刘 刚 李 畅 曹雅东 任 强 陈为龙 朱海超 卢英强

(吉林省公安厅，吉林 长春 130000)

老年患者慢性脑缺氧与神经细胞变性疾病密切相关。P53作为转录因子，调控一系列基因的表达，其靶基因表达产物在细胞老化、细胞周期调控及凋亡的发生中发挥重要作用〔1,2〕。本研究小鼠脑缺氧后不同时间段P53表达变化。

1 材料与方法

1.1动物分组及模型建立 雄性昆明系小鼠50只，随机分为正常对照及脑缺氧组。脑缺氧组分别于术后2、8、24 h、1、3、6、9、12、16 d处死，共10组。手术结扎右侧颈总动脉，10％水合氯醛(0.35 g/kg体重)腹腔内注射麻醉，剪去颈部皮毛，消毒皮肤后沿中线切开皮肤，暴露右侧颈总动脉后，结扎后缝合皮肤，置鼠笼喂养。正常对照组仅切开颈部皮肤，但并不结扎动脉。

1.2方法

1.2.1HE染色 脑组织标本用10％甲醛溶液固定48 h，石蜡包埋，5 μm厚连续切片，常规HE染色。

1.2.2免疫组化染色检测P53 试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司，按试剂盒说明书操作，用已知阳性的切片做阳性对照，PBS代替一抗为阴性对照。采用CMIAS多功能真彩色病理图像分析系统测量神经细胞内平均灰度值。

1.3统计学分析 采用SPSS13.0软件行单因素方差分析和t检验。

2 结 果

2.1HE染色 脑缺氧2 h后，脑实质内神经细胞尼氏体溶解消失，损伤灶周围神经细胞尼氏体溶解消失，并伴有周围间隙增宽，呈脑水肿改变。缺氧24 h后，脑实质神经细胞出现变性坏死。缺氧120 h后，可见有小胶质细胞增生。

2.2颅脑损伤后随时间变化P53表达 在正常颈动脉未结扎脑组织中，P53表达量较少；P53在颅脑损伤8 h后表达……