覃彦平，曹昭，覃锦耀，林观凤，吴君荣

（1.广西柳州市红十字会医院检验科，广西 柳州 545001 E－mail：1227143070＠qq.com；2.广西医科大学第一附属医院检验科，广西 南宁 530021；3.广西柳州市红十字会医院放射科，广西 柳州 545001）

肝癌是广西常见的恶性肿瘤，其发病率、致死率极高。手术治疗是常用的根治性治疗方法，但术后肿瘤复发是影响患者长期生存的关键因素。研究者已发现白细胞介素－23受体（interleukin－23receptor；IL－23R）基因单核苷酸多态性与肝癌发病相关［1－4］，然而IL－23R 基因单核苷酸多态性对肝癌预后作用的相关研究未见报道。因此，本课题组针对68例手术治疗的肝 癌 患 者 进 行IL－23R 基 因rs17375018 及rs11805303位点单核苷酸多态性与预后关系的研究，探讨IL－23R 基因对肝癌预后的影响。

1 对象与方法

1.1 研究对象 研究对象均为2012年7～12月在广西医科大学第一附属医院住院的未经化疗、放疗的广西地区肝癌手术治疗患者。入选对象均为根据患者病史及临床表现，CT、MRI等影像学检查结果阳性，或血清AFP＞400μg／L，或肝脏细胞学检查及肿瘤标本病理诊断符合原发性肝癌的患者。其中，68例有完整随访资料的患者纳入本研究。男58例，女10例，年龄24～69岁，平均年龄（46.4±11.4）岁。

1.2 研究方法

1.2.1 提取DNA 抽取患者静脉血2 ml并用EDTA 抗凝，采用苯酚－氯仿法提取DNA 后置于－20℃冰箱备测。

1.2.2 采用PCR－RFLP 方法检查基因型 引物由上海生工生物科技有限公司合成，rs17375018位点引物序列上游为：5 ˊ－AGTAATTATTCTAGTTGATAACT－3ˊ，下游为：5 ˊ－ AATAAAAGTGAATGTTCTCCTCT－3ˊ；rs11805303位点引物序 列 上 游 为：5 ˊ－TATGCTTGAAACAGAGAACTGTTTCTT－3ˊ，下游为：5ˊ－CACAGAATACTTAAATTTTTTATCC－3 ˊ。采用DA－7300PCR 分析仪进行扩增。PCR 反应体系为25μl，包括基因组DNA 2.0μl，两种引物（1.0μmol／L）各1μl，Dream TaqTM Green PCR Master Mix（2x）12.5μl，余用灭菌去离子水补足。两个位点PCR 反应循 环参数 一致：95 ℃预 变 性2 min，95 ℃变性20s，52 ℃退火30s，72 ℃延伸30s，35个循环，72℃延伸10min。……