北京中医药大学（100029）景泉凯 苏靖 陈天帷 王斐 梁田

抑郁症是情感性精神障碍的主要类型，是一种以显著而持久的心境低落、思维迟钝、语言行动减少为主要特征的综合征。抑郁症是危害人类身心健康的常见病、多发病，是一个全球性的主要精神问题[1]，但流行病学资料显示，其具有知晓率低、治疗率低等特点。

随着现代医学逐步向生物—心理—社会医学模式转变，在天人相应、整体观念指导下的中医疗法的治疗优势正越来越多的得到重视。抑郁症是一种典型的生物、心理、社会等多种因素作用而致的疾病，因此单一作用、靶点明确的药物治疗不可避免的具有某些局限性。本实验观察了在多靶点作用下的中医五行音乐疗法结合针刺治疗对大鼠抑郁模型的行为学影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物 成年雄性SD大鼠，重170～200g，由北京中医药大学动物实验中心提供，清洁级，40只。置于安静、7：00～19：00光照、19：00～7：00黑暗的实验室中驯养1周，使其适应环境后再进行实验。

1.2 分组 随机分组，分别为空白对照组、抑郁模型组、针刺组、音乐组、针刺结合音乐组共5组，每组8只。

1.3 模型制备 抑郁模型的建立：建立慢性轻度不可预见性应激抑郁模型。行为限制2h、4℃冰水游泳5min，禁食24h，禁水24h，夹尾1min，明暗颠倒24h，鼠笼倾斜45°24h，潮湿垫料10h，空瓶放置1h及45℃高温5min等。将上述10种刺激随机安排到21天内，每日1种刺激，每种刺激平均出现2次。同种刺激不连续出现，以使动物不能预料刺激的发生。

1.4 操作方法 抑郁模型组停止刺激也不治疗。其他各组进行五行音乐配合针刺干预。针刺组每日针刺治疗1次；音乐组每日听宫调式音乐“春之声圆舞曲”、“蓝色多瑙河”、“江南丝竹乐”各一遍；针刺结合音乐组，每日针刺与音乐治疗一次。音乐治疗时，保证与其他组小鼠隔音的条件下进行。治疗阶段共21天。

1.5 穴位选取与针刺方法 参照全国针灸学会实验针灸研究会制定的《实验动物针灸穴位图谱》取穴。针刺取百会、神庭、内关、三阴交。穴位常规消毒，选用1寸32号无菌一次性针灸针。百会向尾部斜刺，神庭向尾部斜刺，进针深度约为2mm，内关直刺1mm，三阴交直刺5mm，每穴行均匀捻转刺激30s，留针10min。

1.6 主要仪器 自制敞箱：本实验所用敞箱为立方形，高40cm，长宽均为80cm，周壁底面为黑色，底面分成面积相等的25块，由白线划分：旷场实验摄像记录设备；自制大鼠针刺固定板。

1.7 观察指标及检测方法

1.7.1 观察各组大鼠一般状态 每只动物于造模前5h（时间A）、造模阶段结束后5h（时间B）和治疗阶段结束后后5h（时间C）分别称量体重，记录进食，精神状况及进行行为测定。

1.7.2 open-field法测定行为 室内隔音，记录动物行为，以动物穿越底面块数为水平运动得分，每块计1分；大鼠后腿直立次数，无论动物站立多长时间直至动物双足放下为1次活动，每次计1分，为垂直运动得分。每只动物测定3次，每次测定3min。分别在时间A、时间B、时间C测定。

附表1 各组大鼠造模及治疗前后比较（ ，单位：格，n=8/group）

附表1 各组大鼠造模及治疗前后比较（ ，单位：格，n=8/group）

注：与空白组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与抑郁组比较▲＜0.05，▲▲P＜0.01；与同组造模后比较◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

