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Cox-2在槲皮素抑制耐药白血病HL-60、HL-60A 细胞增殖中的作用

2015-01-13牛国敏张复华杨国雷凌奕文潘焕玉徐嘉愉

右江民族医学院学报 2015年1期
关键词:耐药

牛国敏,张复华,杨国雷,凌奕文,潘焕玉,徐嘉愉

(南方医科大学附属南海医院,广东 佛山 528200)

急性白血病是血液系统常见的恶性疾病,自然病程短,死亡率高,近年来随着化疗方案的不断改进,缓解率有很大提高,但仍有部分患者不能缓解或缓解后很快复发。白血病细胞对化疗药物产生耐药是化疗失败的主要原因。环氧化酶-2(Cyclooxygense-2,Cox-2)是前列腺素合成过程中的重要限速酶[1],在多种肿瘤包括急性白血病中表达异常增高[2-3],通过多种途径参与白血病的发生发展。有研究表明Cox-2与恶性肿瘤耐药有关。槲皮素(Quercetin,Que)是自然界常见的植物黄酮类化合物,通过抑制Cox-2的表达诱导急性白血病细胞凋亡[4]。那么槲皮素是否可以同样抑制急性白血病耐药细胞凋亡,其作用机制是否与Cox-2有关,本研究通过观察槲皮素处理后Cox-2的表达水平来探讨Cox-2在急性白血病细胞耐药中的作用。

1 材料和方法

1.1 槲皮素 槲皮素(sigma公司)用二甲亚砜(DMSO)溶解,浓度为100mmol/L,-20 ℃低温保存。

1.2 细胞培养 耐药白血病细胞株HL-60、HL-60A 细胞购自中国科学院上海细胞生物研究所,本实验室冷冻保存。复苏的HL-60细胞接种于含10%胎牛血清(杭州四季青 中国)、3%谷氨酰胺的RPMI 1640完全培养基,置于37 ℃、5%CO2细胞培养箱中培养,每2~3d传代换液1次,取对数生长期的细胞进行实验。

1.3 外周血单个核细胞(Peripheral blood mononu-clear cells,PBMC)的提取 无菌操作抽取正常成人新鲜离体的静脉全血,EDTA 抗凝后将细胞悬液加在淋巴细胞分离液上,离心后吸出血浆层和淋巴细胞分离液交界面的外周血单个核细胞。

1.4 CCK-8 法……

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