溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响
2014-10-24谢伟贤黄泽棋王晓娟韩慧明广东省佛山市第二人民医院检验科58000佛山科学技术学院检药系广东佛山58000
谢伟贤,黄泽棋,王晓娟,韩慧明(.广东省佛山市第二人民医院检验科 58000;.佛山科学技术学院检药系,广东佛山 58000)
体外溶血主要由部分物理性因素所致,包括抽血时负压过大及标本处理过程中涉及的冰冻、水浴箱温度过高、机械震荡等。人体内的胰岛素来自于胰岛β细胞,外周血胰岛素水平可反映胰岛素的分泌及代谢速率。外周血胰岛素水平检测对糖尿病的分型及疗效评价具有重要作用[1]。红细胞内含有胰岛素降解酶(IDE),溶血可使其从红细胞内释放入血清中,降解胰岛素,从而影响胰岛素水平的检测[2-3]。本研究选择不同溶血程度标本,并在溶血后的不同时间段,采用时间分辨免疫荧光分析法进行血清胰岛素水平检测,旨在了解溶血程度和溶血时间对血清胰岛素检测结果影响,以期为指导临床工作及正确理解溶血对免疫学方法检测指标的检测结果的影响奠定基础[4-6]。
1 材料与方法
1.1 标本来源 本研究涉及的外周血标本采集自佛山市第二人民医院收治的具有不同胰岛素水平的患者30例,包括处于正常参考区间者10例、低于正常参考区间下限者10例、高于正常参考区间上限者10例。所有标本无溶血、黄疸及脂血,并于-80℃条件下保存。
1.2 试剂与仪器 XE-5000全自动血细胞分析仪(日本Sysmex公司),Anytest时间分辨荧光免疫分析仪及配套的胰岛素检测试剂盒(苏州新波生物技术有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 标本处理 从冰箱中取出标本,室温中复温、混匀后3 200r/min离心5min,分离血清标本。
1.3.2 血红蛋白(Hb)标准浓度液的配制 取1 000μL Hb浓度为154g/L的乙二胺四乙酸二钾抗凝全血,与500μL蒸馏水混匀,-20℃条件下保存24h,即可获得Hb浓度为100 g/L的标准浓度液。……
