黄莲芬， 谢永强， 邓秋连， 刘海英， 钟华敏， 陈艳文， 周 帅， 陈吟霜， 周珍文

·论著·

647株金黄色葡萄球菌儿童分离株的分布和耐药性分析

黄莲芬1， 谢永强1， 邓秋连2， 刘海英1， 钟华敏1， 陈艳文1， 周 帅1， 陈吟霜1， 周珍文1

目的了解儿童金黄色葡萄球菌（金葡菌）分离株耐药情况，为临床治疗用药提供依据。方法采用微生物检验报告系统统计分析金葡菌分离株中耐甲氧西林金葡菌（MRSA）比率，并分析MRSA和甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）对主要抗菌药物的耐药性差异。结果 共分离到647株金葡菌，其中MRSA 194株，占29.98%。MRSA和MSSA对万古霉素、替加环素、替考拉宁、利奈唑胺、奎奴普丁-达福普汀和呋喃妥因均100%敏感，对甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑、阿米卡星、青霉素的耐药率差异无统计学意义；MRSA对大多β内酰胺类药物及其含酶抑制剂、红霉素、四环素、利福平、庆大霉素、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率较MSSA高，差异有统计学意义。结论 金葡菌儿童临床感染形势严峻，MRSA和MSSA对多种抗菌药物耐药率差异明显，儿童金葡菌相关性感染可根据病情及参考药敏结果选用敏感的抗菌药物治疗。

金黄色葡萄球菌； 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌； 感染； 耐药性

金黄色葡萄球菌（金葡菌），是人类化脓性感染中最常见的病原菌，可引起皮肤、软组织、泌尿道、骨、关节、呼吸道、眼部及中枢神经系统感染，引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎、心内膜炎、脓毒性关节炎、骨髓炎，甚至败血症、脓毒症等全身性感染。致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶。金葡菌的外毒素如肠毒素可引起食物中毒，溶血毒素、杀白细胞毒素、休克毒素TSST-1、表皮剥脱毒素等多种毒素与其致病力有关，产生的血浆凝固酶与其感染易局部化有关。金葡菌已成为医院感染的重要病原菌之一。耐甲氧西林金葡菌（MRSA）的不断出现，更给临床预防和治疗金葡菌感染性疾病带来了极大挑战，而部分金葡菌菌株可形成生物膜，容易使感染局部化和慢性化，导致疾病迁延不愈。目前，儿童金葡菌感染率居高不下，相关感染性疾病致死、致残率高，耐药形势亦不断加剧，因此，迫切需要对之采取行之有效的防治措施。本研究旨在了解儿童金葡菌分离株分布特征及其对主要抗菌药物的耐药情况，为其感染预防和临床治疗提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 临床资料 2011年1月1日—2012年12月31日，我中心儿童院区共分离647株金葡菌。患儿年龄最小4 d，最大12岁，其中男376例，女263例。

1.1.2 培养基和试剂 血琼脂平皿、万古霉素巧克力琼脂平皿、MH药敏平皿均为英国OXOID公司产品，血培养瓶为美国BD公司产品，GP67药敏卡、药敏用生理盐水、比浊仪均为法国生物梅里埃公司产品。

1.1.3 仪器 BD9120型全自动血液培养仪为美国BD公司产品，VITEC-2 compact鉴定系统为法国生物梅里埃公司产品。

1.2 方法

1.2.1 金葡菌的分离培养、鉴定和药敏试验 各种标本金葡菌分离培养按《全国临床检验操作规程》（第3版）进行［1］，根据菌落形态特征，溶血情况，涂片染色观察镜下形态，血浆凝固酶试验和甘露醇产酸试验或VITEC-2 compact分析仪进行鉴定，K-B法或VITEC-2 compact分析仪进行药敏试验，采用CLSI 2010标准判读药敏结果，抑菌圈的边缘以肉眼看不到细菌生长为限。K-B试验时，30μg头孢西丁药敏纸片抑菌圈直径≤21 mm定为MRSA，或用VITEC-2 compact分析仪GP67药敏卡头孢西丁筛选试验阳性定为 MRSA。质控菌株为金葡菌ATCC 25923。

