紫杉醇聚乳酸纳米粒的制备及特性考察

2015-01-11李平生

湖北科技学院学报(医学版) 2015年2期

李平生

(1.武汉大学基础医学院，湖北武汉 430071;2.湖北科技学院附属第二医院)

紫杉醇(paclitaxel，TAX)是从红豆杉的树皮中提取的一种天然植物产品，已经证明对肿瘤具有显著的活性，广泛应用于卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、食道癌、肺癌、多发性骨髓瘤的治疗［1，2］。然而，紫杉醇水溶性差，也有一定的副作用，主要体现在骨髓抑制、外周感觉神经病变和过敏反应;另外一个问题就是药物的耐药性。这些问题可以通过制剂技术来解决。新的战略包括制备水溶性前药、纳米载体脂质体、高分子胶束等［3］。

纳米制剂的粒径1～1000nm，由于粒径小，可以实现被动靶向，减小药物对正常组织的毒副作用，而载体的比表面积大，可以提高难容药物的溶解性，提高药物的生物利用度。正常组织的血管壁内皮间隙致密，结构完整，大分子及药物载体很难通过，而肿瘤组织中血管丰富，内皮间隙为380～780 nm，结果完整性差，淋巴回流缺失，因此一定粒径的纳米制剂可以通过血管壁，进入肿瘤组织，滞留肿瘤组织，局部组织药物浓度增加，而达到杀死肿瘤细胞的作用［4］。

1 资料与方法

1.1 实验仪器 H-7000FA 透射电子显微镜(日本日立HITACHI 公司)，85-2 恒温磁力搅拌器(上海司乐仪器有限公司)，Zetasizer Nano ZS90 激光粒度仪(英国Malvern 公司)，S-250D 超声破碎仪(上海生析超声仪器有限公司)。

1.2 实验材料聚乳酸(分子量1 万，济南岱罡生物科有限公司)，紫杉醇(≥99%，南京标科生物科技公司)，聚乙烯醇(PVA-217)(日本Kuraray 公司)。

1.3 实验方法

1.3.1 TAX 纳米粒的制备采用超声乳化法制备紫杉醇纳米粒:取0.5%(m/v)浓度的PVA 溶液10ml，用做水相;另取TAX 0.0056g，聚乳酸0.1g 溶于2ml 的二氯甲烷溶液中，混合均匀后在搅拌的条件下加入到水相中，然后在100 W 超声强度下超声乳化1min，乳液在常温条件下搅拌过夜至有机溶剂挥发干净，10000 rpm 离心10min，然后重新分散于分散介质中保存。

1.3.2 纳米粒粒径大小测定将纳米粒溶液用超纯水稀释到一定浓度后，取1ml 至样品池，激光粒度仪设置散射角为90°，常温平衡2min 后测定纳米粒的水合粒径。

1.3.3 纳米粒的形态观察将纳米粒溶液用超纯水稀释到一定浓度后，滴加到铜网上，自然干燥后用1%(w/v)磷钨酸溶液染色20s，放置过夜后透射电镜下观察纳米粒的形态。

1.3.4 纳米粒的载药量及包封率的测定色谱条件:ODS C18 为固定相;流动相:甲醇-乙腈-水(30∶40∶30);流速:1ml/min;检测波长:227nm;进样量:20μl。紫杉醇纳米粒溶液3 批，分别取1ml至容量瓶中，加丙酮乙醇的混合溶剂溶解定容，取适量过滤，取滤液20μl 进样。

2 结果

2.1 紫杉醇纳米粒溶液的外观制备的紫杉醇纳米粒溶液是均一稳定，且略带浅蓝色乳光的胶体分散体系。

2.2 紫杉醇聚乳酸纳米粒的粒径测量紫杉醇聚乳酸纳米粒粒径为(230 ±1.08)nm，其多分散性系数(PDI)0.124 ±0.011，表明纳米粒粒径较均匀。

2.3 紫杉醇纳米粒的形态学观察对紫杉醇聚乳酸纳米粒透射电镜观察，制备的纳米粒外观圆整，粒径均匀。

2.4 紫杉醇纳米粒的载药量和包封率测量紫杉醇标准曲线方程为A=0.3467C +0.5105(r=0.9997)，在1～50μg/mL 范围内紫杉醇峰面积与其浓度呈良好的相关性。按照包封率=包封的药物/总投药量，载药量=包封的药物/总重量计算纳米粒的包封率为(93.57 ±0.50)%，载药量为(3.01 ±0.03)μg/mg，结果见表1。