江旭锋，曾庆春，刘军杰，曾怡，苏莉莉，黄岑汉，刘燕平②

（1.广西中医药大学，广西 南宁 530001 E－mail：1536673698＠qq.com；2.右江民族医学院，广西 百色 533000）

糖尿病肾病（DN）以肾小球基底膜（GBM）增厚、系膜增生为主要病理特征，从而导致肾小球硬化，并出现蛋白尿，甚至肾功能衰竭［1－3］。而结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子（TGF－β1）、血浆纤溶酶原激活物抑制物（PAI－1）、纤维连接蛋白（FN）是DN病理过程中的重要细胞因子，参与调节DN 的病理改变。壮通饮（ZTY）为治疗DN 的经验方［4］，本实验运用荧光实时定量RT－PCR 法检测壮通饮对DN 大鼠肾皮质CTGF、TGF－β1、PAI－1、FN 细胞因子mRNA 表达的影响，以进一步研究其保护作用。

1 材料

1.1 动物 SPF 级纯种SD 大鼠140只，雌雄各半，体质量（200±20）g，鼠龄4 个月，检疫合格，血糖正常，由广西医科大学动物实验中心提供（合格证编号：SCXK 桂2009－000），适应性喂养1周后进行实验。

1.2 药品和试剂 水合氯醛（成都市科龙化工试剂厂，批号：20130513）；链脲佐菌素（STZ，美国Sigma公司，批号：90513038）；ZTY 水煎液（扶芳藤、黄花倒水莲、参三七），购自广西柳州百草堂药业有限公司，批号：20131023；卡托普利片（广东台城制药股份有限公司，批号：20130302）；目测尿蛋白试纸（广州市花都高尔宝生物技术有限公司，批号：20130717）；总RNA 提取试 剂盒（TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit，Code No.9767）、逆转录试剂盒（Takara PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser Perfect Real Time，Code No.RR047A）、实时荧光定量RT－PCR 试剂盒（TaKaRa SYBR®R Premix Ex TaqTMII TLi RNaseH Plus，Code No.RR820A），均购自于大连宝生物有限公司；引物由广州吉格生物科技有限公司设计合成。

1.3 仪器 超低温冰箱（日本SANYO 公司，型号：MDF－u72v）、制冰机（日本SANYO 公司，型号：SIM－F124）、电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司，型号：BS223S）、旋窝混合器（上海琪特分析仪器有限公司，型号：XW－80A）、电脑三恒电泳仪（北京市六一仪器厂，型号：DYY－6D）、超微量分……