王 艺，张 玲，周家璇

(云南中医学院，云南 昆明 650021)

咽炎消合剂对慢性咽炎大鼠咽黏膜修复作用的研究

王 艺，张 玲，周家璇

(云南中医学院，云南 昆明 650021)

目的 研究咽炎消合剂对慢性咽炎大鼠黏膜修复的作用及其机制。方法 将48只Wistar大鼠随机分为咽炎消合剂低剂量组、咽炎消合剂高剂量组、阳性药物组、抗生素组、模型组、空白对照组，每组8只。除空白对照组外，其余组采用5%氨水喷咽部制作慢性咽炎模型。造模成功后，咽炎消合剂低剂量和高剂量组分别给予咽炎消合剂1 mL/d和2 mL/d灌胃，阳性药物组给予慢咽舒柠片溶解后1 mL/d灌胃，抗生素组给予阿莫西林胶囊溶解后1 mL/d灌胃。20 d后取各组咽部黏膜及其下组织进行病理切片观察。结果 治疗10 d后，咽炎消合剂高、低剂量组及阳性药物组动物的一般状态好转，以咽炎消合剂高、低剂量组更明显；咽炎消合剂低、高剂量组局部症状明显好转，摄食率降低等症状也随之消失，而阳性药物组的摄食率降低、骚动不安症状改善不明显；额镜观察其咽部组织基本接近正常，部分动物虽还有轻度的慢性充血，但其咽部黏膜颜色较润泽。给药20 d后，咽炎消合剂低剂量和高剂量组咽黏膜组织病理表现接近空白对照组，咽炎消合剂高剂量组黏膜上皮增生不明显， 无炎细胞浸润，固有膜改变不大，肌层纤维近于排列规则，接近于空白对照组的黏膜形态。而抗生素组病理改变不大与模型组组织变化相近。结论 咽炎消合剂通过抗炎、减轻炎性渗出、抑制组织增生等多环节发挥作用，疗效显著，证明了慢性咽炎脾胃学说理论的正确性。

咽炎消合剂；慢性咽炎；动物模型；咽黏膜

慢性咽炎是一种发病率高且宜迁延不愈的疾病，近年来由于生活节奏加快，社会压力增大，加上生活环境日益恶化，该病的发病率逐渐升高[1]。该病致病因素较多，难以确切把握，发病机制亦无明确的定论，因此临床无统一的治疗方案和疗效判断标准[2]。咽炎消合剂是由云南中医学院第一附属医院耳鼻喉科专家周家璇教授根据慢性咽炎的中医脾胃理论开发的中药复方制剂，临床使用已有十余年，前期研究证明其临床疗效佳，不良反应少[3]。本研究建立慢性咽炎大鼠模型，观察咽炎消合剂对损伤的咽黏膜组织的修复作用，为该合剂临床应用提供理论依据。

1 实验资料

1.1 实验动物 选用10 周左右健康雄性Wistar大鼠，体质量(210±20)g，SPD级别，全价颗粒饲料饲养。

1.2 药品、试剂和仪器 咽炎消合剂 (院内中药复方制剂，由人参、白术、茯苓、浙贝、僵蚕、法夏、厚朴、桔梗、葛根等组成)， 慢咽舒柠片(桂龙药业有限公司生产，批号：201302132，由玄参、麦冬、甘草、桔梗、生地、板蓝根、薄荷、胖大海等组成)；阿莫西林胶囊(广州白云山制药股份有限公司生产，批号：201312031)。5%氨水 (天津化学试剂制品厂，批号：201211193) 500 mL瓶装。喉头喷雾器(金喉健喷雾剂10 mL药瓶)，透射电镜及多用光学显微镜(云南省中医院病理科提供)，医用冷光源额镜，压舌板，自制开口器等。

