裴瑞芳，刘英，刘柏林，张宁，司怀军*，王蒂*

(1.甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室，甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点实验室培育基地，

甘肃 兰州 730070；2.甘肃农业大学生命科学技术学院，甘肃 兰州 730070)

马铃薯ARF基因RNAi载体的遗传转化及对其试管薯生理特性的影响

裴瑞芳1,2，刘英1,2，刘柏林1，张宁2，司怀军1,2*，王蒂1*

(1.甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室，甘肃省干旱生境作物学省部共建国家重点实验室培育基地，

甘肃 兰州 730070；2.甘肃农业大学生命科学技术学院，甘肃 兰州 730070)

摘要：用含有ADP核糖基化因子(ARF)基因的干扰载体的农杆菌转化马铃薯栽培品种“甘农薯2号”，获得转化植株48株，经卡那霉素抗性筛选和PCR检测证明ARF基因已成功整合到马铃薯基因组中。用实时荧光定量PCR检测表明，转化植株中ARF基因的表达较对照均有不同程度的下降，在转基因株系Z-11和Z-12中，ARF基因表达的干扰程度分别高达92.53%和93.22%。对转基因植株诱导的试管薯的淀粉、可溶性糖、蛋白质、蔗糖和葡萄糖含量测定结果表明，与未转基因的对照相比，转基因植株的淀粉含量提高了4.29%~34.27%，蛋白质含量提高了1.47%～7.35%，可溶性糖含量提高了1.44%~17.39%；蔗糖含量提高了11.53%~53.84%，而葡萄糖含量降低了6.06%~21.21%。

关键词：马铃薯；ARF基因；干扰载体；转基因植株；生理指标

ADP核糖基化因子(ADP-ribosylation factor，ARF)是Ras基因超家族的成员，它们是大小约20 kDa的鸟嘌呤核苷酸结合蛋白，属于小G蛋白超家族中的ARF亚家族[1-2]。ARF作为霍乱毒素催化GS蛋白ADP核糖基化反应的辅助因子，于1982年被Kahn和Gilman最早发现并纯化出该类细胞因子，将其命名为ARF。……