桑杏汤对两种细菌的最低抑菌浓度测定及意义
2014-12-01倪圣丁建中黄江荣李侃
倪圣,丁建中,黄江荣,李侃
(长江大学医学院,湖北荆州434023)
桑杏汤出自清代医家吴瑭所著 《温病条辨》卷一之上焦篇方,“秋感燥气,右脉数大,伤手太阴气分者,桑杏汤主之。”此方轻宣温燥,凉润止咳,故能 “清气分之燥也”。近年来对桑杏汤及其加减方治疗呼吸系统疾病随机对照试验研究文献的Meta分析显示,对1310例肺炎、咳嗽变异性哮喘、咳嗽、支气管炎等受试者疗效良好[1-2]。前期研究证实桑杏汤可促进气道黏液分泌及增加气道IgG抗体水平,可能是治疗呼吸系统疾病的生物学基础之一[3]。本实验采用制备含桑杏汤复方水提取物琼脂平板法测定其对金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(Minimum inhibition concentration,MIC),为解析桑杏汤治疗温燥伤肺机制提供实验证据。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
恒温培养箱,温度(6~65)±1℃(上海医疗器械厂);细菌标准比浊管(DensiCHEK,BioMerieux.Inc,27704-0969/USA);M-H 药 物 敏 感 试 验 琼 脂(批 号:20131114, 产 品 编 号:HB6232,青岛高科园海涛生物技术有限公司);微量移液器(2~10μl,100μl,德国)。
1.2 实验菌种
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,ATCC29213)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,ATCC27853)质控菌株由原卫生部临床检验中心(NCCL)提供。
1.3 实验药材
桑杏汤源自 《温病条辨》:桑叶9g,杏仁9g,沙参15g,象贝母12g,香豉6g,栀子皮12g,梨皮12g。中药材购自湖北清大中药饮片有限责任公司,经湖北中医药大学药学院鉴定教研室鉴定为合格药材。
1.4 中药液制备
取桑杏汤一剂,加3倍水浸泡2h后微火煎至100ml,重复3次,3次煎液过滤混匀并水浴浓缩至200ml,其生药量为0.360g/L。待药液冷却至室温后3500r/min离心20min,取上清液备用。
1.5 菌液制备
取经BioMerieux专用培养基转种18h的金葡菌、铜绿假单胞菌用无菌生理盐水制成悬液,用细菌标准比浊管稀释至0.5麦氏浊度(1.5×108个/ml),当天使用。……
