高血糖大鼠局部脑缺血再灌注损伤及拜阿司匹灵的干预作用
2014-09-13宋妮娜孙文芳郑瑞红
宋妮娜 高 政 孙文芳 赵 英 郑瑞红
(大连医科大学附属二院,辽宁 大连 116031)
如何更好地预防脑血管病的发生、发展成为各国学者关注的热点。脑缺血再灌注损伤及急性期伴发的高血糖状态是近年来研究的重点问题。阿司匹林是神经科常用药,其在缺血性脑血管病的二级预防中已经得到普遍认可。本研究旨在通过预防性应用拜阿司匹灵,观察在高血糖状态下,SD大鼠脑缺血再灌注后脑组织病理形态、神经功能缺损情况以及抑凋亡基因bcl-2的表达。
1 材料与方法
1.1动物及分组 健康雄性SD大鼠36只,体重180~220 g,血糖正常,术前禁食12 h。随机分为:对照组(n=18)、拜阿司匹灵组(n=18),各组按缺血90 min再灌注3 h(n=6)、6 h(n=6)、24 h(n=6)分为三个亚组。
1.2实验方法
1.2.1给药方法 拜阿司匹灵研磨成粉末状,生理盐水稀释溶解成混悬液。拜阿司匹灵组大鼠在手术前3 d灌胃,剂量为6 mg/kg。
1.2.2大鼠高血糖模型制备具体过程 栓线前血糖值>11.1 mmol/L表示模型建立成功。大鼠大脑中动脉(MCA)闭塞的脑缺血再灌注模型制备参照改良的 Longa-Zea线栓法〔1〕制作大鼠MCA梗阻再灌注模型。于栓塞90 min不再麻醉拔出栓线,分别于再灌注后3 h、6 h、24 h(每个亚组6只)处死动物。
1.3观察指标
1.3.1HE染色观察 脑组织切片进行常规HE染色,光镜下观察脑缺血损伤组织学特点、坏死性神经元特征等。
1.3.2神经功能缺陷评分 参照具体评分标准分别于再灌注后3 h、6 h、24 h进行神经功能评分。
1.3.3用SP免疫组织化学方法测定bcl-2的表达 每张切片在10×20倍显微镜下随机选取缺血区内的4个不重叠的视野,计数bcl-2免疫反应阳性细胞数量。……p>
