补体C3a促进人视网膜色素上皮细胞分泌血管内皮生长因子的研究
2015-02-13阳雪曹晓光龙琴
阳雪,曹晓光,龙琴
(1.中国医学科学院北京协和医院眼科,北京 100073;2.北京大学人民医院眼科,北京 100044)
补体C3a促进人视网膜色素上皮细胞分泌血管内皮生长因子的研究
阳雪1,曹晓光2,龙琴1
(1.中国医学科学院北京协和医院眼科,北京 100073;2.北京大学人民医院眼科,北京 100044)
目的观察补体活化产物C3a对体外培养的人视网膜色素上皮细胞(RPE)分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,测定浓度0.1 μmol/L和0.3 μmol/L的重组人C3a干预RPE细胞24、48、72 h后VEGF蛋白和mRNA表达水平。结果0.1 μmol/L的C3a干预RPE细胞72 h后,VEGF蛋白表达高于干预48 h和24 h的水平,差异均有统计学意义(P<0.05);0.3 μmol/L的C3a作用RPE细胞24、48、72 h后,VEGF蛋白表达组间差异均有统计学意义(P<0.01),具有正性时间—效应关系;0.1 μmol/L的C3a作用RPE细胞72 h后,VEGF mRNA表达高于48 h和24 h,差异有统计学意义(P<0.05);0.3 μmol/L的C3a作用RPE细胞72 h后,VEGF mRNA表达高于48 h和24 h,差异有统计学意义(P<0.01);0.3 μmol/L的C3a作用72 h时VEGF的蛋白表达量高于0.1 μmol/L的C3a,差异有统计学意义(P<0.01);0.3 μmol/L的C3a作用24 h时VEGF mRNA表达量高于0.1 μmol/L的C3a,差异有统计学意义(P<0.01)。结论C3a可促进人RPE细胞VEGF的分泌,高浓度C3a对VEGF分泌的促进作用早于低浓度C3a,提示补体活化程度越强,对新生血管的促进作用则越迅速。
人视网膜色素上皮细胞;补体C3a;血管内皮生长因子
近年来,补体在脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)发生过程中的作用受到越来越多的关注[1,2]。补体系统活化所产生的多种裂解片段,尤其是C3a,与靶细胞表面受体结合,释放炎性介质和细胞因子,成为补体依赖性反应的中心环节。研究表明,在年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)患者的玻璃膜疣和小鼠CNV模型局部均可见C3a表达显著升高[3,4],抑制C3a或C3a受体功能则可减轻动物模型中CNV的发生[4]。……