1.2.2 数据处理 采用微生物检验报告系统的数据分析功能进行统计，分析金葡菌标本来源情况、病区分布特征，检测分离菌株对万古霉素、替加环素、替考拉宁、利奈唑胺、奎奴普丁-达福普汀、呋喃妥因、红霉素、克林霉素、青霉素、苯唑西林、头孢他啶、四环素、头孢唑林、头孢西丁、利福平、甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑、氨苄西林-舒巴坦、头孢呋辛、阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药情况，根据药敏结果判断菌株是MRSA或MSSA，计算所有分离菌株总的MRSA比率，分别计算主要标本MRSA比率，分析MRSA和MSSA菌株对以上抗菌药物的耐药率。

2 结果

2.1 金葡菌标本来源

在我院门诊和住院患儿各种标本中共分离到647株金葡菌，主要标本来源情况及其MRSA比率见表1。

2.2 金葡菌在临床科室的分布

647株金葡菌中，门诊分离196株，占总分离株数的30.29%，其中皮肤科137株，耳鼻喉科45株，其他科室14株；住院分离451株，占总分离菌株数的69.71%，其中耳鼻喉科129株，新生儿科50株，普通重症监护病房（ICU）43株，新生儿神经科重症监护病房（NICU）22株，外科78株，呼吸科43株，消化科30株，急诊留观室13株，其他内科43株。

2.3 金葡菌对主要抗菌药物的耐药分析

647株金葡菌对万古霉素、替加环素、替考拉宁、利奈唑胺、奎奴普丁-达福普汀、呋喃妥因均为100%敏感，对其他16种抗菌药物的耐药率见表2。红霉素诱导克林霉素耐药试验即 D试验阳性率23.42%。MRSA共检出194株，占总分离菌株数的29.98%，其中门诊29株，住院165株。

表1 647株金葡菌标本来源分布及其MRSA比率Table1 The specimen distribution of 647 S.aureus strains and the corresponding prevalence of methicillin-resistant strains

表2 647株金葡菌对16种抗菌药物耐药率Table2 Antimicrobial resistance of 647 S.aureus isolates to 16 antimicrobial agents （%）

3 讨论

金葡菌是临床上常见的毒力较强的细菌。自从上世纪40年代青霉素问世后，金葡菌引起的感染性疾病曾得到一定程度的控制，但随着青霉素的广泛使用，及头孢菌素类等抗生素的不合理应用，目前已经出现耐多种抗菌药物的金葡菌。

本研究针对647株儿童金葡菌的药敏试验结果分析发现，主要标本MRSA分离率从高到低排列为体液、胸腹水、脓液、痰、扁桃体腺样体组织、咽拭子、耳分泌物、阴道分泌物、血液、创面拭子。儿童不同标本MRSA比率差异明显，尤其脑脊液和胸腹水的MRSA分离率明显高于其他来源标本，软组织和呼吸道MRSA分离率稍高于陈江华等［2］的报道，痰和分泌物MRSA分离率显著低于赵永静等［3］的报道。这可能与患者疾病类型以及严重程度有一定关系，可作为药敏结果出来前临床医师进行金葡菌感染经验性治疗的参考。

本次MRSA检出率为29.98%，低于综合性医院水 平［4-5］，但 高 于 往 年 报道的其他 地 区 儿 童 医院［5-8］。MRSA占多的科室主要有皮肤科、耳鼻喉科、门诊和患者。门诊患儿常有皮肤、眼、阴道炎或化脓性中耳炎等感染；耳鼻喉科住院患者主要有扁桃体腺样体肥大或呼吸暂停综合征；新生儿科的肺炎患者可伴有新生儿呼吸综合征表现，这可能与新生儿免疫力低，呼吸道先天免疫防御机能发育不完善有关。值得注意的是，急诊室金葡菌分离率虽仅2%，但是患儿往往可能患有金葡菌败血症，病情凶险，病死率高。

