周婧倩， 钦 松， 马亮亮， 杨 宇， 张 仓， 余伯阳*

(1. 中国药科大学，江苏南京211198;2. 南京圣和药业有限公司，江苏南京210038)

消癌平注射液是由萝藦科植物通关藤Marsdenia tenacissima (Roxb.)Wight et Arn. 的干燥藤茎经水提醇沉制成的中药注射剂，临床上常用作肺癌、肝癌、胃癌、食道癌的治疗药物。研究证实消癌平注射液有明显的体外抗肿瘤细胞转移作用［1］，但是尚未见对消癌平注射液的抗肿瘤转移作用的物质基础研究的报道。前期研究表明通关藤药材主要组分为多糖类、酚酸类、甾体苷(元)类［2-4］。本实验采用中压制备色谱分离制备三大类组分并通过模拟肿瘤转移的三个主要步骤:黏附、迁移、侵袭以研究消癌平注射液及其大类组分不同配比下对肿瘤细胞转移的抑制作用及其对抗肿瘤细胞转移的影响能力，为进一步研究消癌平注射液的抗肿瘤作用、探明其有效成分及其作用机制提供依据。

1 材料

1.1 仪器 中压制备色谱MPLC (上海利穗Dr FlashⅡ);Mettler AL104 型分析天平(瑞士Mettler Toledo 公司);细胞培养箱(Thermo 公司);酶标仪(美国Molecular Devices 公司);超净工作台(苏净集团安泰公司);离心机80-2B (上海安亭科学仪器厂制造);倒置显微镜 (日本OLYMPUS XSZ-D2)。

1.2 主要药物及试剂 消癌平注射液(南京圣和药业有限公司提供，批号分别为201209051，201209101，201208310，201203211，201209071，201210221，201207031，201208231，201209271，201209311，201209281，201202271，201207091，201209171，201209151，201208311，201209042，201207231，201006201，201203151)，胎牛血清(GIBCO)，RPMI 1640 培养液(GIBCO)，0.25%胰蛋白酶(南京凯基生物科技发展有限公司);噻唑蓝MTT (美国AMRESCO 公司);纤维连接蛋白FN (美国Calbiochem 公司);小牛血清白蛋白BSA(美国罗氏公司);人工重构基底膜材料Matrigel 胶(美国BD 公司)，结晶紫(南京凯基生物科技发展有限公司);4%多聚甲醛(南京凯基生物科技发展有限公司)。……