果见表5。揭除贴剂后1，24，48，72 h至第7天，与正常组比较，其余各组豚鼠的皮毛、眼睛、黏膜、呼吸、饮食、大小便、自主活动、行为等指标均未发现明显变化(P＞0．05)，未见中毒、死亡情况，各组间豚鼠净增重差异无统计学意义(P＞0．05)。可见，高、中、低剂量组的黄体酮热熔胶贴剂经豚鼠皮肤给药均未发现皮肤急性毒性反应。

表5 黄体酮热熔胶贴剂皮肤急性毒性试验结果（，n=4）

表5 黄体酮热熔胶贴剂皮肤急性毒性试验结果（，n=4）

剂量(mg)体重(g)组别正常组完整皮 基质肤组 低剂量中剂量高剂量破损皮 基质肤组 低剂量中剂量高剂量0 0．5 1．0 2．0 0 0．5 1．0 2．0给药前248．85±8．06 254．40±8．51 255．94±14．19 247．98±10．65 256．47±5．33 244．06±9．70 245．61±9．44 252．56±12．49 248．38±8．72给药后7 d 271．87±9．35 276．23±9．02 277．66±13．50 271．27±9．51 276．94±5．76 265．99±10．78 268．37±8．07 274．15±13．33 271．95±10．82净增23．02±1．49 21．83±1．09 21．72±2．47 23．30±2．16 20．47±0．46 21．99±2．02 22．76±1．37 21．59±1．30 23．57±2．76

2．2 皮肤刺激性试验

黄体酮热熔胶贴剂对家兔皮肤单次给药后，1，24，48，72 h至第7天观察，完整皮肤组家兔皮肤均未出现水肿和红斑现象，贴敷部位未发现色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况，表现为无刺激；破损皮肤组个别动物有勉强可见的红斑，很快自行消失，皮肤刺激程度平均反应值为0．25，无刺激性。多次给药组最后一次给药后观察1，24，48，72 h至第7天，个别动物偶有勉强可见的红斑，很快自行消失；贴敷部位未发现色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况，皮肤刺激程度平均反应值为0．25，无刺激性。结果见表6。

表6 家兔多次给药皮肤刺激反应评分结果（n=4）

2．3 皮肤过敏性试验

基质组未见红斑、水肿等皮肤变态反应情况；试药组极个别豚鼠出现勉强可见的水肿和红斑，很快自行消失；阳性对照组出现明显的红斑、水肿等皮肤变态反应情况，评分值高，致敏率达100%。3组豚鼠均未出现哮喘、站立不稳等严重的全身变态反应。结果表明，黄体酮热熔胶透皮贴剂及基质对豚鼠皮肤基本无致敏反应。结果见表7。

3 讨论

姚 等[10]对以热熔压敏胶和橡胶为基质的两种关节止痛膏的药物体外透皮特性、药效以及皮肤刺激性进行了比较，发现前者有更好的药物体外透皮特性和更强的镇痛抗炎效果，对皮肤的刺激性也小。黄体酮热熔胶透皮贴剂使用方便，以无纺布为背衬材料，透气性好；以热熔压敏胶为药物骨架，缓慢释放药物，作用持久，是除肌肉注射和口服外补充孕激素的另一条途径。

皮肤急性毒性、皮肤刺激性及皮肤过敏性试验是药物临床前安全性评价的重要组成部分。本试验结果表明，黄体酮热熔胶透皮贴剂用于豚鼠完整皮肤和破损皮肤均无急性毒性，外用于家兔完整皮肤和破损皮肤均无刺激性，不引起豚鼠完整皮肤的致敏反应。因此，在本试验中所用的剂量范围内黄体酮热熔胶透皮贴剂对动物皮肤无急性毒性、无刺激性、无致敏性，使用安全。

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Enepidermic Reliability of Progesterone Hot-Melt Adhesive Transdermal Patch

Tao Hong1,2,Geng Wenning1,Chen Wenwen2,Gao Xiaoli2
(1．Xinjiang Uygur Autonomous Region Institute for Food and Drug Control,Wulumuqi,Xinjiang,China 830004; 2．Department of Pharmacy,Xinjiang Medical University,Wulumuqi,Xinjiang,China 830002)

Objective To investigate the safety of progesterone hot-melt pressure sensitive adhesive transdermal patch through the skin．Methods The aim of this research was to survey acute toxicity,irritation and hypersensitivity of progesterone hot-melt adhesive transdermal patch on animal skin through skin acute toxicity,skin hypersensitivity in healthy guinea pigs,and skin irritation test in healthy rabbits．Results The result showed that the progesterone hot-melt adhesive transdermal patch had no acute toxicity on integrated and worn skin of guinea pigs,it had no irritation on integrated and worn skin of rabbits,and it had no hypersensitivity on skin of guinea pigs．Conclusion The experiment indicated that it is safe to administrate the progesterone hot-melt adhesive transdermal patch via skin．

progesterone;hot-melt adhesive transdermal patch;acute toxicity;skin irritation;skin hypersensitivity

R965.3；R984

A

1006-4931(2015)21-0076-03

陶虹（1975-），女，汉族，重庆人，在读博士研究生，副主任药师，主要从事新药研究工作，（电子信箱）taohong950＠163．com；高晓黎，女，教授，博士生导师，研究方向为药剂学，本文通讯作者，（电子信箱）xli_g＠126．com。

2015-01-27)