本研究分析发现，所有分离菌株对万古霉素、替加环素、替考拉宁、利奈唑胺、奎奴普丁-达福普汀、呋喃妥因6种药物均100%敏感，并且MRSA和MSSA分离菌株对该6种药物及磺胺类、阿米卡星的耐药性差异无统计学意义，对磺胺类和阿米卡星耐药率均较低。临床上可根据病情需要作为优先治疗选择药物。本研究儿童患者分离的 MRSA和MSSA对喹诺酮类和氨基糖苷类抗菌药物耐药率均很低，MRSA对环丙沙星和庆大霉素耐药率均为10.14%，对左氧氟沙星耐药率仅4.79%，远低于赵永 静 等［3］、曾 钊宁等［9］的 报 道，这可 能 与 小 儿MRSA患者中极少使用这两类药有关。另外，本研究发现的7株（2.5%）对苯唑西林敏感菌株，对头孢西丁呈现耐药，说明以往的苯唑西林耐药判断MRSA标准会存在漏检。

由于MRSA具多重耐药特征，目前已成为医院感染的主要病原菌之一，临床上检测并分析其对β内酰胺类、大环内酯类、氨基糖苷类、四环素类、氟喹喏酮类和磺胺类等多种抗菌药物多药耐药的情况和变化趋势，可为临床上进一步预防MRSA多重耐药的发生提供参考。

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Analysis of antimicrobial resistance in 647 strains of Staphylococcus aureus isolated from pediatric patients

HUANG Lianfen，XIE Yongqiang，DENG Qiulian，LIU Haiying，ZHONG Huamin，CHEN Yanwen，ZHOU Shuai，CHEN Yinshuang，ZHOU Zhenwen.（Department of Laboratory Medicine，Guangzhou Children's Hospital，Guangzhou Women and Children Medical Center，Guangzhou 510120，China）

；ObjectiveTo explore the antibiotic resistance inStaphylococcus aureusstrains isolated from pediatric patients and the associated infections.MethodsThe prevalence of methicillin-resistantS.aureus（MRSA）was calculated and antimicrobial resistance was compared between MRSA and methicillin-susceptibleS.aureus（MSSA）strains.ResultsA total of 647 strains ofS.aureuswere isolated，of which 29.98%were MRSA.All MRSA and MSSA strains were sensitive to vancomycin，tigecycline，teicoplanin，linezolid，quinupristin-dlfopristin，and nitrofurantoin.No significant difference was found in the resistance to trimethoprim-sulfamethoxazole，amikacin，or penicillin between MRSA and MSSA.Significant difference was identified between MRSA and MSSA in the resistance to most beta-lactams and their inhibitors，erythromycin，tetracycline，rifampicin，gentamycin，ciprofloxacin and levofloxacin.ConclusionsS.aureusinfection is a serious issue in pediatric patients.Clinical antimicrobial therapy should be selected cautiously in terms of MRSA or MSSA infection.Highly active antimicrobial agents againstS.aureusshould be used while considering the specific clinical conditions.

；Staphylococcus aureus； methicillin-resistant；infection； antimicrobial resistance

R446.5

A

1009-7708（2015）02-0163-04

2014-01-08

2014-09-05

广州市卫生局课题（201102A212013，2013A011040022）。

1.广州市妇女儿童医疗中心，广州市儿童医院检验科微生物室，广州 510120。2.广州市妇女儿童医疗中心珠江新城院区。

黄莲芬（1982—），女，硕士，主管技师，主要从事临床微生物检验与研究。

黄莲芬，E-mail；hlfen2008®163.com。