马保亮 魏良淑 刘桂玲 卢礼萍

摘要：在pH=7.0，t=37℃条件下，采用荧光光谱和紫外可见-吸收光谱研究了β-紫罗兰酮与β-乳球蛋白的相互作用。研究的结果表明：这种相互作用使β-乳球蛋白发生内源荧光猝灭，其机制为静态猝灭。通过计算得到了两者的结合常数（k=0.605×103L/mol）和结合位点数（n=1）。

关键词： β-紫罗兰酮;β-乳球蛋白;荧光猝灭; 同步荧光谱; 紫外可见-吸收光谱;

引言

β-紫罗兰酮（β-ionone） 是一种芳香族化合物，结构（如图2）中含有一个芳香苯环，具有疏水性。它广泛存在于天然食物中，比如水果、蔬菜、谷物及牛奶中，在医药工业中还可以用于合成维生素A和β-胡萝卜素[4，5]，這与人们的生活息息相关。β-紫罗兰酮是一个单体，却表现出较强的抗癌作用[6，7]。研究蛋白质与β-紫罗兰酮的相互作用，可以为了解β-紫罗兰酮的生物活性机制提供重要线索。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

F-4600型荧光分光光度计（日本日立公司）;UV-1800型紫外可见分光光度计（上海Shimadzu公司）;UB-10标准型PH计（上海华耀贸易公司 ）;FA1604B型电子分析天平（北京赛多利斯有限公司）;

β-乳球蛋白和β-紫罗兰酮购买于美国Sigma公司;磷酸钠缓冲液所用试剂为国内生化公司购置的分析纯;所用水为超纯去离子水。

1.2 实验方法

准确称量β-紫罗兰酮并配置成浓度为1mmol/L的溶液，准确称量β-乳球蛋白并配置成5 mg/ml的溶液，其中使用的缓冲液均为磷酸钠缓冲液（pH=7.0），置于4 的冰箱中保存。

在10 ml比色管中依次加入pH=7.0的缓冲溶液、1.0mlβ-乳球蛋白溶液和一定量的β-紫罗兰酮溶液，然后在27 和37 水浴锅中充分培养30分钟后开始测试荧光光谱。……