吴建忠 王玉苹 许源媛 刘岩 赵茜

摘要 [目的] 得到清晰的特异性条带，更好地分析SRAP标记产物。[方法]对聚丙烯酰胺电泳的上样量、电压条件进行了梯度试验，同时就灌胶方式、银染时间、显影剂调配等各步骤的操作进行了详细地探讨。[结果] 上样量7 μl、电压1 000 V最合适，能得到 DNA条带清晰、特异性条带区分效果明显的条带。 [结论] 为后续电泳操作及分析过程奠定技术基础。

关键词 亚麻;聚丙烯酰胺凝胶电泳;银染

中图分类号 S563.2 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）33-11636-02

Considerations for Study in Polyacrylamide Gel Electrophoresis Process

WU Jian-zhong1， WANG Yu-ping2， XU Yuan-yuan2 et al

（1. Industrial Crops Institute of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences，Harbin， Heilongjiang 150086;2. College of Life Sciences of Harbin Normal University， Harbin， Heilongjiang 150025）

Abstract [Objective] The aim was to get clear specific bands， in order to better analyze SRAP markers. [Method] Sample amount and voltage condition of polyacrylamide electrophoresis were tested.at the same time， glue， silver dyeing time， the developer deployment and so on were made a detail discussion on the operation of the flash. [Result] 7 μl of sample amount， 1 000 V of voltage was the most appropriate， and could get clear DNA banding and specificity belt to distinguish the effect of belts. [Conclusion] The study laid a solid technical foundation for convenient operation and subsequent analyses process.

Key words Flax; Polyacrylamide gel electrophoresis; Silver staining

基金项目 哈尔滨市科技创新工程青年基金项目（2013RFQYJ010）;黑龙江省农科创新青年基金项目（2012QN009）;国家农业部科技支撑计划基金项目（2013BAD01B03）。

作者简介 吴建忠（1983- ），男，内蒙古乌兰察布人，助理研究员，在读博士，从事作物遗传育种方面的研究。

收稿日期 2014-10-20

聚丙烯酰胺凝胶电泳是由Raymond和Weintraub于1959年利用人工合成的凝胶作为支持介质创建的一种电泳方式，极大地提高了电泳技术的分辨率，开创了近代电泳的新时代[1]。聚丙烯酰胺凝胶电泳在生物化学和分子生物学中对蛋白质、多肽、核酸等生物大分子使用最普遍，被人们称为是对生物大分子进行分析鉴定的最后、最准确的手段，即“Last Check”。 聚丙烯酰胺凝膠具有可分离不同分子量的生物大分子、灵敏度高、化学惰性好、重复性好、透明度好等优点，目前尚无更好地支持介质能够取代它[2]，但其不足之处在于操作过程繁琐[3]。SRAP标记在亚麻基因型分析中使用普遍，该标记方法能产生大量特异性条带[4]，为了得到清晰的特异性条带，更好地分析SRAP标记产物，必须注意操纵过程中的每一个细节。……