常欣峰　林乐迎　宋春花

摘 要：目的：观察高效免疫调节剂（HIS）对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法：制备HIS含药血清，采用MTT法检测HIS含药血清对HeLa细胞增殖的影响，AnnexinⅤ/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡。结果：与对照组比较，HIS含药血清对HeLa细胞生长有一定的抑制作用（p<0.01），并呈明显的时效量效关系；而随着HIS剂量的增加，各含药血清组细胞凋亡比例亦相应增加，与对照组比较有显著性差异（p<0.01）。结论：HIS对宫颈癌细胞生长有明显的抑制作用，同时可以调节细胞周期，促进细胞凋亡。

关键词：高效免疫调节剂；人宫颈癌HeLa细胞；增殖

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤，严重威胁广大妇女的生命和健康。宫颈癌的治疗是一个及其复杂的过程，如何纠正宫颈癌患者的整体免疫系统恢复到正常和协调上来，恢复机体的免疫监视，防止肿瘤的发生、发展和转移是宫颈癌治疗的关键之一。为此，我们采用多价疫苗组成的高效免疫调节剂（high-efficiency immune modulators， HIS），制备成含药血清，对人宫颈癌HeLa细胞进行体外培养，观察HIS对宫颈癌细胞增殖的影响。

1 材料

1.1 动物及细胞株

雄性SD大鼠，体重250-280g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司（动物中心许可证号：SCXK（湘）2011-0003，动物合格证号：43004700003244，级别：SPF级）。人宫颈癌HeLa细胞人肝癌细胞株Bel-7402，由中国医学科学院医药研究所购进，赣南医学院科研中心传代培养。

1.2 药品和试剂

胎牛血清（Gibco，10099-141）、1640培养基（Gibco，12800-058）、0.25%胰酶（Gibco，25200-056）、MTT Formazan（Sigma，M2003-1G）、PI Annexin Ⅴ apoptosis detection kit（美国BD公司，3018688）

2. 方法

2.1 实验药物配置

HIS（中国发明专利申请号：200810107096.6）由江中肿瘤治疗研究组提供，将其配置成0.3 g/mL，此为中剂量，再分别浓缩、稀释成0.9 g/mL、0.1 g/mL，此为高、低剂量。4℃冰箱保存，大鼠按0.1 mL/100 g腹股沟皮下注射给药，每日一次。

2.2 含药血清制备

将20只清洁级SD大鼠随机分成4组：A、正常对照组；B、HIS低剂量组；C、HIS中剂量组；D、HIS高剂量组。A组每天腹股沟皮下注射生理盐水0.1mL/100g；B、C、D组分别给予低、中、高剂量HIS腹股沟皮下注射0.1mL/100g；……