项目 组别 时间A 时间B 时间C爬行格数空白对照组 48.4±6.34 43.5±3.23 47.7±5.76抑郁模型组 49.2±7.51 15.1±4.82★★◆◆ 17.25±3.96★◆◆音乐治疗组 48.0±11.12 13.7±2.64★★◆◆ 26.1±8.87★◆◆针灸治疗组 50.8±8.22 13.7±2.62★★◆◆ 31.3±9.98▲◆◆音乐针灸治疗组 50.6±8.43 14.2±2.05★★◆◆ 50.3±13.1▲▲◆◆直立次数空白对照组 13.7±2.2 11.4±1.74 12.3±2.11抑郁模型组 12.1±3.03 3.0±1.85★★◆◆ 5.2±2.96★◆音乐治疗组 11.3±3.1 2.6±1.43★★◆◆ 6.4±3.01★◆◆针灸治疗组 14.3±2.6 2.8±1.81★★◆◆ 9.1±2.51▲◆◆音乐针灸治疗组 13.3±2.11 2.9±1.91★★◆◆ 13.4±3.14▲▲◆◆

附表2 各组大鼠24h糖水消耗量比较（ ，单位：ml，n=8/group）

附表2 各组大鼠24h糖水消耗量比较（ ，单位：ml，n=8/group）

注：与空白对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01；与抑郁组比较▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；与同组造模后比较◆P＜0.05，◆◆P＜0.01。

组别 时间A 时间B 时间C空白对照组 43.25±6.22 42.56±7.48 46.57±5.43抑郁模型组 45.70±5.67 13.13±3.46★★◆◆ 13.66±1.91★★◆◆音乐治疗组 50.08±11.17 14.10±3.89★★◆◆ 24.30±3.05◆针灸治疗组 49.21±9.23 11.12±1.27★★◆◆ 32.90±3.79▲◆音乐针灸治疗组 41.45±10.76 13.96±2.89★★◆◆ 45.41±3.34▲▲◆◆

1.7.3 糖水消耗实验 所有动物均单笼饲养，每只动物提供1%蔗糖溶液130ml，同时所有动物禁食，计算动物24h饮用1%蔗糖溶液的量。分别在造模前、造模后和治疗后测定大鼠糖水消耗量。

1.8 统计学处理 数据用SPSS20.0软件统计包处理，以均数加减标准差表示，组间差异采用单因素方差分析，P＜0.05为显著性差异的标准。

2 结果

2.1 open-field实验分析（见附表1）

2.1.1 造模前组间行为学差异比较 A时间点时，造模前大鼠旷场实验得出的数据显示各组爬行格数、直立次数均无明显差异，说明各组间大鼠活动性及探究性行为表现均衡稳定，来自同一整体，具有可比性。

2.1.2 同组造模前/造模后行为学差异比较 B时间点时，通过造模可见音乐治疗组、针刺治疗组、针刺结合音乐治疗组小鼠与空白对照组相比均出现了显著的水平运动与垂直运动下降，有统计学意义（P＜0.01），说明造模成功。

2.1.3 治疗后组间行为学差异比较 C时间点时，音乐治疗组水平运动与垂直运动水平与抑郁组相比差异不明显，无统计学意义（P＞0.05）。针刺组水平运动与垂直运动水平与抑郁组相比均有升高，无统计学意义（P＜0.05）。针刺结合音乐组在水平运动与垂直运动各水平上均与抑郁组存在明显差异，有统计学意义（P＜0.01）。

2.1.4 同组造模后/治疗后行为学比较 C时间点时，空白对照组情况一直稳定，抑郁组水平运动与垂直运动水平均与造模后差异不大，音乐组水平运动与垂直运动水平均较造模后上升（P＜0.05），数值高于抑郁组。针刺治疗组水平运动与垂直运动水平均较造模后上升，差异有统计学意义（P＜0.01）。针刺结合治疗组水平运动与垂直运动水平均较造模后有显著回升，差异有统计学意义（P＜0.01）。

2.2 大鼠糖水消耗实验分析（见附表2）

2.2.1 造模前各组间差异比较 A时间点，造模前各组大鼠24h糖水消耗量无明显差异，说明来自同一整体，存在可比性。

2.2.2 造模后/造模前大鼠24h糖水消耗比较 B时间点，造模后各组大鼠与空白组大鼠比较糖水消耗量明显下降（P＜0.01），有统计学差异，说明造模成功。

2.2.3 治疗后组间行为学差异 音乐治疗组糖水消耗量与抑郁组相比有所上升，但差异不明显。针刺组糖水消耗量与抑郁组相比上升明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。针刺结合音乐组糖水消耗量与抑郁组相比上升明显，差异有统计学意义（P＜0.01）。

