间接分光光度法测定利福平
2014-09-13左国强李晓乐李全民
左国强, 李晓乐, 李全民, 陈 威
(1.济源职业技术学院 冶金化工系,河南 济源 454600; 2.河南师范大学 化学与环境科学学院,河南 新乡 453007)
利福平(rifampin)是一种广谱抗生素类药,能抑制细菌DNA转录合成RNA,可用于治疗结核病、肠球菌感染等.利福平测定方法主要有极谱法[1]、HPLC法[2-4]、流动注射化学发光法[5-6]、分光光度法[7-8]等,而利用铁氰化钾K3[Fe(CN)6]探针试剂[9]间接测定利福平含量的方法鲜有报道.本文以K3[Fe(CN)6]为探针试剂,探讨以间接分光光度法测定药物样品中利福平含量的方法.
1 反应机理
利福平结构中含有多个苯羟基,具有还原性,与Fe3+发生氧化还原反应后,生成的Fe2+与探针试剂K3[Fe(CN)6]反应,产物为可溶性普鲁士蓝KFeⅢ[FeⅡ(CN)6][10],根据Fe3+电子得失情况推测利福平与其反应的化学计量之比为1∶3.反应机理可能如下:


2 实验部分
2.1 主要试剂与仪器
试剂 利福平(沈阳双鼎制药有限公司)配制成30 μg·ml-1溶液;利福平滴眼液(沧州光明药业有限公司),利福平胶囊(成都锦华药业有限公司),铁氰化钾(AR,天津化工厂),氯化铁(AR,成都市科龙化工试剂厂),均配制成1.5×10-2mol·L-1溶液;醋酸醋酸钠缓冲溶液(pH=4),其他试剂均为分析纯,水为二次去离子水.
仪器 T6紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器公司).
2.2 实验方法
准确移取适量利福平溶液,2.0 ml FeCl3溶液,2ml K3[Fe(CN)6]溶液于25 ml比色管中,用醋酸醋酸钠缓冲调节溶液到pH=4,用蒸馏水稀释至刻度,室温下放置30 min,以试剂空白为参比,在735 nm处测其吸光度.
3 结果与讨论
3.1 吸收光谱
分别绘制试剂空白溶液、利福平、反应产物(可溶性普鲁士蓝KFeⅢ[FeⅡ(CN)6])的吸收光谱(图1),其……
