王 乐 李午平 黄 燕

肿瘤化疗疗效与患者的免疫机能密切相关，研究表明，许多癌细胞在化疗后仅被药物杀伤而未死亡，这部分癌细胞的清除有赖于免疫系统[1-6]。非霍奇金淋巴瘤(NHL)是一类淋巴系统恶性肿瘤，随着疾病的发生发展，患者的免疫机能常处于低下状态[7]，而CD4/CD8值是一项重要的免疫指标，在免疫状态监测等领域有着广泛而重要的应用，目前，NHL患者化疗前CD4/CD8值与化疗近期疗效的关系尚未明确。本研究采用流式细胞术(FCM)测定了74例NHL患者化疗前的CD4/CD8值，并分析了该指标与化疗近期疗效的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

入选的74例患者均为我院2012年1月至2013年11月收治的，其中男性47例，女性27例；年龄15～75岁，中位年龄49岁；所有患者均经病理组织学检查确诊为NHL，治疗的一线方案为CHOP。其中Ⅰ期12例，Ⅱ期 17例，Ⅲ期25例，Ⅳ期20例(Ann Arbor分期)；有B症状者25例，无B症状者49例。所有患者近3个月内未接受化疗，化疗前卡氏评分≥60分，重要器官功能基本正常，预计生存期≥3个月，并有可测量评价的客观指标。

1.2 方法

化疗前采用直接免疫荧光标记全血溶血法和流式细胞术(FCM)，检测患者外周血T淋巴细胞亚群：用贝克曼库尔特公司的三色荧光标记混合单抗CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC5或mouse IgG1-FITC/PE/PC5(同型对照)标记EDTA抗凝全血，贝克曼库尔特Optilyse-C溶血液裂解红细胞，生理盐水洗涤、重悬，在贝克曼库尔特 EPICS-XL流式细胞仪上测定淋巴细胞中CD3+CD4+和CD3+CD8+细胞的百分比，并计算CD4/CD8值。

治疗一线方案为CHOP：CTX 750 mg/m2，Ⅳ，d1；ADM 50 mg/m2，Ⅳ，d1；VCR 1.4 mg/m2(最大剂量2 mg) Ⅳ，d1；PDN 100 mg PO，d1-5，21～28天为1个周期，必要时由临床医生进行调整。全组患者均化疗2～6个周期。每化疗2个周期后进行1次疗效评价，有效者继续采用原方案化疗，可达6个周期；无效者改用其他方案。化疗中常规给予止吐、保肝等对症处理，化疗结束后复查血常规、肝肾功能，出现Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制时给予对症处理。

1.3 疗效评价标准

化疗疗效按照2013版NCCN评价指南分为：完全缓解(CR),部分缓解(PR),稳定(SD)以及进展(PD)；以CR+PR为有效率。每化疗2个周期后进行疗效评价。

1.4 统计学方法

应用SPSS 17.0软件进行数据分析，率的比较采用卡方检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CD4/CD8值与NHL临床特征的关系

74例患者中，共有16例患者CD4/CD8值偏低(参考值范围1.02～1.94)，占21.6%，CD4/CD8值与患者年龄、性别、Ann Arbor分期和B症状均无相关性(表1)。

表1 CD4/CD8值与 NHL临床病理特征的关系(例，%)

注：*为连续校正法。

2.2 近期疗效与CD4/CD8值的关系

全部患者均化疗2个周期或以上，化疗2个周期时74例患者均可评价疗效，有效率为77.0%，其中CD4/CD8值偏低组有效率为62.5%，CD4/CD8值正常或偏高组有效率为81.0%，P>0.05，差异无统计学意义；化疗至4个周期时，51例患者可评价疗效，有效率为82.4%，其中CD4/CD8值偏低组有效率为54.5%，CD4/CD8值正常或偏高组有效率为90.0%，P<0.05,差异有统计学意义。

3 讨论

肿瘤与免疫的关系，是当前肿瘤研究的一大热点。目前已知，在多种血液和实体肿瘤中，肿瘤的发生发展、治疗的疗效和预后都与机体免疫机能有密切关系。在肿瘤发生发展过程中，肿瘤细胞对免疫系统的破坏是一个普遍现象，因此，患者在确诊时便常处于免疫力低下的状态[7]；另一方面，近来的研究显示，免疫系统对受化疗药物杀伤的肿瘤细胞具有的更强的识别和攻击能力[1]，此外，免疫系统对治疗后少量残留肿瘤细胞的清除、对肿瘤复发的防范以及预后的改善都有重要意义[8]。这就凸显了在临床实践中对肿瘤患者进行免疫状态监测的必要性。

辅助T细胞(CD3+CD4+)和胞毒T细胞(CD3+CD8+)是细胞免疫的主要组成部分，在免疫系统对抗肿瘤的过程中起着至关重要的作用，CD4/CD8值是反映免疫功能的重要指标，CD4/CD8值偏低代表患者免疫功能低下。本研究中，我们对74 例非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者化疗前CD4/CD8值进行了测定，结果表明，有相当一部分(21.6%)患者的免疫功能低下，这与我们的预期相吻合。有研究表明，肿瘤细胞可以利用几乎所有的免疫抑制途径，如上调抑制性T细胞数量、分泌抑制性细胞因子等手段，对免疫系统进行抑制从而实现免疫逃逸[9]；而按照克隆进化学说，实现免疫逃逸是肿瘤发生发展的关键步骤之一[10]。本研究还发现，CD4/CD8值偏低与患者年龄、性别、Ann Arbor分期及B症状均无相关性，这提示免疫抑制在NHL患者中可能普遍存在，而非局限于上述某一特定患者群体；但由于本研究病例数有限，且观察指标不够全面，还需要进一步的研究来分析免疫抑制和各种临床特征有无相关性，以便确定在未来的临床实践中，究竟是应该对所有患者进行免疫状态监测，还是对特定患者群体进行监测。

有研究显示，化疗疗效与机体免疫状态密切相关[1-6]，因此，我们推断，患者CD4/CD8值与化疗近期疗效可能存在关联。本研究中，患者2个周期化疗疗效与CD4/CD8值无相关性，但4个周期化疗疗效与CD4/CD8值显著相关，这表明，免疫系统对化疗疗效的促进作用可能需要较长时间才能显现。此后续研究中，我们还需要更大的样本量来进一步确认2个周期化疗疗效是否确实与CD4/CD8值无关。

上述结果表明，CD4/CD8值与NHL患者化疗近期疗效有密切联系：CD4/CD8值偏低患者的近期疗效不如CD4/CD8值正常或偏高者，说明免疫系统可能确实在化疗中发挥了作用。后续研究中，我们需要在免疫缺陷动物模型上进一步验证此结论并阐明其机制，还需要在样本量更大、观察指标更全面的临床研究中确认CD4/CD8值偏低是否是影响化疗近期疗效的独立因素。如果上述观点均得以确认，那么接下来的问题是：化疗前CD4/CD8值及其在化疗过程中的变化是否和远期疗效相关？能否通过CD4/CD8值(并综合考虑其他影响因素)来预测特定患者的疗效，并据此调整化疗方案？能否研制药物对CD4/CD8值进行干预以改善化疗效果？这一系列问题都有赖于大量深入的后续研究，但无论如何，本研究都给出了正面的提示，为进一步的研究提供了基础。

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