吴程雨, 叶 飘, 杨孝婷, 徐叶倩, 巩孝磊, 唐琦清, 赵辅昆, 潘建义, 陈 玮

(浙江理工大学生命科学学院, 杭州 310018)

固定化地衣芽孢杆菌胞外脂肪酶的制备

吴程雨, 叶 飘, 杨孝婷, 徐叶倩, 巩孝磊, 唐琦清, 赵辅昆, 潘建义, 陈 玮

(浙江理工大学生命科学学院, 杭州 310018)

脂肪酶是一类重要的水解酶,广泛应用于食品、医药、化工等领域。脂肪酶通过固定化可以提高酶的使用效率。文章采用戊二醛共价连接法将来源于地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)的胞外脂肪酶固定于氨基型载体ZH-HA之上,将1 g载体置入10 mL酶液中反应3 h后固定化酶活力达到最高为60 U/g湿载体。经固定化后该酶的温度稳定性得到显著提升,当反应温度为45℃时最高酶活力达到220 U/g湿载体。同时,固定化使酶在碱性条件下的稳定性得到提高,最适反应pH值为10。通过自制柱式反应器考察该酶工作稳定性,经过15批连续水解反应,固定化脂肪酶仍保持90%的活力,展现出良好的稳定性。

地衣芽孢杆菌; 脂肪酶; 固定化; ZH-HA

0 引 言

脂肪酶(三酰基甘油酯水解酶,EC 3.1.1.3)[1],属于水解酶类家族,除了水解作用,脂肪酶还能催化其它多种生物转化反应,如有机合成反应、酸解、氨解、酯化反应、酯交换反应及酯基转移反应等[2-3]。脂肪酶在自然界中广泛存在[4],不仅有参与新陈代谢的重要生理作用,而且有很大的工业价值,包括一些特殊有机物的合成,脂肪和油类的水解,食品工业发展中香料的改进以及化学分析等[5]。此外,脂肪酶还可以催化动、植物油脂发生酯交换反应得到脂……