都勇 揭志军 何燕超 钱凌

(复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸内科，上海 200240)

肺癌的发生发展是多基因变异和环境因素共同作用的结果［1］。DNA修复基因的序列中因单个碱基突变而造成的单核苷酸多态性(single nueleotide polymorphism，SNP)，可导致编码氨基酸的异常，影响蛋白的功能，最终影响个体DNA修复能力(DNA repair capacity，DRC)，使个体对肿瘤的易感性增加［2］。本研究采用聚合酶链反应–限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)技术检测着色性干皮病基因D(Xeroderma pigmentosum gene D，XPD)和X线交叉互补修复基因1(X-ray repair cross complementing gene 1，XRCC1)在肺癌患者和健康志愿者中的SNP，探讨其与肺癌的关系以及易感基因和吸烟的交互作用，旨在为肺癌的早期筛查及病因研究提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年1月—2013年9月在我院住院的肺癌患者150例，所有患者均经支气管镜或肺穿刺活检病理检查诊断为肺癌，且均未接受化疗及放疗。150例肺癌患者中，小细胞肺癌30例，非小细胞肺癌120例;120例非小细胞肺癌患者中，鳞癌52例，腺癌48例，其他类型(如大细胞癌、肉瘤样癌及类癌)20例。对照组选取我院同期健康体检者150例(对照组)，胸部CT检查及血清肿瘤标志物检测未见异常。两组均无高血压、糖尿病及冠心病等慢性疾病病史，无呼吸系统其他疾病史。所有研究对象入组前均签署知情同意书。

1.2 研究方法 清晨空腹抽取外周静脉血2～4 mL，用EDTA抗凝剂抗凝，贮存于－20℃。采用DNA提取试剂盒提取基因组 DNA，贮存于－80℃。设计目的基因相关引物，引物序列及PCR扩增条件见表1，扩增产物用2%琼脂糖凝胶电泳观察。购置目的基因相应限制性核酸内切酶，将限制性核酸内切酶与PCR扩增产物加入相应酶切体系，酶切反应后将酶切产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，观察各电泳条带，判断各标本的基因型，见表2。……