王爱霞 董雅洁 狄婷婷 申兴斌 王瑞婷

(承德医学院，河北 承德 067000)

阿尔茨海默病(AD)患者脑内的老年斑由β淀粉样蛋白(Aβ)异常沉积形成〔1〕，继而诱发广泛的炎症反应，近几年的研究显示炎症反应在AD中的作用越来越受到关注。小胶质细胞(MG)是中枢神经系统的免疫效应细胞，在机体固有免疫和多种神经退行性疾病的炎症反应中发挥重要作用，MG在AD发生中的作用是目前AD研究的热点之一〔2〕。有研究报道Aβ斑块沉积与神经元损伤和MG的功能密切相关，但注射Aβ后不同时间点Aβ25～35对大鼠海马神经元及MG的影响未见报道。本研究分析Aβ对大鼠海马神经元的影响及与MG变化的关系。

1 材料与方法

1.1动物 雄性Wistar大鼠40只，10～12周龄，体质量(260±20)g，SPF级，批号：0289310，由北京华阜康生物科技有限公司提供，生产许可证号：scxk京2009-0004。实验动物在SPF实验室〔No.SYXK (冀) 2009-0022〕饲养，自然光线，自由食水。

1.2试剂 Aβ25～35(Lot：111M4775V)，由Sigma公司提供，Aβ25～351 mg溶于500 μl无菌生理盐水(2 g/L)，-20℃保存，临用前置于37℃孵育3～5 d成凝聚态，cd11b抗体(Lot：Y-07D10A)，即用型SABC试剂盒(Lot：08A22C)及DAB显色试剂盒(Lot：08A04A22)由武汉博士德生物工程有限公司提供；Aβ25～35抗体(Lot：980287W)由北京博奥森生物技术有限公司提供。

1.3仪器 江湾Ⅰ型C脑立体定位仪，上海第二军医大学；Morris大鼠水迷宫，中国医学科学院药物研究所。

1.4实验分组及处理 实验分为正常对照组和模型组(4个时间点)，每组8只，适应性饲养1 w。第8天正常对照组双侧海马各注射无菌生理盐水5 μl，模型组双侧海马CA1区各注射凝聚态Aβ25～355 μl(10 μg)。模型组按照注射Aβ25～35后不同时间2、7、15、21 d处死分为四组。对照组及15 d、21 d模型组三组在注射Aβ 7 d后进行水迷宫实验。

1.5制……