1.3 方法

1.3.1 实验动物分组 将48只Wistar大鼠随机分为咽炎消合剂低剂量组、咽炎消合剂高剂量组、阳性药物组、抗生素组、模型组、空白对照组，每组8只。

1.3.2 造模及实验方法 除空白对照组外，其余组用5%氨水喷大鼠咽部2次,每次用喷雾器喷2揿，8 h 1次,连续21 d，空白对照组咽部喷等量蒸馏水，从第22天开始,停止上述造模因素,自然条件饲养观察。造模成功后即开始药物干预(空白对照组和模型组除外)，给药剂量采用临床成人用量与动物体型系数计算法换算成大鼠灌胃的等效剂量，常温下灌胃。咽炎消合剂低剂量组每只灌咽炎消合剂药液1 mL/d(含生药量2.0 g/mL)；咽炎消合剂高剂量组每只灌咽炎消合剂药液2 mL/d(含生药量2.0 g/mL)；空白对照组用生理盐水 2 mL灌胃；阳性药物组每只灌慢咽舒柠片药液1 mL/d(0.5 g/kg用与咽炎消合剂高剂量组等容的蒸馏水溶化)；抗生素组每只灌阿莫西林胶囊药液1 mL/d(50 mg/只)。

1.4 观察指标 每天观察记录各组动物外观及活动状态；动物咽部情况,包括黏膜形态和色泽、口腔分泌物。灌胃给药20 d后，股动脉放血处死动物后立即取下咽部黏膜及其下组织做切片以供观察咽部组织黏膜层、肌层、骨骼肌层有无上皮增生，有无炎细胞浸润，有无血管扩张充血，有无纤维增生，有无钉突延长以及变化的程度。

1.5 统计学方法 采用SPSS 17.0软件进行数据的统计分析。计数资料采用2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 一般观察 造模第5天后大鼠出现搔抓口部，饮水频率增加，口腔分泌物增多，喷氨水20 min后可出现类似人类哮喘声，后期口腔分泌物逐渐减少，纳食减少，动物骚动不安，造模10 d后尤为明显。用额镜观察其咽部呈慢性充血，黏膜暗红色而干燥、光泽度欠佳。治疗10 d后，咽炎消合剂高、低剂量及阳性药物组动物的一般状态好转，以咽炎消合剂高、低剂量组更明显；咽炎消合剂低、高剂量组局部症状明显好转，摄食率降低等症状也随之消失，而阳性药物组的摄食率降低、骚动不安症状改善不明显；额镜观察其咽部组织基本接近正常，部分动物虽还有轻度的慢性充血，但其咽部黏膜颜色较润泽。空白对照组体征无明显变化。模型组、抗生素组动物症状体征无明显变化。

2.2 咽部黏膜及其下组织切片的病理形态学和结构观察 模型组的病理特征主要为上皮增生，钉突延长，咽黏膜慢性充血，其周围有较多淋巴细胞浸润，黏膜下结缔组织及淋巴组织增生，重者形成咽后壁颗粒状隆起，黏液腺肥大，分泌亢进，见图1。咽炎消合剂高剂量组黏膜上皮增生不明显， 无炎细胞浸润，固有膜改变不大，肌层纤维近于排列规则，接近于空白对照组的黏膜形态，见图2。而抗生素组病理改变不大与模型组组织变化相近，见图3。各组组织切片的病理形态学和结构分析结果见表1。

图1 模型组病理表现(40×)

图2 咽炎消合剂高剂量组病理表现(40×)

3 讨 论

慢性咽炎为咽部黏膜、黏膜下及淋巴组织的慢性弥漫性炎症，是上呼吸道慢性炎症的一部分。慢性咽炎常由急性咽炎反复发作而成，或由烟酒过度、嗜食辛辣、粉尘、长期张口呼吸等使咽局部长期受刺激所导致。根据此诱因，选用氨水在咽部长期喷雾的方法制作动物模型[4]。氨水是碱性化学物质，局部喷雾能刺激咽部黏膜，使之充血肿胀，反复刺激能使黏膜逐渐转化形成慢性炎症从而形成黏膜损伤，这符合慢性咽炎的发病因素。本课题预实验用此法造模的第3天，大鼠就开始逐渐出现搔抓口部，饮水次数增加而量不多，口腔分泌物增多，咽部充血、微肿胀等体征，造模后10 d较为明显，咽黏膜甚至出现了局部斑点状溃疡面，与《中药新药治疗慢性咽炎的临床研究指导原则》中的诊断标准相近，符合慢性咽炎动物模型的生物学特征[5-6]。

图3 抗生素组病理表现(40×)

在我国，随着生活环境的恶化以及工作生活压力变大，近年来该病的发病率有呈上升趋势，世界卫生组织已将其列入亚健康状态的范畴。该病给患者工作、生活、精神及经济上带来了一定的负担，严重影响了身心健康。治疗上，多用抗感染、抗过敏方法对症治疗，许多患者甚至自行服用抗生素，长期使用导致耐药，口腔、胃肠道菌群紊乱，使上呼吸道、消化道功能失常，最终造成咽黏膜损伤[7]。本实验证明抗生素对慢性咽炎大鼠模型的咽部黏膜无任何改善作用。

