王兵

葡萄膜炎病因复杂，类型繁多，主要累及葡萄膜、视网膜血管、视网膜及玻璃体等组织，占致盲眼病的第3～7位[1]，葡萄膜炎病程较长，主要发生于青壮年，严重影响患者的生活质量，危害性很大[2]，环磷酰胺对CD4淋巴细胞有明显抑制作用，并通过抑制体液免疫降低了外周淋巴细胞IL-17的表达[3]从而起到治疗葡萄膜炎的作用。本研究通过对比分析环磷酰胺治疗EAU的资料，来探讨环磷酰胺对EAU治疗效果。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选取SPF级雄性动物Lewis大鼠54只,周龄6～8周，体重150～180g(北京维通利华实验动物技术有限公司提供)。所有动物均按照视觉与眼科学研究协会中关于使用动物进行眼科与视觉研究的要求进行饲养和处理。使用过程中遵循天津市科学技术委员会颁布的《实验动物管理条例》。

1.2 主要试剂和仪器 牛S抗原，苏木精液；PH7.4，0.02mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)；聚合HRP标记羊抗兔IgG、DAB；弗氏完全佐剂(complete Freund adjuvant， CFA)；白喉-破伤风-百日咳菌苗；规格为1.5ml Eppendorf管；裂隙灯显微镜及照相系统(日本Olympic公司BX51型400倍光学显微镜)；电脑全自动组织脱水机；浓度20g/L环磷酰胺液。

1.3 方法

1.3.1 诱导剂的配置 诱导剂的配置：取15mg牛S抗原溶解于15ml PBS缓冲液中，过滤、除菌，抽取等量浓度为lmg/ml的牛S抗原溶液与弗氏完全佐剂混匀乳化。混匀1h后，将乳化成功的溶液放置于冰块上，待用。

1.3.2 EAU模型制作和分组 采用随机数字法将所有大鼠随机分为实验组和正常对照组，其中实验组大鼠48只，正常对照组6只。实验组：取30μg制备好的诱导液，在大鼠双后足垫皮内注射，同时腹腔内注射白喉-破伤风-百日咳菌苗0.1ml。……