林国文 ，叶定伟，戴 波，张海梁，沈益君，朱 耀，朱一平，施国海，马春光，肖文军，秦晓健，曹达龙

（复旦大学：1.附属肿瘤医院泌尿外科；2.上海医学院肿瘤学系，上海 200032）

去势抵抗性前列腺癌（castration resistant prostate cancer，CRPC）治疗手段有限，预后差。多数确诊晚期的前列腺癌患者经过1.5～2年内分泌治疗后，不可避免进展为CRPC 阶段，其发生机制至今未明。近年有报道膜联蛋白7（Annexin A7，ANXA7）与前列腺癌进展关系密切［1－2］，但对激素敏感前列腺癌（hormone sensitive prostate cancer，HSPC）进展为CRPC过程中ANXA7的作用尚不明确。本文利用免疫组化技术检测ANXA7蛋白在转移性HSPC患者的原发灶组织中表达情况，并探讨其表达差异的对预后意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2003年6月至2013年6月本院资料完整的转移性HSPC 患者106例，均经病理证实且确诊时已发生骨转移。患者年龄56～89岁，平均年龄70岁；确诊时血清PSA 3～5 577ng／mL，中位值为170ng／mL；采用TNM 分期，T1～T2期22例，T3期59例，T4期25例；N0期65例，N1期41例；Gleason评分＜8分36例，≥8分70例。另取前列腺增生组织20 例、CRPC 原发灶组织22 例作比较。CRPC判断标准（文献［3］）：①血清睾酮达去势水平（＜50ng／dL）；②间隔2周连续3次PSA 升高；③二线内分泌治疗期间PSA 进展；④可出现骨或软组织病变进展。所有患者临床资料由原始病史获得，内分泌治疗采用最大限度雄激素阻断方法。生存期随访时间截止为2014年3月。

1.2 方法

1.2.1 免疫组织化学染色方法 上述病例的原发灶组织石蜡切片脱蜡水化，采取煮沸修复（置入pH 值为8.0的EDTA 抗原修复液，煮沸30min）；PBS冲洗后滴加50μL 一抗（ANXA7，兔抗人，1∶60，ProteinTech公司），4℃过夜；PBS冲洗后滴加通用二抗，室温下孵育60min；PBS冲洗后滴加100μL DBA 显色液；蒸馏水冲洗，0.1%盐酸分化，梯度乙醇脱水干燥，二甲苯透明，香柏油封固。……