表1 各组咽部黏膜组织病理形态学和结构分析 只

注：①与空白对照组比较，P<0.01;②与模型组比较，P<0.01；③与抗生素组比较，P<0.01。

中医药辨证论治慢性咽炎具有一定优势，具有免疫调节和抗炎的作用[8]。中医认为慢性咽炎的病因病机为虚火灼咽、肝郁气滞、痰湿瘀阻、脾胃虚弱，其中肝郁气滞、脾胃虚弱是最主要的病机。咽炎消合剂即根据健脾益气、疏肝理气的思想开发研制而成，该合剂由柴胡、厚朴、茯苓、白术、山药、法夏、生地、地骨皮、知母、桔梗、葛根等组成。柴胡、厚朴、为君药，以疏肝理气、行气散结；茯苓、白术、山药为臣，健脾益气，脾气充足可布津于咽上；法夏、生地、地骨皮、知母为佐药，清热化痰生津；辅以桔梗、葛根生津而利咽。其中法夏、厚朴还有降逆和胃之功效[9]。

本研究结果显示，给药后咽炎消合剂高、低剂量组的复层鳞状上皮、结缔组织趋于正常，炎性细胞基本消失，由此可推测，咽炎消合剂的清热利咽、健脾益气功效在动物模型上反映为控制和消除局部炎症症状，对咽黏膜具有明显的修复作用，对脾胃功能也具有调节作用[10]。本研究证明了健脾利咽的治疗指导思想的正确性，为咽炎消合剂临床应用提供了理论基础，具有重要临床应用价值。

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Study on the repairment of Yanyanxiao mixture in pharyngeal mucosa of rats with chronic pharyngitis

WANG Yi, ZHANG Ling, ZHOU Jiaxuan

(Yunnan Uinversity of TCM, Kunming 650021, Yunnan, China)

Objective It is to observe the repairment effect of Yanyanxiao mixture (YYX) in pharyngeal mucosa of rats with chronic pharyngitis and its mechanism.Methods 48 Wistar rats were randomly divided into YYX low-dose group, YYX high-dose group, positive drug group (Manyanshuning), antibiotic group (amoxicillin), model group and black control group, 8 cases in each.Except to the blank control group, all the other groups were received 5% ammonia for spraying in pharyngeal.After successful?animal model establishment, the rats were fed with YYX 1 mL/d and 2 mL/d orally in YYX low-dose group and YYX high-dose groups, and was given tablets dissolve Manyanshuning 1mL/d orally in the positive drug group, and was given amoxicillin liquid 1mL/d orally in antibiotic group.20 days later, the pathology of pharyngeal mucosa tissue in each group was observed.Results 10 days after treatment, the general state of the animals in YYX high-dose group, low dose group and positive drug group were improved, and were better in YYX high-dose and low-dose groups.In YYX low-dose and high-dose group, the local symptoms were improved significantly, the symptoms of reduced feeding rate were disappeared, and the feeding rate was reduced and the restlessness symptoms had no improved in positive drug group.Observation of frontal mirror showed that the pharyngeal tissue was closed to the normal animal, although parted of mild chronic congestion, but mucosal showed ruddy color.After 20 days of treatment, YYX high-dose group and low-dose group and pathological manifestations of mucosal tissue was closed to the black control group, epithelial hyperplasia was not obvious, and no inflammatory cell infiltration, inherent film changed little, muscle fibers arranged more rules, these were closed to the blank control group.While the pathology change of antibiotics group was not big, and it was approximate to the model group.Conclusion YYX achieve a significant effect on chronic pharyngitis by anti-inflammatory, reducing inflammatory exudation, inhibiting hyperplastic tissue and many other ways, it is proved the correctness of the theory of the spleen and stomach.

Yanyanxiao mixture; chronic pharyngitis; animal model; pharyngeal mucosa

王艺，男，医学博士，讲师，研究方向为中西医结合临床耳鼻喉科。

张玲，E-mail:zhanglin800323@sina.com

云南中医学院科学研究基金项目(xk201308)

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.15.002

R-332

A

1008-8849(2015)15-1600-03

2014-10-30