内质网应激相关蛋白在百草枯致大鼠急性肺损伤中的变化
2014-10-21白雪盛英杰蔡雪王耀戢新平
白雪 盛英杰 蔡雪 王耀 戢新平



DOI:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2014.08.012
基金项目:辽宁省教育厅高等学校科研基金资助项目(L2010682)
作者单位:110004 沈阳,中国医科大学附属盛京医院急诊科
通信作者:戢新平,Email: jxpwh_ok@163.com
百草枯(paraquat,PQ)又名对草快,其20%的溶液称克无踪,是一种有机杂环类触杀、灭生型高毒性除草剂。人类误服百草枯后,无特效解毒剂,中毒病死率极高[1],其主要死因早期为急性肺损伤[2],后期进展为不可逆性肺纤维化[3]。百草枯中毒的发病机制尚未完全清楚[4],大量研究显示细胞凋亡参与百草枯所致的急性肺损伤[5]。本研究通过建立百草枯中毒大鼠的急性肺损伤模型,初步探讨内质网应激途径介导的细胞凋亡在百草枯诱导的大鼠急性肺损伤中的作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物
健康SPF级Spragne-Dawley(SD)大鼠80只,雄性(由中国医科大学附属盛京医院实验动物中心提供),体质量200~250 g。
1.2 主要试剂与仪器
20%百草枯水溶液购于中国先正达南通作物保护有限公司(用无菌生理盐水将1 mL克无踪稀释至100 mL混匀,配制成2 mg/mL溶液);兔抗葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein,GRP78)、兔抗生长停滞和DNA损伤诱导基因153(C/EBP homology protein/growth arrest and DNA damage-inducible gene,CHOP/GADD153)多克隆抗体购自美国Cell Signaling公司;GAPDH多克隆抗体购自美国Cell Signaling公司;超敏二步法免疫组化检测试剂购自中国北京中杉金桥生物技术有限公司。显微镜型号:日本Nikon E800。
1.3 方法
1.3.1 动物分组与模型建立 根据预实验结果设计,因染毒组在实验过程中有死亡,故增加实验动物数量,以保证所观察的各个时间点动物数量相同。SD大鼠随机(随机区组法)分为对照组(40只)、百草枯染毒组(40只)。①百草枯染毒组(简称PQ组):按20 mg/kg计算,腹腔注射配制的百草枯溶液;……
