沈颐涵

摘   要   目的：构建一种更好的婴儿双歧杆菌微生态制剂生产工艺，提高冻干菌粉的活菌存活率。方法：通过正交试验，对婴儿双歧杆菌冻干过程中加入的保护剂种类及其最佳配比进行研究。结果：以脱脂奶粉10 %，甘露醇3 %，Vc-Na 1 %，味精0.5 %作为冻干保护剂，可使婴儿双歧杆菌冻干菌粉的活菌存活率由43%左右提高到85.42 %、活菌量保持在4.1×1010 cfu/g。结论：该配方用于微生态制剂的生产将有较好的效益。

关键词    婴儿双歧杆菌    冷冻干燥    冻干保护剂    正交试验

中图分类号：R944.9            文献标识码：A            文章编号：1006-1533（2014）23-0066-05

Screening and optimization of the formulation of cryoprotectants

for the lyophilized Bifidobacterium infantis

SHEN Yihan*

（Department of Quality Assurance， Shanghai SINE Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 201206， China）

ABSTRACT   Objective： To develop a better technique for the production of probiotic Bifidobacterium infantis and improve the survival rate of the lyophilized powder. Methods： In this improved technique， The types of cryoprotectants added in the lyophilization of Bifidobacterium infantis and their optimized formulations were studied by orthogonal test. Results： The survival rate of the lyophilized powder of Bifidobacterium infantis could be significantly improved from about 43% to 85.42% and the viable cell counts maintained at above 4.1×1010 cfu/g when a formulation of cryoprotectant consisting of 10% skim milk powder， 3% mannitol， 1% Vc-Na and 0.5% monosodium glutamate was used. Conclusion： This formulation will have a good benefit when applied to the probiotic production.

KEY WORDS    Bifidobacterium infantis; lyophilization; cryoprotectant; orthogonal test

越来越多的科学研究表明，益生菌有益于人体的健康[1]。双歧杆菌是人肠道中重要的益生菌，具有调节微生态平衡的生理功能。双歧杆菌属专性厌氧菌，对培养环境敏感，对营养要求苛刻，活性保持较难。如何最大限度地保持双歧杆菌制品的活性已成为研究热点之一。以双歧杆菌制成的微生态制剂主要依赖于发酵制备和冻干保藏技术。一些对双歧杆菌冻干菌粉的研究结果表明，双歧杆菌发酵制备的高密度菌体经历冻干后，菌体密度基本呈指数级下降[2]。因此需要改进冻干保护剂配方以提高菌体的冻干存活率及婴儿双歧杆菌制剂的产品质量。在适当保护剂的作用下，采用冷冻干燥技术能有效地保藏发酵制剂[3-7]。但是大量的研究显示保护剂的效果存在菌株特异性[8-11]。Leslie等[3]发现海藻糖对大肠杆菌和苏云金杆菌有良好的保护效果，而Linden等[12]的研究中海藻糖对植物乳杆菌却没有保护作用。……