2.2.4 同组治疗后/造模后差异比较 C时间点，空白组实验全程糖水消耗量稳定。抑郁组糖水消耗量较造模后无明显差异（P＞0.05），音乐治疗组与造模后相比，糖水消耗上升，差异有统计学意义（P＜0.05），针刺治疗组糖水消耗量较造模后上升明显，差异有统计学意义（P＜0.01），针刺结合音乐治疗组糖水消耗量较造模后上升，差异有统计学意义（P＜0.01）。

3 讨论

抑郁行为是由不可控制的负性事件所产生的。目前，抑郁动物模型的建立方法主要分为三类：行为绝望、习得性无助和慢性温和的不可预知性应激[2]。慢性温和应激的抑郁动物模型主要是将动物长时间的暴露在多种不可预知的应激源下，由此引起动物对奖励刺激的缺乏（主要是对可口的甜味溶液的消耗量降低，通常用糖精水）是抑郁的重要表现。慢性温和应激更真实的模拟了人们在现实生活中遭遇的“困难”，动物对甜溶液的饮用量降低反映了抑郁的核心症状，即快感缺乏，可认为此应激模型是一种有效的抑郁动物模型。

造模采用慢性应激方法，造成动物的抑郁状态，建立慢性轻度不可预见性应激抑郁模型。实验观察到，在造模过程中，模型大鼠处于明显的抑郁状态，可见精神萎靡、毛色晦滞、各种活动减少，在规定的时间内水平活动和垂直活动次数明显减少，糖水消耗量降低。

在造模结束（造模21d）时，各组大鼠的行为学表现，规定时间内的水平运动和垂直运动得分明显降低，体重增加减轻，糖水消耗量降低。与造模前相比，差异有非常显著性意义（P＜0.01），标志模型复制成功。各治疗组大鼠的体重、水平运动和垂直运动、糖水消耗与对照组大鼠间的差异无显著性意义（P＞0.05），符合实验进入治疗阶段的分组要求。

研究表明，特定的针对个体需求的针对性音乐疗法可达到较好的治疗效果[3]。五行音乐疗法恰恰具备这样的特点。五声音阶与脏腑相应是中国传统音乐疗法理论的核心思想。《黄帝内经》中把五声音阶（宫、商、角、徵、羽）与人体的五脏（脾、肺、肝、心、肾）和五志（思、忧、怒、喜、恐）运用阴阳五行学说有机地结合起来。用现代科学的语言来描述，就是说五脏均具有一定的振动频率，而且这些频率相应于五声音阶的频率[4]。 抑郁多与压抑、挫折有关，在五行中应属“土”[5]。宫调式乐曲悠扬沉静，能抒发情感，可使其从抑郁中解脱。

针刺治疗抑郁症存在一定优势。相关研究表明，针刺穴位选取百会、神庭与四肢部腧穴内关、三阴交结合，在改善抑郁症行为学方面存在一定优势，尤其是在治疗的早中期[6]。实验结果表明，针刺组、音乐组、针刺结合音乐组在治疗后抑郁状态均有改善。针刺结合音乐组治疗后基本恢复到造模前的状态，抑郁状态改善明显。旷场实验治疗后针刺结合音乐治疗组水平运动与垂直运动水平均较造模后有显著回升，差异有统计学意义（P＜0.01）且数值高于针刺组。针刺组、音乐组治疗后与造模后存在差异（P＜0.05）。表明音乐、针刺均对小鼠抑郁有疗效，且针刺音乐双靶点刺激疗效优于针刺或音乐单靶点刺激疗效。针刺结合音乐治疗组糖水消耗量较造模后上升，差异有统计学意义（P＜0.01）。表明治疗对抑郁的核心症状改善有良好的效果。

本研究结果显示，五行音乐配合针刺对早期抑郁症的治疗有显著效果，明显优于单一的针刺治疗，有良好的应用前景。