曹治家，蔡小燕，方 薇，陈洪升，张怀念，张咏莉

(广东药学院，广州510006)

核桃楸皮是胡桃科胡桃属落叶乔木核桃楸的干燥树皮，其味微苦、涩，性寒，具有清热燥湿、泻肝明目的功效，主治湿热下痢、目赤肿痛、麦粒肿、迎风流泪、骨结核等。研究证实，核桃楸皮的水提物、乙醚提取物及甲醇提取物等都有抗肿瘤的功效［1～3］。现代药理学研究发现，核桃楸皮含有醌类、黄酮类、萜类、多酚类等多种化学成分［4，5］，但对其所含化学成分的抗肝癌活性研究较少。2012年12月，本课题组鉴定了核桃楸皮的化学成分，并对其进行抗肝癌活性成分筛选。

1 材料与方法

1.1 材料 核桃楸皮，购自黑龙江省伊里嘎山，经鉴定为野生核桃楸树皮(鉴定单位:黑龙江省药材公司);人肝癌细胞株HepG2和人肝组织细胞LO2由中山大学临床药理研究所黄民教授课题组惠赠。RY2型熔点仪，天津分析仪器厂;旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂;层析柱，广州文睿科学仪器有限公司;Bruker DRX600型核磁共振仪，瑞士Bruker公司;LG10-2.4离心机，北京医用离心机厂;Waters510泵-996PDA高效液相色谱仪、Diamonsil C18(5×250 mm)色谱柱，Dikma公司;CO2细胞培养箱，日本SANYO SHEL LAB;酶标仪，美国BIO-RAD。DMEM高糖培养基、胰蛋白酶、胎牛血清，美国Gibco公司;噻唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)，美国Sigma公司;甲醇、乙醇、石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇等，天津市福晨化学试剂厂;硅胶H(200～300目)、薄层层析硅胶，烟台市芝罘黄务硅胶开发试验厂。

1.2 方法

1.2.1 核桃楸皮化学成分的提取、分离及鉴定①乙醇回流提取:取干燥核桃楸皮，粉碎后过20目筛，取粗粉6.0 kg，加入75%乙醇，反复回流提取3次，每次约1.5 h。……