房颤大鼠心房肌组织结构及KV1.5蛋白和 mRNA表达的变化
2014-09-13丁绍祥刘维军
丁绍祥 柳 茵 刘维军 李 琳
(青海大学医学院,青海 西宁 810000)
心房颤动(AF)是最常见的持续性室上性心律失常,随年龄增大其发病率逐渐增加〔1〕。目前我国人群的平均患病率为0.77%,随老年人口数量的增多,患病率有增加的趋势〔2〕。AF时不仅有心房结构重构,也有心肌电重构,因此,研究AF时心房肌细胞膜上离子通道的改变对揭示AF的发生机制及治疗无疑有重要意义〔3〕。超速延迟整流钾通道(Kur)在人类仅存在于心房肌,是重要的复极电流〔4〕。它在-30 mV时激活,激活时间常数为2~18 ms(25℃),快通道开放时间约50 ms,因此,主要作用在心房肌细胞平台期,使2相动作电位时程(APD)缩短,并缩短心房有效不应期(AERP)。然而,在人类慢性AF研究中发现IKur明显减少,由其所致的动作电位时程的延长无法终止心AF动,引起人们对AF治疗的思考〔5〕。大鼠AF时IKur蛋白密度改变目前意见尚不一致,其改变是促进AF抑或抑制AF尚未见相关明确报道。在目前 “AF促AF”的理论中,心房肌细胞膜离子通道电重构的表达尚存在较大争议。大鼠AF时IKur的改变及心房结构的改变以及二者之间的关系将有助于人们对AF发病机制的认识,并促进人们对AF发病机制的进一步研究。
1 材料与方法
1.1材料 SD大鼠由兰州大学动物实验中心提供,动物合格证号:SCXK(甘)2008-0012;引物合成(上海捷瑞:KV1.5-正义链5'-GCTTCATCAAGGAAGAGGAGAA-3',KV1.5-反义链5'-CACGAGCAACTCAAAAGTGAA C-3',371 bp;β-actin-正义链 5'-CGTGCGTGACATTAAAGAGAAG-3',β-actin-反义链5'-GGCATAGAGGTCTTTACGGATG-3',262 bp);RT-PCR试剂盒(北京天根);KV1.5多克隆抗体(一抗,山羊抗鼠,美国Santa Cruz);兔抗山羊多克隆抗体(二抗,北京中杉金桥);生物心电图记录仪(澳大利亚ML818);生物组织自动脱水机(湖北亚光ZT-12P);PCR扩增仪(德国 Biometra);……
